以CP23重组蛋白为抗原建立检测微小隐孢子虫抗体间接ELISA方法的研究

摘要：以在E.coli高效表达的微小隐孢子虫子孢子表面抗原CP23为抗原，以辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗鼠IgG为二抗，建立了检测微小隐孢子虫抗体的间接ELISA方法。经检测筛选出最佳反应条件为1μg／孔纯化的E.coli表达的CP23抗原包被酶标板，用10％免血清进行封闭，以正常E.coli裂解上清液稀释待检血清。实验表明应用CP23重组蛋白作为诊断C.parvum抗原具有特异性高、抗原易纯化和成本低等特点。     

应用竞争PCR定量检测猪IFN—γ mRNA

运用RT—PCR从经ConA体外刺激培养的猪外周血单核细胞(PBMC)提取的细胞总RNA中扩增猪γ—干扰素(IFN—γ)的部分片段，经酶切鉴定后双酶切缺失中间一小片段，将余下的2个较大片段连接，并用相同的引物在相同条件下扩增连接产物，从而获得截短的同源性片段。将其纯化后克隆于pMDl8—T载体，重组质粒经酶切和PCR鉴定后进行序列测定，验证无误后作为竞争性模板内对照，一定比例稀释后分别与等体积经刺激培养的PBMC总RNA反转录产物进行PCR，产物电泳后经扫描分析获得各目标条带与竞争条带的溴化乙锭(EB)嵌入光密度值(IOD)，经校正后取上述两者比值的对数值作为Y轴，取已知竞争模板相应浓度的对数值作为X轴，绘制成竞争曲线。应用建立的竞争PCR对不同样品重复试验表明，本方法操作简单，结果可靠，稳定性高，适用于猪IFN—γ mRNA的定量检测。     

商品肉鸡新城疫免疫程序的筛选

1　材料鸡苗 :胜大肉种鸡场 ,品种 AA。疫苗 :ND- H1 2 0、新城疫克隆 - 30、IBD多价弱毒苗 (购自北京 )。抗原与血清 :ND标准抗原、血清 (购自哈兽研 )。饲料 :胜大饲料厂生产。场所 :胜大养鸡厂、胜大肉种鸡场。2　时间与方法2 .1　试验一时间 :2 0 0 1年 1 0月 31日～ 1 2月 2 0日。方法 :试验分 4组 ,每组 2 50只鸡 ;1组为益生素 ;2组为益康素 ;3组为中药组 ;4组为允许用抗生素组。 4个组分别用微量法定量测定新城疫抗体。免疫程序 :1日龄 ,ND-腺胃传支二联油苗注射 ,0 .3ml,同时用 ND- H1 2 0 -肾传支三联弱毒苗点眼、滴鼻 ,2头…     

如何应对农产品国际贸易技术壁垒

技术性贸易壁垒是指一个国家的政府或非政府机构,以维护国家安全、防止欺诈行为、保护人类健康或安全、保护动植物生命或健康及保护环境等理由,通过制定、发布和实施技术法规、标准和合格评定程序,形成限制其他国家产品进入该国市场的事实上的障碍。应对越来越严重的技术性壁垒是我国农产品出口要面对的现实课题。     

藏系绵羊随机扩增多态性DNA最佳反应体系的研究

以高原型藏羊的基因组DNA为模板，通过对RAPD反应体系中的各种参数进行优化试验，建立了适宜于藏系绵羊RAPD分析的最佳反应体系：在PE2400型DNA扩增仪的25μL反应体系中，模板DNA的量为60－120ng，引物量为4－8pmol，Mg^2 浓度为2.0mM，Taq DNA聚合酶为1－2.5U,dNTP浓度为150－200μM;94℃预变性3分钟后35次循环的参数设定为：94℃1分钟，36℃1分钟，72℃2.5分钟，最后72℃延伸10分钟，利用这些条件对藏系绵羊的基因组DNA进行RAPD分析，其结果的重复性和可靠性大为提高。     

葡萄病毒病研究进展

葡萄栽培历史悠久 ,主要靠扦插和嫁接等方法无性繁殖 ,导致病毒长期积累和重复感染 ,病毒病发生日趋严重。病毒侵染葡萄后 ,引起葡萄树势衰退(甚至树体死亡 ) ,产量降低 ,品质下降 ,经济寿命缩短 ,嫁接成活率降低 ,繁殖材料生根能力差 ,树体抗性减弱等许多不良后果。欧美等一些发达国家从2 0世纪 4 0年代开始研究葡萄病毒病 ,并于 195 6年成立了“国际葡萄病毒学会” (TheInternationalCouncilforStudyofVirusesandVirus likeDiseaseofTheGrapevine ,简称ICVG) ,该组织至今已召开了13届国际会议 ,有力地推动了世界葡萄病毒病害的研究…     

细胞凋亡的研究及进展

细胞凋亡(apoptosis)又称细胞程序性死亡(programmed cell death)是多细胞动物生命过程中必不可少的正常过程，它与细胞增殖具有同样重要的意义。它与生物体的生长发育以及生物体疾病的产生和控制都有极大的关联。因此，这一领域的研究受到了的生命科学研究的广泛重视，特别是近年来其研究发展非常迅速，研究的方法及检测手段都有了很大的提高，本文将从细胞凋亡的定义、形态学特征、诱导、检测方法、分子调控等方面综合分析国内外的研究进展。     

猪无名高热病的防治

前一阶段胶南市发生以体温升高为特征的猪高热病,给该市的生猪生产造成了一定的损失,严重影响了全市养猪业的健康发展.通过对20例临床病例的病料进行PCR检测,蓝耳病阳性率100%(20/20),圆环病毒病阳性率40%(8/20),伪狂犬阳性率40%(8/20),非典型性猪瘟阳性率10%(2/20),附红细胞体阳性率90%(18/20),猪流感及猪传染性胸膜肺炎均为阴性,分离到猪大肠杆菌、葡萄球菌两例.均为混合感染,最少3种,多者5种.现将本市发生猪无名高热病及防治措施综述如下:     

农业部成功研制出猪感染甲型H1N1病毒检测试剂盒

为切实做好生猪疫情防控工作，中国农业部及时组织专家开展联合攻关，5月2日已成功研制出猪感染甲型H1N1病毒RT—PCR检测试剂盒，可在5小时内完成猪感染甲型H1N1病毒快速检测。     

中华人民共和国农业部公告第1113号（具备饲料中“三聚氰胺”检测能力的饲料检测机构名录）

为综合利用畜牧饲料质检体系资源,全面开展饲料中三聚氰胺的检测工作,经我部核实,国家饲料质量监督检验中心(北京)等66个畜牧饲料质检机构具备饲料中三聚氰胺检测能力.