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猪流行性腹泻病(porcine epidemic diarrhea,PED)是一种高度接触性肠道传染性疫病,主要危害1周龄以内的仔猪,仔猪感染死亡率高达100%,是目前危害世界养猪业的主要疫病之一。本研究旨在制备针对猪流行性腹泻病毒S蛋白的特异性纳米抗体并鉴定其结合活性。作者原核表达并纯化PEDV S1蛋白,将纯化后的PEDV S1重组蛋白免疫双峰驼,第4次免疫后分离其外周血淋巴细胞,提取淋巴细胞RNA,反转录得到cDNA,通过巢式PCR扩增VHH片段,并构建至pCANTAB-5E载体中,电转化至TG1感受态细胞,得到VHH噬菌体抗体展示文库;随后,对构建的噬菌体抗体展示文库进行救援和3轮富集,利用噬菌体展示技术从中筛选针对PEDV S蛋白纳米抗体,通过ELISA验证筛选的纳米抗体的特异性和结合力。通过Western blot和间接免疫荧光验证纳米抗体与PEDV的结合活性。结果显示:成功表达并纯化PEDV S1蛋白,经4次免疫后,双峰驼血清中的特异性抗体效价达到了1∶256 000。构建的噬菌体展示文库的库容量为2.1×107,阳性率85%;对噬菌体展示文库3轮的淘选富集后,最终筛选出6株氨基酸序列不同的纳米抗体,ELISA结果显示,6株纳米抗体均对PEDV S1重组蛋白具有良好的结合力与特异性。随后验证了Nb3能够与PEDV结合,表明其具有良好的活性。成功筛选到针对PEDV S1蛋白的特异性纳米抗体,所筛选纳米抗体有望用于PED的诊断和治疗,同时为PEDV的致病机制研究提供抗体材料。 相似文献
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为探明盐渍化农田不同施氮水平下向日葵氮素吸收利用规律,采用15N同位素示踪技术进行田间微区试验,以不施氮处理(N0)为对照,设计3种施氮水平(N1=150 kg/hm2、N2=225 kg/hm2、N3=300 kg/hm2),于向日葵成熟期测定植株和0—100 cm土层土壤15N同位素丰度及总氮含量,研究各处理肥料氮素的去向及其利用机制。结果表明:向日葵氮素吸收量随施氮量的增加而增加,成熟期作物氮素吸收量在N2水平较不施氮显著增加38.7%;土壤氮和肥料氮对作物当季氮素吸收的贡献比例为84.9%和15.1%。N2水平下,肥料氮的贡献比例较N1增加35.7%,土壤氮的贡献比例较N1降低4.3%。肥料氮残留量随土层深度增加而减少,土壤中47.4%的残留肥料氮主要集中在0—20 cm土层。不同施氮水平下肥料氮去向均表现为氮肥损失率>氮肥残留率>氮肥利用率,N2施氮水平下氮肥利用率较N1、N3显著提高22.7%和14.6%,土壤残留率较N1、N3减少8.5%和8.6%。综... 相似文献
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泥鳅的生物学特性及养殖技术 总被引:8,自引:0,他引:8
泥鳅是一种生产潜力大、很有发展前途的养殖品种,国内外市场的需求量较大.主要阐述了泥鳅的生物学特性及人工养殖技术. 相似文献
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王志强 《河北农业大学学报(农林教育版)》2008,10(2):219-222
综合技术创新扩散和组织管理理论,以国家可持续发展实验区的发展建设和传播扩散过程为研究对象,构建了可持续发展实验区扩散过程模型以及国家可持续发展实验区扩散过程分析的理论框架,并利用系统模型实证分析了可持续发展实验区在我国发展和扩散现状,最后从技术创新传播学的角度为实验区发展建设提出了相关的政策建议。 相似文献
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华大麦4号耐迟播特性研究初报 总被引:1,自引:0,他引:1
华大麦4号是湖北省2004年8月审定命名的超高产优质饲用大麦新品种,在多年的种植过程中表现出较好的耐迟播特性.考察了华大麦4号3个播期(11月7日,正常播期;11月22日,迟播;12月7日,迟播)条件下的生育期、农艺性状、产量和产量组成性状以及品质性状的表现.结果表明,迟播对华大麦4号的生育期、农艺性状、产量及产量组成性状、品质性状的表现均有影响,对出苗至抽穗天数的影响大于对出苗至成熟天数的影响,对生育期天数的影响大于对生育期有效积温的影响,对穗数的影响大于对千粒重、穗粒数的影响.对蛋白质含量的影响大于对淀粉含量的影响,据此对华大麦4号迟播条件下的高产栽培技术及应用前景进行了讨论. 相似文献
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