鸽源支原体的分离鉴定

对来自武汉市郊某养鸽专业户及市场食用鸽共７０只采集口腔咽部粘膜拭子及其中１５只鸽子的气管、气囊和肺等材料进行了支原体的分离鉴定，其中口腔咽部拭子几乎１００％能分离到支原体，但均与细菌共存而不易纯化，其他部位均未分离到支原体。对已纯化的３４个分离物中的１９个进行了鉴定，用鸽支原体ＭＭＰ１株、鸽口支原体ＭＭＰ４株及鸽鼻支原体６９４株作为标准抗原制备抗血清，以代谢抑制试验进行了血清学鉴定。结果表明，所有分离物均能在修改ＦＭ－４培养基上生长，在固体培养基表面形成典型的“油煎蛋”状或“脐状”菌落；光镜下和电镜负染后观察，菌体多呈现球状、点状等多形态，经超薄切片后观察，菌体外无细胞壁包绕，仅有由３层单位膜构成的细胞膜结构，所有分离物在无醋酸铊及青霉素的培养基上连续传５代不回复为细菌形态，能在含有猪血清的培养基上生长，其中５株水解精氨酸而不发酵葡萄糖，１４株发酵葡萄糖但不水解精氨酸。经抗血清代谢抑制试验鉴定，前者为鸽支原体，后者为鸽口支原体。     

Identification and mapping of a novel Turnip mosaic virus resistance gene TuRBCS01 in Chinese cabbage (Brassica rapa L.)

We aimed to identify Turnip mosaic virus (TuMV) resistance genes in Chinese cabbage by analysing the TuMV resistance of 43 P₁ (resistant), 88 P₂ (susceptible), 26 F₁, 104 B₁ (F₁ × P₁), 108 B₂ (F₁ × P₂) and 509 F₂ individuals. All parents and progeny populations were mechanically inoculated with TuMV‐C4. Both F₁ and B₁ populations showed TuMV resistance. Resistant: susceptible ratios in the B₂ and F₂ populations were 1 : 1 and 3 : 1, respectively. TuMV resistance in P₁ was controlled by a dominant gene, TuRBCS01. Bulked segregation analysis was performed to identify simple sequence repeat or insertion or deletion markers linked to TuRBCS01. Data from 108 B₂ individuals with resistant or susceptible phenotypes were analysed using mapmake r/exp 3.0. Polymorphic marker sequences were blast searched on http://brassicadb.org/brad/ . TuRBCS01 was found to be linked to eight markers: SAAS_mDN192117a_159 (3.3 cM), SAAS_mDN192117b_196 (4.0 cM), SAAS_mDN192403_148 (13.0 cM), SAAS_mGT084561_233 (6.8 cM), BrID10723 (3.3 cM), mBr4041 (3.3 cM), SAAS_mBr4055_194 (2.6 cM) and mBr4068 (4.0 cM). Further, TuRBCS01 was mapped to a 1.98‐Mb region on chromosome A04 between markers BrID10723 and SAAS_mBr4055_194.     

用RAPD和SSR分子标记鉴定小金海棠F1代 杂种实生苗的研究

小金海棠（Malus xiaojinensis）具有多种抗逆特性，是苹果属植物中一种珍贵的野生种质资源。由于小金海棠具有无融合生殖特性，早期准确、快速、有效地鉴定其F1代杂种实生苗对于研究利用其众多抗逆基因具有重要意义。RAPD技术是现有鉴定果树杂种实生苗最为简单、快速和有效的分子标记技术，但RAPD技术本身存在一定的不稳定性。笔者对小金海棠和山荆子（M. baccata）F1代杂交实生苗79个单株进行了RAPD分析，并用SSR标记对RAPD标记的初步鉴定结果进行了进一步的验证。结果显示，RAPD标记鉴定出的杂种实生苗有72.2%得到SSR标记的证实。研究的结果还表明，“叠加”和“新带”两种RAPD带型，结合RAPD标记特异位点数可以为小金海棠F1代杂种实生苗提供可靠的鉴定依据。研究为利用RAPD技术早期快速鉴定果树杂种实生苗提供了新的信息和依据。     

新疆8个棉花品种（系）的指纹图谱分析

利用ISSR对8个新疆品种（系）进行指纹图谱构建。通过基因组多态性分析，从60条引物中筛选到11条扩增效果好的引物，用其中2条引物UBC809，UBC841建立8个品种的指纹图谱，统计品种鉴定的置信概率达到1／8388608。结果显示，ISSR分子标记技术对棉花品种的指纹图谱构建具有高效性和准确性。     

萃取法提取甘肃棘豆中的苦马豆素研究初报

将1.5kg甘肃棘豆干粉经水提取，提取液浓缩后用正丁醇萃取，萃取液加入稀硫酸调节pH7.0，回收溶剂，制成浸膏；将浸膏与二氧化硅粉末混匀后用氯仿萃取该浸膏中的小极性杂质。用氨性氯仿萃取，收集氨性氯仿萃取液，挥干后升华得到7.5 mg针状结晶，与苦马豆素标准样品对照进行TLC检测，其Rf值及斑点颜色与苦马豆素标准样品一致；通过熔点和IR、MS、1HNMR、13CNMR等鉴定其化学结构，为苦马豆素，计算甘肃棘豆苦马豆素的产率为5mg/kg。     

冬枣黑疔病病原菌鉴定

近年在河北省、山东省等地的冬枣果实上发现一种新病害—冬枣黑疔病,又称黑斑病或果实黑点病。经2004-2005年在河北省和山东省7市县调查,从18批次219个冬枣病果样品中分离得到653个分离物,经筛选、纯化和回接试验,依照柯赫氏法则对冬枣黑疔病病原菌进行了研究,根据病原菌的形态特征,病原菌鉴定为毁灭茎点霉Phoma destructivaPlowr.和细交链孢Alternaria alternata(Fr.)Keissler。     

氟磺胺草醚降解菌的分离鉴定及生长特性研究

氟磺胺草醚广泛应用于大豆田防除阔叶杂草,其长残留问题十分严重,微生物降解是解决氟磺胺草醚残留问题的有效途径。利用高压富集的方法,从长期施用氟磺胺草醚的田间土壤中,分离筛选出6株能够以氟磺胺草醚为唯一碳源生长的降解菌,其中一个菌株在查氏液体培养基中培养5d,对40mg a.i./L氟磺胺草醚的降解率为92.13%。通过形态特征鉴定并对该菌株18S rRNA的部分序列进行基因测序,对其在系统发育分类学上的地位加以分析,同时研究环境条件对其生长的影响。结果表明,该菌株为真菌,初步鉴定为黄曲霉(Aspergillus flavus),实验室命名为TZ1985。菌株TZ1985最适生长温度为25℃,最适培养基pH值为7.0,生长最适葡萄糖含量为0.6%,生长最适氟磺胺草醚的浓度是10mg a.i./L。     

微波辅助萃取诸葛菜中的总黄酮研究

采用微波辅助萃取乙醇浸提法从诸葛菜中提取黄酮类物质,对所提取的黄酮类物质进行验证,并用紫外分光光度法测定其含量。结果表明,诸葛菜中总黄酮含量为0.380 7 mg/ml,回收率为97.79%,其纯度和产率均较高。该方法采用全物理过程,无任何污染,是提取诸葛菜中黄酮类物质的有效途径。     

野生稻DNA导入后代的苗期耐冷性鉴定

[目的]对野生稻DNA导入后代进行苗期耐冷性鉴定。[方法]以普通野生稻的基因组DNA导入宁夏主栽品种宁粳16号和宁粳23号所产生的后代07DJ-4、07DJ-26、07DJ-27、07DJ-28、07DJ-39、05D4-92、05D4-160和05D4-161为试材,以宁粳16号和宁粳23号为对照,各材料幼苗经8℃低温处理后对其进行苗期(三叶期)耐冷性鉴定。[结果]各材料幼苗经低温处理后其株高、干重和叶绿素含量等均有所降低。在低温胁迫下,05D4-92、05D4-160和05D4-161的幼苗平均枯死率较其他参试品种低24.7%,且其株高、植株干重、叶绿素含量和叶绿素荧光参数等受低温影响较小,是耐冷性较强的材料。[结论]野生稻DNA导入后代05D4-92、05D4-160和05D4-161的耐冷性较好。