天津地区猪源大肠杆菌对抗菌药物敏感性测定

对从天津市各区主要养猪场分离的48株猪大肠杆菌进行了抗菌药物敏感性监测,结果表明,17种抗菌药物中抑菌作用最强的是头孢氨苄,敏感菌株为83.4%,其次是阿米卡星,敏感菌株为72.9%;对青霉素的耐药性为100%,其次是四环素,耐药性为85.4%。全部受检菌株均表现出不同程度的耐药性,多数为5耐以上多重联合耐药。其中12耐菌株所占比例最大(16.7%),其次为11耐菌株(14.6%)。48株耐药菌中,共有40种耐药谱型。     

猪瘟病毒石门株动物传代脾毒与组织培养细胞毒E2基因序列的分析

根据已发表的猪瘟病毒基因组序列,设计合成了2对引物,以脾毒和细胞毒总RNA为模板,利用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、套式聚合酶链式反应(nPCR)及测序技术,对多次动物传代和致细胞病变的猪瘟病毒主要囊膜糖蛋白E2基因的核苷酸序列进行了测定,用DNAstar软件比较分析了E2基因的核苷酸和氨基酸序列的同源性。结果发现,脾毒和标准石门株核苷酸序列的同源性为99.4%,氨基酸序列的同源性为99.0%;细胞毒与标准石门株核苷酸序列的同源性为98.3%,氨基酸序列的同源性为96.7%。由此说明,猪瘟病毒经猪体多次传代和组织培养致细胞病变后,均能保持遗传的稳定性。     

猪银染核仁组成区遗传规律的研究

采用群体分析法,证明猪Ag—NORs的遗传方式属等显性。提出了细胞型频率与染色体型频率、平均细胞型频率与平均染色体型频率的概念及其估算方法。发现在随机交配群体中,按Ag—NORs标记的(平均)细胞型频率与(平均)染色体型频率之间存在着类似于哈代—温伯格定律的关系,平均染色体型频率有类似于基因频率的作用,可用于群体间遗传相似性的分析。猪Ag—NORs的多态性主要是由于8Ag—NORs平均染色体型频率的不同所致。     

5—20公斤仔猪及20—35公斤后备猪最佳日粮配方筛选研究

本文为筛选5—20公斤仔猪及20—53公斤后备猪最佳日粮配方的饲养试验。设四种日粮类型:1、亚麻饼型;2、血粉型;3、低菜籽饼型;4、高菜籽饼型。将40头35日龄断奶的甘肃白猪仔猪按随机单位组设计要求分为四组。综合评定结果并选出最佳日粮配方。试验得出的最佳配方为:5—20公斤仔猪阶段—低菜籽饼型日粮配方体系,其平均日增重0.428公斤,饲料增重比1.83:1,64日龄达20公斤活重;20——35公斤后备猪阶段—血粉型日粮配方,其平均日粮增重0.535公斤,饲料增重比2.56:1。在5—10,10—20,20—35公斤阶段可依次分别使用3、4、5%血粉替代适量鱼粉,效果甚佳;并可依次分别使用2、4、9%莱籽饼,效果较好。在10—20公斤阶段,4%菜籽饼和6%亚麻饼合用时效果好。     

青年猪骨软骨病病理组织学变化与分类

研究了265头青年猪1 060个关节(附关节和腕关节各530个)骨软骨病的病理组织学变化.肉眼观察主要表现为患部关节软骨变色、充血,关节面粗糙、裂开、糜烂或凹陷,并根据其损伤程度进行分类,即正常、轻度、中度和严重,分别占21.7%、33.3%、29.0%、16.0%.显微观察特征为关节软骨局部增厚,软骨细胞增生、肥大;在一些区域软骨细胞变性、坏死,坏死区易形成裂隙;骨质内形成软骨岛.结论:青年猪有很高的骨软骨病发病率,后肢比前肢严重,并表现典型的骨软骨病组织病理学特征.     

植酸酶对仔猪生产性能、养分表观消化率及粪、骨、血中钙、磷影响的研究

选用48头体重相近,体质健康的三元杂交(杜×长×大)仔猪为试验动物,随机分为2组,每组3个重复,每个重复8头,对照组为正常磷酸氢钙水平日粮,实验组日粮中添加5000 U/g植酸酶100 g/t替代50%磷酸氢钙。试验结果表明:在饲料中添加5000 U/g的植酸酶,能够使猪的日增重较对照组提高8．85%(P＜0．05),日采食量较对照组提高3．42%,饲料转化效率提高5．08%;钙、磷的表观消化率分别提高了14．29%(P＜0．05)、18．83%(P＜0．05),对粗蛋白质的表观消化率影响不大;添加植酸酶后粪中钙的排出减少21．05%(P＜0．01),粪中磷的排出减少17．91%(P＜0．01);骨中的钙、磷变化不大,全血中的钙提高了9．30%,磷提高了17．91%(P＜0．01);血清中钙提高12．62%,磷提高了7．08%。     

猪瘟病毒石门株E2基因4个抗原结构域的原核表达

【目的】对猪瘟病毒石门株E2基因进行原核表达，以期获得可溶性表达产物，为检测猪瘟抗体的ELISA试剂盒的研制奠定基础。【方法】用PCR技术扩增了重组S21质粒载体上的猪瘟病毒石门株E2基因的4个主要抗原结构域ABCD，A1A2，B和C。分别将4个片段克隆于pMAL－p2X载体中，经PCR、双酶切和测序鉴定，E2基因的4个主要抗原结构域片段的位置、大小和读码框均正确。将4个片段分别转化到表达菌TB1、BL21、BL21－CodonPlus(DE3)-RP和BL21(DE3)中，共得到16株重组表达菌，用IPTG进行诱导表达，对表达产物进行SDS-PAGE电泳和免疫印迹分析。【结果】E2基因的4个主要抗原结构域均可在这4种表达菌中表达，但以BL21－CodonPlus(DE3)-RP的表达效果最好，可表达出可溶性并且产量较高的目的蛋白。免疫印迹结果表明，表达的目的蛋白可以被猪瘟阳性血清和针对E2蛋白的单克隆抗体所识别。【结论】只表达目的基因的抗原结构域，可以缩短表达片段的长度，有利于获得可溶性目的蛋白，并且具有良好的血清学反应的特异性。     

猪Jiv基因的克隆表达与多克隆抗体制备

【目的】克隆猪Jiv蛋白核心区的2 112bp的基因片段,构建其原核表达载体后进行蛋白的表达和纯化,制备抗猪Jiv蛋白的多克隆抗体。【方法】利用RT-PCR方法,从猪脾脏组织RNA中扩增得到猪Jiv基因,将其克隆到pMD19-T载体并测序,以此为基础构建原核表达载体pET32a-Jiv,转化E.coli Rosetta(DE3)感受态细胞中,利用IPTG诱导表达,获得大量包涵体形式的猪Jiv融合蛋白。通过镍离子螯合层析柱对表达的目的蛋白进行纯化,对纯化后的包涵体蛋白进行透析复性,以每只新西兰白兔400μg蛋白的初次免疫剂量和500μg蛋白的加强免疫剂量进行免疫,共免疫5次,采集血清,采用间接ELISA法检测抗体效价达到一定水平后,收集抗体,利用Western blot检测抗体特异性。【结果】克隆得到长度为2 112bp的猪Jiv基因片段;构建的pET32a-Jiv在E.coli Rosetta(DE3)感受态细胞中经诱导后高效表达,SDS-PAGE结果显示,纯化得到分子质量约为95ku的猪Jiv融合蛋白;测得的猪Jiv蛋白多克隆抗体效价达1∶6 400;Western blot检测结果证实,所获得抗体能够有效地应用于猪Jiv蛋白抗原的检测。【结论】成功地克隆了猪Jiv基因,制备了抗猪Jiv蛋白的多克隆抗体。     

泛农花猪繁殖性状遗传参数的初步估测

本文对泛农花猪8头公猪及其44窝后代的若干繁殖性状表型参数和遗传参数,进行了初步估计,其结果如下:1.1982年的平均乳头数13.68个,总产仔数11.14头,产活仔数10.42头,初生个体重1.18公斤,初生窝重12.17公斤,断奶个体重18.15公斤,断奶窝重156.49公斤,断奶仔数8.57头。2.乳头数、总产仔数、产活仔数、初生个体重、初生窝重、断奶个体重和断奶仔数的遗传力各为0.23、0.18、0.34、0.87、0.75、0.11、0.69。3.产活仔数与初生窝重呈强正相关;初生个体重与断奶个体重和初生窝重与断奶仔数呈中等正相关;初生个体重与初生窝重和断奶仔数,以及产活仔数与断奶仔数均呈弱正相关。     

抗猪瘟病毒单克隆抗体的研究——Ⅱ抗猪瘟兔化弱毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用聚乙二醇沉淀浓缩纯化猪瘟兔化弱毒中国株(SFV-C)免疫 BALB/C 小鼠,取其脾脏,制备淋巴细胞,与 FO 骨髓瘤细胞融合,经 EliSA 检测和有限稀释法克隆化,最后筛选出5株对SFV 的单克隆抗体杂交瘤细胞.所制成的腹水抗体,一株只对 SFV-C 发生特异性反应,四株与SFV-S,SFV-F 及 BVDV oregon 发生微弱的交叉反应.细胞上清液的 EliSA 效价为1:800～1600,腹水效价为1:10~6～10~7.