文蛤C1q基因的克隆与表达及其重组蛋白活性的研究

利用构建的文蛤cDNA文库,克隆得到了文蛤C1q基因全长cDNA序列,该序列全长1213bp,5′UTR为316bp,3′UTR为372bp,开放阅读框长度为525bp,编码174个氨基酸。在文蛤C1q(MmC1q)蛋白中,C1q结构域与软体动物、两栖类动物和脊椎动物中的C1q结构域均具有较高的同源性。通过荧光实时定量PCR,MmC1q mRNA在所检测的各个组织中均有表达,在肝胰脏中表达量最高。在细菌感染试验中,文蛤受鳗弧菌感染后,C1q相对表达水平有明显的上升调节,注射2h,MmC1qmRNA表达量最高,为对照组的2.19倍。包含成熟肽的MmC1q cDNA片段被重组,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,采用牛津杯法对MmC1q重组蛋白进行体外抑菌试验,但并未检测到明显的抑菌活性。     

早酥梨病程相关基因非表达子1基因（NPR1）克隆及原核表达

本研究以成年早酥梨(Pyrus bretschneideri cv.Zaosu)叶片为材料,通过RT-PCR克隆早酥梨病程相关基因非表达子1基因(NPR1)并获得其全长序列1771 bp,开放阅读框为1761 bp,编码586个氨基酸(GenBank登录号:FJ769372).利用NCBI/Blastp和ClustalX软件进行相似性分析表明,目的基因编码蛋白质序列与日本梨(p.pyrifolia)、秋子梨(P.ussuriensis)、苹果(Malus xdomestica)、烟草(Nicotiana tabacum)和拟南芥(Arabidopsis thaliana)的NPR1蛋白相似性分别为99%、98%、98%、67%和59%.将其连接pGEX-4T-1原核表达载体并转化大肠杆菌(EScherichia coli)BL21,经IPTG诱导表达获得大小约为91 kD的目的融合蛋白,融合蛋白主要以包涵体形式表达,表达量约占总蛋白17%.     

球磨杠柳木质素化学结构特性

对球磨的杠柳(Periploca sepium)采用含有0.05mol/L HCl的80%液体二氧六环在85℃处理4h、二甲基亚砜在85℃处理4h,以及8% NaOH在50℃处理3h,得到86%的原本木质素.采用FTIR、UV、液态1H和13C-NMR研究了酸性二氧六环、二甲基亚砜和碱溶性木质素组分的结构特征.结果表明:温和条件下,球磨与酸水解对分离的木质素大分子结构破坏不大.其中,温和酸水解使半纤维素和木质素之间醚键发生显著断裂,并使半纤维素发生部分降解.由于酸性二氧六环溶解的木质素主要来自初生壁,而碱溶性木质素主要来自次生壁,导致酸性二氧六环溶解的木质素与二甲基亚砜和碱溶性木质素结构不同.     

瓯江彩鲤体色调控相关因子MC1R的克隆与表达分析

黑素皮质素1受体(melanocortin 1 receptor,MCIR)是动物黑色素合成通路中的关键基因之一,对动物的体色和毛色有重要影响.瓯江彩鲤(Cyprinus carpio var.color)具有5种基本体色类型(“全红”、“粉玉”、“大花”、“粉花”和“麻花”),其中后3种带有黑色斑点或斑块,是研究动物黑色素合成机制的良好材料之一.克隆了瓯江彩鲤的MC1R基因,并进行了“全红”、“大花”、“粉玉”、“粉花”4种体色间的表达差异分析.研究发现,瓯江彩鲤的MC1R基因的全长cDNA序列为1 914 bp,包括637 bp 5’-UTR(非转录区)、311 bp3’-UTR及966 bp ORF(开放阅读框).该基因由一个外显子编码(321个氨基酸),有7个跨膜结构域.瓯江彩鲤与鲫的编码区核苷酸同源性达98％,与斑马鱼达93％;不同体色间的编码区只存在一个核苷酸无义突变(C/G),因而氨基酸序列完全相同.qRT-PCR表明,MC1R基因在眼睛的表达量显著高于皮肤、肌肉、鳃、肾脏、鳔、心、肝等组织(P＜0.05);但在4种体色间不存在显著的表达差异(P＞0.05).研究结果表明:瓯江彩鲤体色类型中的黑色斑块不是由MC1基因直接决定,还有待对其它体色相关基因或调控因子的研究.研究亮点:对在黑色素合成通路中起着类似“开关”作用的MC1R基因进行了克隆、序列分析和瓯江彩鲤体色间的表达差异分析,排除了MC1R基因与瓯江彩鲤黑色斑纹的直接相关性,为鱼类体色变异相关基因研究积累了有益资料.     

崇明岛深层土壤有机碳空间分布及碳储存特征分析

对上海崇明岛开展5种不同种植类型(粮田、菜田、果园、生态林和湿地)1m深度土壤的碳普查,应用地统计方法分析其深层土壤有机碳含量的空间分布特征,研究不同种植类型对土壤有机碳分布和储存的影响,探明土壤碳循环规律。结果表明,崇明岛深层土壤平均有机碳含量为3.94g·kg~(-1),不同深度土壤有机碳含量在8.73~1.72g·kg~(-1),有机碳储量在2.30~0.47×10~6t,耕层土壤(0-40cm)有机碳储量占总量的65.14%。不同深度土层(0-20、20-40、40-60、60-80和80-100cm)有机碳含量空间分布图表明,各层土壤有机碳含量分布特征大致相同,仅湿地土壤有机碳含量在60cm深度以下相对其它种植类型有所提高。种植类型对深层土壤有机碳分布影响显著,土壤有机碳密度大小表现为菜田粮田果园湿地生态林,土壤有机碳储量则表现为粮田湿地生态林菜田果园。     

猕猴桃果实乙烯代谢的研究

刚采收的猕猴桃硬果不产生乙烯,也无 ACC 氧化酶活性,但有少量 ACC 存在。随着果实的软化,乙烯开始出现并很快达到释放高峰,乙烯的释放与 ACC 氧化酶的活性及 ACC的含量变化一致。用外源乙烯或机械伤处理加速了猕猴桃果实内源乙烯释放的原因,是这些处理促进了 ACC 的合成并增加了 ACC 氧化酶的活性。与冷藏相比,气调贮藏强烈地抑制了ACC 氧化酶的活性和乙烯的释放。浸钙处理对猕猴桃果实的乙烯释放、ACC 氧化酶活性及ACC 含量影响不大,因此浸钙处理后减缓猕猴桃果实软化的作用可能是通过其他途径实现的。     

光明顶上种核桃 远近闻名小康村——云南省大理州漾濞彝族自治县苍山西镇光明村

"头顶云雾脚踩霜,荞麦粑粑萝卜汤"这曾是旧光明村人生活的真实写照。光明村位于漾濞彝族自治县东部,苍山西坡腹地,居住着彝、汉、白、傣、傈僳5个民族,少数民族人口占总人口的65.04%。       

剪除部分颖壳对宁夏水稻糙米生长发育的影响

在温室盆栽条件下,以粳稻普通稻宁粳28号和优质稻宁粳38号为材料,于开花后两天设剪壳、剪壳后套硫酸纸袋保湿透光、剪壳后套硫酸纸袋外再套牛皮纸袋保湿挡光及不剪壳4个处理,研究谷壳对糙米生长发育的影响.结果表明:①剪壳处理的糙米千粒质量低于不剪壳处理,但差异不显著.随着糙米生长发育进程的推进,差异显著性增大;②剪壳后套硫酸纸袋处理糙米的千粒质量显著高于不剪壳处理,并随着生长发育的推进,其差异增大;③剪壳后套硫酸纸袋再套牛皮纸袋处理的糙米千粒质量显著高于剪壳后套硫酸纸袋;④剪壳、剪壳后套硫酸纸袋、外再套牛皮纸袋处理对普通稻宁粳28号糙米千粒质量的影响大于优质稻宁粳38号;⑤谷壳对粳稻普通稻宁粳28号糙米生长发育的影响比对优质稻宁粳38号的明显.     

Ss-Bi1 encodes a putative BAX inhibitor-1 protein that is required for full virulence of Sclerotinia sclerotiorum

Sclerotinia sclerotiorum is a destructive necrotrophic plant pathogen with global distribution. Although S. sclerotiorum has been studied extensively, substantial research on aspects of the pathogen's ability to cause disease is still needed. Bax inhibitor-1 protein functions as a suppressor of programmed cell death and is involved in the response to biotic and abiotic stress in animals, plants and yeast. In this study, we functionally characterized a putative Bax inhibitor-1 protein, Ss-Bi1, from S. sclerotiorum. Ss-Bi1 is predicted to contain a BAX inhibitor-1-like super family domain and shows significant homology with many BAX inhibitor-1 proteins. High expression levels of Ss-Bi1 were observed in hyphae under various stresses. Targeted silencing of Ss-Bi1 resulted in reduced virulence in host plants. Ss-Bi1 gene-silenced strains were more sensitive to heat stress and ER stress than the wild-type strain. The results suggest that Ss-Bi1 encodes a putative BAX inhibitor-1 protein that is required for full virulence of S. sclerotiorum.     

Evidence for estrogen receptor expression during medullary bone formation and resorption in estrogen-treated male Japanese quails (Coturnix coturnix japonica)

The temporal expression of estrogen receptor (ER)-α and ER-β mRNA was examined in male Japanese quails. Femurs of quails receiving 17β-estradiol underwent RTPCR and histochemical analysis 1 to 15 days after treatment. Untreated quails were used as controls (day 0). Between days 0 and 5, cells lining the bone endosteal surface differentiated into osteoblasts, which in turn formed medullary bone. Expression of ER-α was already observed on day 0 and increased slightly during bone formation whereas ER-β was hardly detected throughout this process. After osteoclasts appeared on the medullary bone surface, this type of bone disappeared from the bone marrow cavity (days 7~15). ER-α expression simultaneously decreased slightly and ER-β levels remained very low. These results suggest that estrogen activity mediated by ER-α not only affects medullary bone formation but also bone resorption.