鞘磷脂对小鼠肌卫星细胞C2C12成肌分化的影响

研究通过检测鞘磷脂对小鼠肌卫星细胞C2C12成肌分化的影响,旨在为阐明鞘磷脂对解偶联蛋白1（UCP1）基因敲入猪骨骼肌生长的影响提供理论依据。用ELISA法检测野生型猪和UCP1敲入猪背部肌肉及血清中总鞘磷脂含量;利用CCK8法检测不同浓度（0、5、20、50和100 μg/mL）鞘磷脂对C2C12细胞增殖和毒性的影响,并通过形态学观察和分化前后细胞成肌分化标记基因生肌因子5（Myf5）、生肌决定因子（MyoD）、肌细胞生成素（Myogenin）、生肌调节因子4（MRF4）的表达检测,建立C2C12成肌分化体系;在成肌分化培养基中添加上述不同浓度的鞘磷脂,诱导分化6 d后,通过形态学和Myogenin免疫荧光染色观察肌管的形成及成肌分化标记基因的mRNA表达水平检测,确定鞘磷脂的最佳添加浓度。用筛选出的最佳鞘磷脂添加浓度诱导细胞成肌分化,在2、4和6 d收集细胞,利用实时荧光定量PCR检测周期蛋白相关基因CyclinD1、CyclinE、CDK2和CDK4的表达水平,CCK8法检测诱导2 d细胞的活力。结果发现,与野生型猪相比,UCP1-KI猪背部肌肉组织中总鞘磷脂含量显著增加（P<0.05）;血清鞘磷脂含量差异不显著（P>0.05）;不同浓度鞘磷脂对未分化C2C12细胞的增殖无显著影响（P>0.05）;成肌分化6 d后,C2C12细胞形成明显的肌管,成肌分化标记基因Myf5、MyoD、Myogenin、MRF4的mRNA和蛋白水平均极显著上调（P<0.01）;与未添加鞘磷脂的对照组相比,20 μg/mL鞘磷脂组有更多肌管形成,Myogenin阳性信号和肌管融合指数均显著增加（P<0.05）,Myogenin、MRF4基因的表达量显著提高（P<0.05）。利用20 μg/mL鞘磷脂诱导细胞分化,在分化2 d时,处理组CyclinE、CDK4基因表达量显著高于对照组（P<0.05）,细胞活力也显著高于对照组（P<0.05）;分化6 d后,处理组CyclinD1、CyclinE、CDK2、CDK4基因表达量均显著低于对照组（P<0.05）。本研究结果表明,20 μg/mL鞘磷脂能够提高小鼠肌卫星细胞C2C12分化早期细胞活力和成肌分化效率,可为研究鞘磷脂对骨骼肌生长的影响提供一定的参考。     

Organic matter in density fractions of water-stable aggregates in silty soils: Effect of land use

The location of soil organic matter (SOM) within the soil matrix is considered a major factor determining its turnover, but quantitative information about the effects of land cover and land use on the distribution of SOM at the soil aggregate level is rare. We analyzed the effect of land cover/land use (spruce forest, grassland, wheat and maize) on the distribution of free particulate organic matter (POM) with a density <1.6 g cm⁻³ (free POM_<1.6), occluded particulate organic matter with densities <1.6 g cm⁻³ (occluded POM_<1.6) and 1.6-2.0 g cm⁻³ (occluded POM_1.6-2.0) and mineral-associated SOM (>2.0 g cm⁻³) in size classes of slaking-resistant aggregates (53-250, 250-1000, 1000-2000, >2000 μm) and in the sieve fraction <53 μm from silty soils by applying a combined aggregate size and density fractionation procedure. We also determined the turnover time of soil organic carbon (SOC) fractions at the aggregate level in the soil of the maize site using the ¹³C/¹²C isotope ratio. SOM contents were higher in the grassland soil aggregates than in those of the arable soils mainly because of greater contents of mineral-associated SOM. The contribution of occluded POM to total SOC in the A horizon aggregates was greater in the spruce soil (23-44%) than in the grassland (11%) and arable soils (19%). The mass and carbon content of both the free and occluded POM fractions were greater in the forest soil than in the grassland and arable soils. In all soils, the C/N ratios of soil fractions within each aggregate size class decreased in the following order: free POM_<1.6>occluded POM_<1.6-2.0>mineral-associated SOM. The mean age of SOC associated with the <53 μm mineral fraction of water-stable aggregates in the Ap horizon of the maize site varied between 63 and 69 yr in aggregates >250 μm, 76 yr in the 53-250 μm aggregate class, and 102 yr in the sieve fraction <53 μm. The mean age of SOC in the occluded POM increased with decreasing aggregate size from 20 to 30 yr in aggregates >1000 μm to 66 yr in aggregates <53 μm. Free POM had the most rapid rates of C-turnover, with residence times ranging from 10 yr in the fraction >2000 μm to 42 yr in the fraction 53-250 μm. Results indicated that SOM in slaking-resistant aggregates was not a homogeneous pool, but consisted of size/density fractions exhibiting different composition and stability. The properties of these fractions were influenced by the aggregate size. Land cover/land use were important factors controlling the amount and composition of SOM fractions at the aggregate level.     

花生AhFAD2基因的多态性及其与籽粒油酸/亚油酸比值间的相关性

高油酸低亚油酸的花生油稳定性好、营养价值高,培育高油酸/亚油酸比值(O/L)的花生品种一直是花生育种的重要目标。为深入了解控制花生O/L比值的遗传基础,提高花生品质育种效率,对鲁花14等13个花生品种Δ¹²脂肪酸脱氢酶AhFAD2基因的编码区进行了序列分析。结果表明,该基因在13个花生品种中皆存在3类转录本,即AhFAD2A、AhFAD2B和假基因。台山珍珠、台山三粒肉、江田种、Chico、05-21063、白沙1016的基因型是OL1OL1OL2OL2;临桂麻壳、飞龙乡、勾了种、鲁花14、花育19、花育23的基因型是ol1ol1OL2OL2;鲁花11的基因型可能存在OL1ol1杂合等位位点。在个别品种中AhFAD2A基因的若干位置存在多态性;AhFAD2B基因相对保守,所测13个花生品种的核苷酸序列基本相同。结合13个花生栽培品种籽粒中O/L比值测定的结果,初步探讨了基因多态性与O/L比值之间的关系,同时对假基因可能存在的功能进行了讨论。     

粳稻新品种龙稻12号的选育及栽培技术

粳稻新品种龙稻12号是以东农418/上育397为母本,龙青4号/746为父本杂交,采用系谱法选育而成,是香型软米粳稻品种,需活动积温2 450℃左右,适合黑龙江省第二积温区插秧栽培。介绍了该品种的选育过程、特征特性及栽培技术。     

优质棉“GM12”高产高效栽培技术研究

采用五因子五水平正交旋转二次回归组合设计 ,通过多因子田间试验和计算机模拟选优 ,提出了优质棉“GM1 2”高产、优质、高效的两套优化栽培方案。其中方案 1为 :种植密度 3 1 50 0株 hm2 ,施用尿素 562 .5kg hm2 、1 2 %钙镁磷肥 795kg hm2 、氯化钾3 52 .5kg hm2 ,果枝 1 8层。其目标是皮棉产量达 1 80 0kg hm2 ,纤维的长度、细度、强度达优质标准 ,经济效益达 450 0元 hm2 。根据优化方案 ,并结合生产实际 ,提出了“GM1 2”的栽培技术要点     

表达hrpZPsg12基因的重组枯草芽孢杆菌工程菌株构建及其生防活性评价

【目的】提高生防枯草芽孢杆菌JN209的稳定性及生防活性。【方法】利用基因工程技术,构建含hrpZPsg12基因的分泌表达载体,采用电转化方法将从大豆细菌性斑点病菌(Pseudomonas syringae pv.glycinea)中克隆到的hrpZPsg12基因转化至枯草芽孢杆菌JN209中,同时采用抑菌圈法测定宿主菌与基因工程菌抑菌活性的变化,评价其作为生物农药在田间对烟草病毒病的生防效果。【结果】成功构建了重组枯草芽孢杆菌基因工程菌JN209/pWB980-hrpZPsg12。抑菌活性分析表明,基因工程菌株在保持原始宿主菌株抑菌活性的同时,对部分靶标菌的抑菌效果有明显提高。烟草病毒病田间小区防治试验表明:与原始宿主菌JN209相比,新构建的基因工程菌JN209/pWB980-hrpZPsg12对烟草病毒病的防效有明显提高。【结论】改良的基因工程菌在抑菌谱和抑菌活性方面均有明显提高,同时对烟草病毒病也有较好的防治效果,可进一步开发为新型生物农药。     

hrpZPsg12转基因烟草及其抗性评价

【目的】将来源于大豆细菌性斑点病菌(Pseudomonas syringae pv.glycinea)Psg12菌株的hrpZPsg12基因导入烟草"云烟87",对转化植株进行烟草普通花叶病毒(TMV)、烟草马铃薯Y病毒(PVY)和烟草野火病菌(Pseudomonas syringae pv.tabaci)的抗病性鉴定,为培育多抗烟草新品系奠定基础。【方法】采用农杆菌介导法,将hrpZPsg12基因转入烟草"云烟87"中,对T0和T1代转基因植株进行PCR检测、Southern杂交,并对T1代转基因植株的抗病性进行评价。【结果】hrpZPsg12基因成功转入"云烟87"中,PCR检测表明共获得7株T0代阳性植株、35株T1代阳性植株。对T1代PCR阳性植株进行Southern检测,表明外源目的基因hrpZPsg12已经整合进烟草基因组中,并可在转基因后代植株中稳定遗传。抗病性测定表明,T1代转基因烟草对TMV和PVY表现高抗,对烟草野火病表现中抗。【结论】获得了高抗TMV和PVY及中抗烟草野火病菌的转hrpZPsg12基因植株20和15株。     

苯酚在BS-Tw80复配修饰膨润土和高岭土上吸附的比较

以不同阳离子交换量(CEC)的膨润土和高岭土为基质,采用两性表面修饰剂十二烷基二甲基甜菜碱(BS-12)+非离子表面修饰剂吐温80(Tw80,T)进行复配修饰,以批处理法对比研究了不同修饰比例、温度、离子强度和pH条件下,两性复配修饰膨润土和高岭土对苯酚吸附的效果,并从吸附等温线、温度效应和热力学角度探讨比较了吸附机制.结果表明,土样CEC是影响复配修饰土样对苯酚吸附的关键因素,相同比例两性复配修饰的膨润土对苯酚吸附量均高于高岭土.不同因素对于复配修饰膨润土和高岭土吸附苯酚的影响总体具有良好的一致性,复配修饰均显著增强了膨润土和高岭土对苯酚的吸附能力,两种不同基质的50倍CEC的BS-12修饰基础上不同碳碳比例 Tw80(50BS+T)修饰土样随Tw80修饰比例加大对苯酚吸附量增大,100倍CEC的BS-12修饰基础上不同碳碳比例 Tw80(100BS+T)修饰土样随Tw80修饰比例加大对苯酚吸附量降低,复配修饰两种吸附基质对苯酚吸附量均随着温度、pH的升高而降低,随着离子强度的增大而升高.Henry模型适用于描述苯酚在各供试土样的吸附.BS+T复配修饰膨润土对苯酚的吸附决定于焓减和熵增,是多种吸附形式并重的吸附机制,而BS+T复配修饰高岭土是焓减决定的以疏水分配吸附为主的吸附机制.     

温室无机相变材料性能优化研究

温室蓄热能力是影响温室内部环境的主要因素,相变材料蓄热能力强,正得到越来越广泛的应用.Na2HPO4·12H2O相变温度为35℃,十分适合应用于温室生产中,不过较大的过冷度使其应用受到限制.该文对Na2HPO4·12H2O过冷度的降低进行了研究,通过熔解-冷却试验及步冷曲线的测定,研究不同成核剂对Na2HPO·12H2O过冷度的降低效果.结果表明,在20 gNa2HPO4·12H2O中同时添加0.6 gNa2SiO3·9H2O和0.6g石墨可将Na2HPO4·12H2O过冷度降为0℃;同时复合体系进行重复性试验效果良好,进行5次和10次循环后,过冷度仍为0℃,相变时间17 min左右,具有良好的稳定性.