猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白纳米抗体的筛选及其对病毒复制的抑制效应

为获得猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)GP5蛋白的特异性纳米抗体,并探究其对病毒复制的抑制效应。使用原核表达系统将PRRSV-GP5蛋白大量表达后经镍柱亲和层析法纯化,使用所获的重组GP5蛋白免疫羊驼,并于第0、14、28、42天时采血,检测羊驼体内抗体效价后分离全血淋巴细胞,提取细胞总RNA,反转录后使用巢式PCR扩增出重链抗体可变区(VHH)片段,并与pCANTAB-5E载体相连后转化入TG1感受态细胞,利用噬菌体展示技术构建GP5-VHH噬菌体抗体展示文库。经连续三轮特异性噬菌体的筛选与富集后,淘选出与PRRSV-GP5蛋白高结合力的纳米抗体,通过间接ELISA方法鉴定其反应原性,后将所获的纳米抗体基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1(-)中,利用Lipofectamine3000转染至Marc-145细胞内,与PRRSV分别共孵育0、24、36、48、60、72 h,以探究所筛针对PRRSV-GP5蛋白的纳米抗体于胞内对病毒复制与转录产生的影响。结果表明,成功对PRR...     

奶牛乳热症的诊断与治疗

乳热症主要发生于高产奶牛,通常在3～6胎最易发生,初产母牛几乎不发病。据调查表明,本病多为散发,但复发率较高。对瘫痪母牛,即使在治疗顺利的情况下,病愈后产奶量平均下降10%;若同时伴发胎衣不下、乳房炎、酮病,则损失更大。发病原因主要为血钙浓度降低、大脑皮质抑制、脑缺氧导致脑贫血、血镁含量低、遗传因素等。     

广西某牛场奶牛分娩前后血清镁水平动态变化

镁(Mg2+)是动物体内的重要矿物元素之一,是细胞内除钾以外的第二大阳离子,是300种以上酶反应的辅助因子,所有涉及ATP的酶学反应都要求镁的存在.     

纳米维生素D3对蛋鸡生产性能的影响

本试验旨在研究产蛋鸡日粮中添加含量相同的普通维生素D3和纳米维生素D3对其生产性能及蛋壳品质的影响。试验结果表明纳米维生素D3可明显提高蛋鸡产蛋率和蛋壳强度,显著降低破蛋率和鸡群死淘率。证明纳米维生素D3的吸收利用率明显高于普通维生素D3。     

一列奶牛青草搐搦病的诊治

<正>青草搐搦病,又称为镁缺乏症,发病的主要特征为感觉过敏、共济失调、全身肌肉惊厥。本病的发生主要与奶牛草料营养组分、种植饲草地区土壤情况、施肥情况、饲草生长季节、气候温度、奶牛品种和年龄等有关。锦州市周围奶牛饲养户较多,在雨季期间,青草生长旺盛,这样多数奶牛饲养户放牧,使得奶牛采食大量青草,另外不注意添加充足的谷物饲料,造成青草搐搦病常有发生。     

七种猪常见病毒核酸磁-纳米微粒可视化快速检测技术的建立与应用

随着集约化养殖业的发展,规模化养猪场对于病原的早期快速检测需求逐步增高,本研究旨在建立针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)、猪瘟病毒(classical swine fever virus, CSFV)、猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)、猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)、猪伪狂犬病病毒(porcine pseudorabies virus, PRV)、猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus, TGEV)和猪细小病病毒(porcine parvovirus, PPV)等7种常见病毒病病原感染的广谱磁纳米微粒可视化(ultrasensitive nanoparticle visualization detection, UNVs)现场检测技术。根据不同病毒的复制酶区域的高度保守区域,设计探针和引物,通过探针的筛选和条件的优化...     

70～100 kg牦牛犊牛钠、钾、镁元素分布规律及生长需要量

为探究70～100 kg牦牛犊牛矿物质元素钠、钾、镁的分布规律及其生长需要量。在2020年11月至2021年1月开展试验,历时75 d,预试期15 d,正试期60 d。选取21头体况良好、体重[(60.44±4.59) kg]相近的牦牛犊牛(公),随机分为3组,即初期屠宰组(BL组)、中期屠宰组(M组)和末期屠宰组(F组),3组试验犊牛均饲喂同种饲料自由采食,分别在平均体重73.61、81.96和96.53 kg时屠宰,采集各组织样品称重并记录数据,测定组织中常量矿物质元素钠、钾、镁的含量,并分析犊牛机体矿物质分布规律,建立数学模型对生长需要量进行预测。结果表明：1)随着牦牛犊牛体重不断增加,肉重、内脏(含血液)重、皮重、毛重均显著增加(P<0.05),F组的骨重和脂肪重显著高于其他两组(P<0.05),骨骼生长速度减慢,而肌肉生长速度呈增加的趋势;2)钾在肌肉中分布量最大,在脂肪中的含量较少;钠、镁在骨骼中所占比重较大,其中镁少量分布于脂肪和毛中;3)牦牛犊牛生长后期的钠、钾、镁净生长需要量(NRG)预测公式分别为：NRG=1.0125×EBW^-0.0807     

猪流行性腹泻病毒S1蛋白-铁蛋白纳米颗粒的制备及其免疫原性

应用融合PCR技术获得猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)纤突(spike, S)蛋白的S1结构域基因与铁蛋白(ferritin, FTN)基因的拼接产物(S1-FTN),然后分别将S1基因和S1-FTN克隆至原核表达载体pCold 1,构建重组表达质粒pCold 1-S1和pCold 1-S1-FTN。将重组原核表达质粒分别转化大肠杆菌BL21,在低温(16℃)下用IPTG诱导重组S1蛋白和S1-FTN表达,通过SDS-PAGE和Western blot鉴定表达的目的蛋白,并在透射电镜下观察蛋白的形态。随后将24只6～8周龄雌性BALB/c小鼠随机分为3组：S1组、S1-FTN组和空白对照组,8只/组。每只小鼠肌肉注射40μg S1抗原,共免疫3次,分析S1-FTN纳米颗粒和S1蛋白诱导的免疫反应。结果显示,构建的原核表达载体pCold 1-S1和pCold 1-S1-FTN在低温下经IPTG诱导,能够分别表达S1蛋白和S1-FTN重组蛋白,2个蛋白均以可溶性形式表达,并且S1-FTN重组能够自组装形成纳米颗粒;S1-FTN纳...     

固体脂质纳米增强抗菌药物对胞内金黄色葡萄球菌活性的研究进展

金黄色葡萄球菌导致的乳房炎是危害奶牛养殖业最严重的疾病之一。抗菌药在胞内极易排出或失活,导致奶牛金黄色葡萄球菌乳房炎治疗效果差且容易复发。纳米粒子具有在巨噬细胞和上皮细胞等多种细胞中积累的能力,可提高药物在胞内的浓度和胞内停留时间,这使得它们可用于治疗细胞内感染。本文对固体脂质纳米抗金黄色葡萄球菌感染的研究进展进行综述,以指导和推动固体脂质纳米在治疗金黄色葡萄球菌乳腺炎方面的应用。     

酵母硒和纳米硒对乳鸽生产性能、肉中微量元素含量和血清抗氧化指标的影响

为研究酵母硒和纳米硒对乳鸽生产性能、肉中微量元素含量和血清抗氧化指标的影响,选取210只14日龄健康的美国王鸽,随机分成7组,每组3个重复,每个重复10只。对照组饲喂基础饲粮(硒含量0.08 mg/kg),试验组在基础饲粮中分别添加0.1、0.3、0.5 mg/kg硒的酵母硒或纳米硒。结果表明:饲粮中添加酵母硒、纳米硒对乳鸽平均日采食量、料肉比均无显著影响(P0.05);与对照组相比,添加0.5 mg/kg硒的纳米硒组平均日增重显著提高(P0.05)。饲粮中添加酵母硒、纳米硒均显著提高了乳鸽胸肌中硒的含量(P0.05),对铁、锌的含量无明显影响(P0.05)。与对照组相比,添加0.3、0.5 mg/kg硒的酵母硒和纳米硒组乳鸽血清中谷胱甘肽过氧化物酶、总超氧化物歧化酶活性及总抗氧化能力均显著提高(P0.05),丙二醛含量均显著降低(P0.05)。由此可见,饲粮中添加酵母硒和纳米硒均明显提高了乳鸽肌肉中硒的含量,增强了血清抗氧化功能;添加0.5 mg/kg硒的纳米硒显著提高了乳鸽的日增重,综合来看,添加纳米硒的效果优于酵母硒,且以添加0.3~0.5 mg/kg为宜。