糖蛋白的制备、结构分析及生理功能研究现状

糖蛋白广泛分布于生物体内,其糖链部分影响蛋白质的折叠和整体构象,蛋白质与糖链连接的特殊结构使其具备了各种生物活性,参与了人类许多生理功能及疾病的发生和预防。糖基或糖链与蛋白质肽链的链接方式主要有0一连接和N一连接2种。本文综述了糖蛋白的分类、分离纯化方法及其化学结构组成的分析方法,并介绍了某些糖蛋白的生理活性,对糖蛋白的开发利用具有借鉴作用。     

鲤血清转铁蛋白纯化及其与铁离子的结合特性

用硫酸铵分级沉淀法及制备性ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）法,获得含有鲤（Ｃｙｐｒｉｎｕｓｃａｒｐｉｏ）血清转铁蛋白（Ｔｆ）的ＰＡＧ条带,同时除去ＳＤＳ及考马斯亮蓝,分离纯化了转铁蛋白,并做铁离子结合试验及光谱分析。结果表明,转铁蛋白结合铁离子后的特异吸收峰为４６７ｎｍ,说明,去ＳＤＳ后转铁蛋白仍有很强的铁离子结合能力,用普通ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法测得鲤血清Ｔｆ分子量约为７４０００Ｄａｌ     

玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63有效成分的初步提取与纯化

为了解玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63的代谢产物和其生物活性,对该菌株进行摇瓶培养,从菌丝中提取到一种对棉花黄萎病菌有明显抑制作用的有效成分。经过XAD-1600型大孔吸附树脂,ODS C18硅胶中压柱分离得到黄白色粉末。HPLC检测后,初步断定该物质是一类非常相似的物质组成的混合物,并且极有可能具备互变异构的特性。     

黑曲霉酸性β-甘露聚糖酶的纯化及部分性质研究

黑曲霉(Aspergillus niger)WM20-11固态发酵成熟曲,经磷酸缓冲液浸提、硫酸铵分步盐析、DEAE-Sepharose fast flow阴离子交换层析、Sephadex G-100凝胶过滤层析等分离纯化手段,最终获得了Native-PAGE、SDS-PAGE纯的酸性β-甘露聚糖酶组分,其纯化倍数为25.08,收率为5.1%。Sephadex G-100凝胶过滤层析和SDS-PAGE测得纯酶的相对分子质量分别为39 kD和40 kD,表明该酶以单体形式存在;IEF-PAGE测得该酶的等电点为4.0;含糖量测定为19.6%;酶蛋白氨基酸组成中(Asp+Glu)/(Lys+Arg)为3.74。     

W-15菌株产生的纤溶酶蛋白的提取与纯化

为从微生物中获取溶栓药物,从土壤、豆豉中获得产纤溶酶活性高的1株菌株,命名为W-15。经检测,发酵上清液中纤溶活性的蛋白酶分子质量约为36 kDa,酶的比活为1 571 UK/mg。     

蓝莓花青素的研究进展

花青素作为一种天然食用色素,与合成色素相比,具有安全性高,资源丰富,且具有一定的营养和药理作用等优点,已在食品、医药、化妆品等领域得到了广泛的应用.近年来,由于蓝莓富含花青素,逐渐成为国内外研究的热点.本文综述了蓝莓的概况、蓝莓花青素的基本结构及种类、提取纯化技术、稳定性及其生理功能的最新研究进展,以期为蓝莓产业化发展中的技术问题提供一定的参考.     

一株曲霉的一种中温糖化酶的纯化及其部分酶学特性

本研究从广西花坪自然保护区采集的土壤中筛选获得了一株产糖化酶丝状真菌菌株57-45,通过形态学观察和真菌内转录间隔区（internal transcribed spacer,ITS）序列比对分析,将其初步鉴定为曲霉属（Aspergillus sp.）的一个种。纯化真菌57-45所产的一种胞外糖化酶经过硫酸铵分级沉淀、疏水层析和阴离子交换层析三步蛋白质纯化步骤,得到在SDS-PAGE上约60kD的单一蛋白质条带,薄层层析分析表明该纯化的蛋白质水解可溶性淀粉的产物只有葡萄糖,证明该纯化的蛋白质为糖化酶。纯化的糖化酶Km值为1.9mg/mL,Vmax为4148μmol/（min·mg）,最适作用pH5.5,最适作用温度50℃,在同步糖化发酵中有应用的潜力。金属离子Fe3＋、Zn2＋、Cu2＋对酶活有较强的抑制作用,EDTA对酶活有较强的促进作用。本文结果将为进一步研究曲霉糖化酶的酶学特性提供新的材料。     

番茄内生链霉菌S5的分离及其除草活性

采用植物内生放线菌分离方法从健康番茄（Lycopersicon esculentum）根中分离纯化出58株内生放线菌，从中挑选部分代表性菌株进行代谢产物除草活性检测，发现编号为S5的菌株的代谢产物对小麦（Triticum aesfivum L．）和绿豆（Phaseolus radiatus L．）种子的发芽有强烈的抑制作用，但对发芽后的幼苗生长无明显影响。以百喜草（Paspalum notatum）和狗牙根（Cynodon dactylon）为实验对象，证明S5菌株的代谢产物的确能抑制草籽的发芽，该活性具有潜在的除草效能。经初步鉴定，S5菌株为淡紫灰链霉菌淡青变种（Streptomyces lavendulaevar．glaucescens）。发酵条件实验结果表明，S5菌株在1％葡萄糖和0．3％牛肉膏的S培养基中，以2％接种量在pH7．0和25℃摇床培养，可得到最强的抑制种子发芽的生物活性。     

冬虫夏草中虫草酸的提取条件优化与纯化研究

为研究提取条件对冬虫夏草中虫草酸提取率的影响。以虫草酸提取率为考察指标,研究了提取方法、提取时间、提取温度、液固比对虫草酸提取率的影响。结果表明,提取虫草酸的最佳条件为:液固比为10∶1,提取温度为90℃,提取时间为1 h,在此条件下上虫草酸的提取率率为11.36%。利用Sevag法脱蛋白后经重结晶处理后,所得到的虫草酸纯度可达99.92%,这为进一步研究虫草酸的性质提供了物质基础。     

柚核中柠檬苦素纯化工艺的研究

以乙醇为提取溶剂,采用超声波辅助提取柚核中柠檬苦素,通过正交试验对提取工艺进行优化,并采用大孔吸附树脂纯化柠檬苦素。最佳提取条件为:料液比1∶10,超声时间30min,乙醇体积分数70%,超声提取2次。4020型大孔树脂分离纯化提取液的最佳工艺条件为:吸附流速1mL/min,体积分数70%的乙醇洗脱,解吸流速0.7mL/min,纯化后得到柠檬苦素的质量分数达83.77%。该工艺分离纯化效果好,成本低。