FQ-PCR在转基因产品检测中的应用研究进展

实时荧光定量PCR（real-time fuoreseent quantitative PCR,FQ—PCR）是近年来定量PCR技术中兴起的最新定量检测技术,因其具有灵敏性高、特异性强、结果精确、反应快速、安全可靠等优点,现已广泛应用于医学和生命科学的各个研究领域,论文就实时荧光PCR技术的主要原理、分类方法以及在转基因产品检测中的应用等进行简要综述。     

基于FT-MIR的三七粉末掺伪成分的定量检测模型研究

高品质三七价格昂贵,常以粉末形式出售.为实现快速检测市场上三七粉末掺伪成分的定量检测,该文使用傅里叶中红外光谱技术(FT-MIR)采集三七粉末及其伪品的光谱信息,使用标准正则变换(SNV)和基线校准(Baseline)方法对原始光谱进行预处理,通过协同区间(Si)、连续投影算法(SPA)、竞争自适应加权算法(CARS)等方法选择特征变量,分别建立偏最小二乘回归(PLSR)、支持向量回归(SVR)模型.严选出能体现纯净三七粉末样品与掺杂三七粉末样品之间区别的特征变量来建立定量模型,可以提高模型鉴别精确度和稳健性.决定系数R²、均方根误差(RMSE)用于评价定量模型的预测能力.实验结果表明,FT-MIR是定量检测三七粉末掺入伪品的有效方法.实验采用Si、 CARS和SPA 3种变量选择方法来提高模型的稳定性和预测精度,其中基于CARS方法挑选的特征变量训练的SVR和PLSR模型对三七粉成分检测都有较好的预测效果.利用模型能够快速准确地检测三七粉末中掺入的伪品含量,对市售三七粉质量分级以及维护消费者权益、保护其生命健康方面具有较高的应用价值.     

干旱胁迫下蒙农杂种冰草RT-qPCR内参基因的筛选

为了筛选出蒙农杂种冰草基因表达分析研究的最适内参基因,基于前期蒙农杂种冰草转录组数据(NCBI临时登录号：PRJNA777813),以不同干旱胁迫下蒙农杂种冰草茎和叶2个器官为材料,用RT-qPCR技术分析6个候选内参基因(CYP、GAPDH、G6PD、UBQ11、ACT11和TUB4)的表达情况,并利用Ct值和3个软件分析候选内参基因的表达稳定性。Ct值分析结果表明,6个候选内参基因在干旱胁迫下蒙农杂种冰草茎和叶中的Ct值为24～35,表达丰度适中,适合进行下一步筛选。geNorm、NormFinder及ReFinder综合分析后结果表明,GAPDH是干旱胁迫下蒙农杂种冰草不同器官基因表达分析的最佳内参基因,TUB4次之,CYP最差。为了提高准确性,干旱胁迫下蒙农杂种冰草也可同时使用两个内参基因组合,GAPDH和G6PD是最稳定的内参基因组合。     

文化创意旅游综合体核心区景观评价体系构建研究

文化创意旅游综合体作为新生事物,以文化创意为引导,将智力与旅游相结合,完成旅游产业由静态化到动态化的转变,促进目的地发展.核心区景观作为旅游综合体的主要竞争力,对旅游综合体建设具有重大意义.本文通过定量、定性结合分析法,确定指标与权重,结合模糊综合评价,对构建文化创意旅游综合体核心区景观评价体系进行研究,为文化创意旅游...     

长期施用沼液对土壤中四环素类及磺胺类抗性基因分布的影响

[目的]探讨长期施用猪粪沼液对土壤环境中抗生素抗性基因(Antibiotic resistance genes,ARGs)分布的影响及其季节变化.[方法]分别在春、夏、秋、冬4个季节采集养猪场周边长期用沼液作为肥料的土壤,同时采集当地未施用过沼液的土壤作为对照,采用荧光定量PCR方法,对土壤中四环素类和磺胺类ARGs进...     

半定量RT-PCR方法研究microRNA393在旱处理后的孕穗期水稻叶片和穗部的表达情况

microRNAs是新近发现的一类具有重要功能的小分子RNA.研究表明,一些miRNAs与植物抗逆反应相关.本文使用半定量RT-PCR的方法,研究了miR393在旱处理后的孕穗期水稻叶片和穗部的表达情况.结果发现,miR393在胁迫后的叶片和穗部表达上调.同时也发现,miR393在胁迫前后穗部的表达略高于其在叶片中的表达.实验结果也表明,半定量RT-PCR适用于分析miRNAs的表达.     

野外土壤风蚀定量观测方法的研究

[目的]介绍野外土壤风蚀定量观测的新方法。[方法]在综合分析土壤风蚀量评估主要方法和手段优缺点的基础上,提出一种野外土壤风蚀量定量观测的新方法———风蚀圈法。[结果]风蚀圈的最大优点是简单实用、容易携带,可长期放置在野外,实现土壤风蚀的定量观测;其镶嵌在土壤中,表面基本与地面持平,可防止局部微地形对风蚀过程的影响;底部尼龙布透水通气性好,可保持风蚀圈内土样与周围土壤状态一致,观测数据接近实际;最大弊端是放、取土时部分土样容易跑出圈外,影响观测值的准确性。[结论]风蚀圈法是野外观测比较实用的方法,可用于测定单位面积的土壤风蚀量,实现风沙区风蚀季节的定量连续监测。     

香蕉水通道蛋白基因在成熟果实中的表达分析与亚细胞定位研究

[目的]更好了解香蕉果实成熟与水分代谢的关系。[方法]用RT-PCR的方法探讨水通道蛋白基因MaPIP1;1在香蕉果实成熟过程中的表达情况,并利用绿色荧光融合蛋白研究MaPIP1;1的亚细胞定位。[结果]香蕉水通道蛋白基因MaPIP1;1在正常和诱导成熟的果实中,表达持续下降。在高锰酸钾处理的果实中,MaPIP1;1在果实呼吸跃变发生之前表达平稳。亚细胞定位结果表明,MaPIP1;1主要定位于细胞质膜上。[结论]推测MaPIP1;1基因在香蕉果实中可能起了运输水分或其他小分子物质的作用。     

应用RNA干扰技术对甜菜夜蛾信息素结合蛋白功能的研究

采用RNA干扰技术,通过腹腔注射法将甜菜夜蛾信息素结合蛋白1(SexigPBP1)双链RNA导入雄蛾体内,48 h后定量PCR检测表明,SexigPBP1的mRNA表达量被敲减90%以上;同时,触角电位(EAG)测定结果表明,注射处理48 h后雄蛾对雌蛾性信息素主组分Z9,E12-14∶Ac的EAG反应降低了约60%,证明SexigPBP1在雄蛾对该组分的感受中起重要作用.     

杂交水稻高产栽培精确施氮技术参数的确定及验证研究

[目的]确定并验证杂交水稻高产栽培精确施氮技术的3个重要参数。[方法]以黔优18、茂优601等品种为试材,在贵州省小河、乌当和兴义进行试验示范,求取了杂交籼稻精确定氮高产栽培中的3个重要参数,并对其进行了论证示范。[结果]3个参数分别为：①100kg稻谷吸氮量：1.85kg（迟熟籼稻）、1.82kg（早熟籼稻）;②土壤空白供氮量在95.92～133.41kg/hm2;③氮肥当季利用率：当基蘖肥与穗肥比例为5∶5时,得出获取高产的氮肥当季利用率为45.18%（迟熟籼稻）、44.72%（早熟籼稻）。根据获得的3个参数分别在当地进行示范,均获1.2t/hm2以上产量。[结论]为指导贵州省不同稻区的科学施肥提供了理论依据。