高海拔酸菜中乳酸菌筛选与发酵特性研究

以青海高海拔自然发酵酸菜为研究对象进行优良乳酸菌的筛选及发酵特性研究,进行了形态鉴定,产酸性、耐盐性和耐亚硝酸盐的测定及还原牦牛乳发酵实验。结果分离筛选出了6株传代性能良好的乳酸菌B2-1、B2-2、B2-4、J3-4、H4-1、H4-5,均为单球菌;经发酵特性研究发现,在耐盐性生长实验测定中菌株B2-1在Na Cl浓度为5%时,吸光度仍达到8.31,所有菌株吸光度值随着Na Cl浓度的升高而下降;在耐亚硝酸盐性生长实验测定中,6株菌株均具有良好的耐受力,其中菌株J3-4耐受性最好,在NaNO_2浓度为150mg/L下,吸光度达到21.27;菌株B2-1的液体培养基p H值最低为3.59;菌株H4-1、H4-5发酵还原牦牛乳后凝乳状态最好,感观评价分数菌株H4-1最高为32分、菌株B2-1次之为30分,发酵牦牛乳的p H值中菌株B2-1最低为4.27、菌株H4-1的p H值为4.51,发酵牦牛乳持水力菌株H4-1最高达97%,菌株B2-1的持水力为90%。经综合评定菌株B2-1适用于牦牛乳奶酪发酵剂的开发,菌株H4-1适用于牦牛乳酸奶发酵剂的开发,菌株J3-4适用于发酵肉制品和酸菜发酵剂的开发。     

早稻直播品种筛选初探

通过早稻品种直播的对比试验,筛选出适合南昌市生态气候的直播早稻品种,并提出了一些具体的田间管理措施和高产栽培技术。     

红阳猕猴桃褐斑病病原菌鉴定与室内药剂筛选

为了明确红阳猕猴桃褐斑病主要病原菌及适宜的防治药剂,采集贵州省六盘水市水城区红阳猕猴桃褐斑病的标样,通过组织分离、纯化,致病性检测,形态学观察,分子检测及系统发育分析确定病原菌种类,并采用菌丝生长速率法测定6种药剂对该病原菌生长的抑菌效果。结果显示：分离纯化得到的病原菌的形态特征与多主棒孢菌Corynespora cassiicola形态特征相似,将分离菌株rDNA-ITS序列与GenBank中相关菌株的ITS序列进行同源性比对,发现该菌株与黄瓜多主棒孢霉菌的相似性达到96%以上。室内药剂筛选结果表明：50%多菌灵可湿性粉剂对病原菌的抑制效果最好,最低浓度可抑制菌丝生长;其次为40%戊唑醇悬浮剂、80%乙蒜素乳油、30%吡唑嘧菌酯乳油和80%代森锰锌可湿性粉剂,抑菌效果较好,EC₅₀值分别为0.000 2、0.074 3、0.087 1、和0.502 5 mg/L。红阳猕猴桃褐斑病主要由多主棒孢菌Corynespora cassiicola侵染引起,以上5种药剂均可作为防治红阳猕猴桃褐斑病的有效药剂。     

海南食用槟榔资源筛选研究

对海南10份槟榔干果进行品质性状测定及评估检验评分,旨在筛选出不同功能用途的槟榔果类型。结果表明,10份槟榔干果纵径、横径及单果质量变异范围较小,而化学成分变异范围较大,特别是多酚类物质含量,具有丰富的遗传多样性。采用评估检验法评价不同干果类型,表明椭圆形果综合评分较高,商品指标符合加工优质品标准,其次为长椭圆形果、卵形果等,近圆形果和枣形果综合评分较低,不适用于加工干果。但枣形果具有多酚类物质含量高、槟榔碱含量低的特点,是开发保健品和鲜果嚼食的理想材料。     

禹城大豆玉米带状复合种植模式下大豆品种筛选试验

大豆是我国主要油料作物,近年来大豆进口依存度在 85% 以上,为有效增加国内大豆供给,2022 年农业农村部在全国示范推广大豆玉米带状复合种植技术,德州市示范推广大豆玉米带状复合种植面积约 2.27 万 hm2,其中禹城种植面积为0.90 万 hm2。2022 年本研究采用 4∶2 式大豆玉米带状复合种植模式,玉米选用紧凑型品种郑单 958,大豆包括齐黄 34、嘉豆 6号、冀豆 23 等黄淮地区 32 个优良品种（系）进行试验示范,综合考量 32 个品种（系）的农艺性状、生育期、产量等因素,筛选出菏豆 41、齐黄 34、郓豆 1 号、华豆 19、临豆 10 号、菏育 10 号、沧豆 16、冀豆 23、嘉豆 16、丰豆 6 号共 10 个品种,为禹城带状复合种植推广提供品种支撑,是提升区域性大豆产能的关键之一。     

新城疫病毒融合蛋白单克隆抗体的研制

以纯化的新城疫病毒(NDV)R8E9免疫BALB／C小鼠，最后1次免疫后3d取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2／0)融合。以纯化的NDV和表达NDV融合蛋白(F)的重组鸡痘病毒(rFPV)分别建立了间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫荧光(IIF)方法，并用于单抗筛选的第一、二检测系统。经反复筛选并3次亚克隆后共获得7株针对F蛋白的单克隆抗体，它们的生物学特性和在不同反应系统中的敏感性各有不同。用这7株单抗对国内外不同时期分离的：NDV毒株进行排谱发现，单抗几乎可以与所有毒株反应，表明所得的单抗都是针对NDVF蛋白的抗原保守区。     

牛病毒性腹泻-黏膜病病毒噬菌体单链抗体库的构建和筛选

为筛选牛病毒性腹泻-黏膜病病毒（Bovine viral diarrhea virus,BVDV）gP48蛋白的单链抗体,本研究利用噬菌体展示技术构建了gP48蛋白单链抗体克隆文库,通过微孔筛选法对抗体库进行3轮富集淘筛,利用ELISA技术测定单链抗体的亲和力,对亲和力较高的克隆进行基因测序分析和结合活性测定,旨在获得gP48蛋白的单链抗体。结果表明：1）成功构建了库容量为4.3×107的噬菌体单链抗体库,其重组率为83.3%,经三轮筛选对噬菌体抗体库进行富集,富集倍数为1.43×104;2）优化了间接ELISA方法,筛选到3株与BVDV gP48蛋白具有高亲和力的单链抗体以及其基因序列,通过IgBLAST分析显示,3株单链抗体均为鼠源IgG。综上,从gP48蛋白的单链抗体库中筛选获得3个具有高亲和力的单链抗体,可用于后续BVDV检测方法的建立。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒相关猪microRNA的初步筛选

本试验旨在初步筛选出与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染相关的猪microRNA(miRNA)。采用生物信息学方法预测可能与PRRSV 3′非编码区(3′utr)产生相互作用的猪miRNA,构建PRRSV 3′utr的双荧光素酶报告基因载体psi-CHECK-utr,同时合成预测到的miRNA(ssc-miR-323、ssc-miR-105-1)及其相应的抑制物,共转染猪脐静脉血管内皮细胞系(SUVEC),检测双荧光素酶活性。结果发现,ssc-miR-323与psiCHECK-utr共转染后,荧光比率略有升高,ssc-miR-105-1与psiCHECK-utr共转染后,荧光比率降低。初步判定ssc-miR-323对PRRSV 3′utr没有抑制作用,而ssc-miR-105-1对PRRSV3′utr有一定的抑制作用。     

真鲷胃肠道产蛋白酶菌株的分离与筛选

利用酪蛋白培养基和脱脂乳培养基,从健康真鲷肠道中筛选产蛋白酶菌株,并利用福林-酚试剂法测定其酶活力.通过形态学和生理生化手段对产酶能力较强的菌株进行初步鉴定.从健康真鲷肠道中共筛选出20株产蛋白酶菌株,占真鲷肠道茵群的17.4%;其中H1-16、D1-7、X1-5和X2-3产酶活力特别强,所测酶活力分别为45.45、54.55、63.65和59.1 U/mL.为今后制成益生茵制品应用于水产养殖,提高养殖动物的存活率和生长速度提供了理论基础.     

血清1、2、4、5型鸭疫里默氏杆菌的RAPD

以37℃摇震培养舜口烛缸厌氧培养，从12种培养基中选择出鸭疫里默氏杆茼的最优培养基和培养条件。以血清1、2、4、5型的鸭疫里默氏杆菌代表株A1、A2、A3、A4为研究对象，培养增殖后分别提取基因组DNA，利用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术，对其基因组进行了DNA分析。从20条随机引物中筛选出8条随机引物，这8条引物对4种血清型的鸭疫里默氏杆菌的扩增图谱有较好的多态性，可作为分子标记鉴别4种不同血清型的鸭疫里默氏杆菌，同时还筛选出能在4个血清型的鸭疫里默氏杆菌代表株均出现相同的特征条带，而对照茼大肠杆菌、沙门氏茼无该条带的随机引物，从而为鸭疫里默氏杆菌病的分子诊断打下了一定基础。