不同寄主植物对甜菜夜蛾解毒酶活性的影响

通过离体酶活性测定,研究取食苜蓿、苋菜、生菜、白菜、玉米5种寄主植物对甜菜夜蛾磷酸酯酶、谷胱甘肽-S-转移酶和乙酰胆碱酯酶活性的影响.结果表明甜菜夜蛾取食寄主植物后,体内磷酸酯酶、谷胱甘肽-S-转移酶和乙酰胆碱酯酶活性均发生变化.除取食苋菜的甜菜夜蛾碱性磷酸酯酶活性与取食苜蓿、白菜的之间差异不显著外,其他各处理之间差异均显著.其中玉米对这3种酶的诱导能力最低.     

油菜种子形成中含油量与其合成相关酶活性的变化及其相关性

以具有相同遗传背景的高、低含油量基因型油菜品系04-1989-9和04-1989-4为材料, 研究种子形成过程中含油量与脂肪合成相关酶活性的动态变化及其相关性。结果表明, 两品系的种子含油量、6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)活性、磷脂酸磷酸酯酶(PPase)活性均在开花后逐渐增加, 花后24~31 d达最高峰,且品系间差异均达显著或极显著水平; G6PDH、PPase活性和含油量呈极显著正相关, 推测二者是影响含油量的关键因子。     

猪HNF-4α基因多态性与肌纤维组织学特性及生长性状的相关性分析

肝细胞核因子-4α（HNF-4α）是肝细胞核因子（hepatocyte nuclearfactor,HNF）家族成员之一,可在肝脏内高表达,该家族基因对肝细胞的分化调控起关键作用,同时参与肝脏糖、脂代谢相关基因特异性表达的调控。HNF-4α基因参与调节生命代谢活动的诸多方面并且对动物生长发育过程起着重要作用。本研究采用PCR-SSCP的方法分析HNF-4α基因单核苷酸多态性与生长性状的相关性。结果发现SH1多态位点的BB基因型对法系长白猪个体的出生体长的效应值最大。SH2多态位点的AB基因型对法系长白猪个体的初生重的效应值最大。同时,该位点与大民猪肌纤维组织学特性也存在显著相关。AB型个体的肌纤维直径和肌纤维横截面积显著低于AA和BB型 (P<0.05)。     

大豆磷酸烯醇式丙酮酸磷酸酯酶(PEPP)研究:I.对非生物胁迫的反应

对缺磷、铝毒、盐、干旱、Fe、Mn、Cu、Zn胁迫下大豆根系和叶片磷酸烯醇式丙酮酸磷酸酯酶(PEPP)活性进行了测定,结果表明:(1)长期缺磷和铝毒胁迫可显著提高大豆根系的PEPP活性,并表现出加成效应;(2)长期铝毒、缺磷和铝毒耦合胁迫也显著提高大豆敏感品种BL2叶片的PEPP活性;(3)盐胁迫、干旱以及长期Fe、Mn、Cu、Zn过量都显著提高大豆根系的PEPP活性,Fe、Cu、Zn缺乏则对根系和叶片的PEPP活性影响不大,长期缺Mn显著降低大豆根系及叶片的PEPP活性。     

人胎盘碱性磷酸酯酶基因在鸡蛋蛋清中的表达

利用PCR方法从pSEAP2-control质粒中扩增获得人胎盘碱性磷酸酯酶基因plap的cDNA,将其克隆到鸡输卵管特异性表达载体(pAB-Sig-SV40)的卵清蛋白基因调控区下游。通过脂质体精子载体法人工授精母鸡,收集鸡蛋、孵化。雏鸡出壳后,抽提鸡冠基因组DNA,采用PCR方法检测两组孵化后代中的嵌合体鸡,第1组母鸡(95羽)中plap的PCR阳性检出率为75%,第2组母鸡(128羽)的阳性检出性率为81%。经Western blotting检测,仅1只嵌合体母鸡所产鸡蛋蛋清中检测到plap产物的存在。     

草鱼酸性磷酸酯酶的性质及金属离子对其活性的影响

以草鱼肝脏为材料提取一种酸性磷酸酯酶(ACPase,EC.3.1.3.2),进一步用(NH4)2SO4沉淀分离,Sephadex G-200柱纯化,经聚丙烯酰胺凝胶电泳纯度鉴定呈现单一酶蛋白带,该酶紫外吸收峰为240nm和280nm,等电点为4.8,相对分子质量为100046.1。该酶水解对硝基苯磷酸二钠(pNPP)的最适pH值为4.4,最适温度为45℃,并有热激活现象,热激活温度为60℃。耐热实验表明,该酶在最适温度下耐热时间为33min,最适温度下20min时表现出最大活性。在60℃下耐热时间为25min,15min时表现最大活性。酶促反应初速度为0.0475μmol/min,最大反应速度为0.153μmol/min。米氏常数Km值为3.56×10-3mol/L。金属离子对酶活性影响的研究结果表明,K+对酶有激活作用,Li+、Na+对酶的活性没有明显影响;碱土金属离子Mg2+、Ca2+和Ba2+对酶有激活作用,其激活程度由大到小依次为:Ba2+、Mg2+、Ca2+;Mn2+对酶有激活作用,Zn2+、Cu2+、Co2+则有抑制作用;重金属离子Hg2+、Pb2+、Ag+和Cd2+对酶有抑制作用,其中Hg2+的抑制效应最强。Mg2+和Cu2+的作用机制研究结果表明,Mg2+对酶具有混合型激活作用,Cu2+对酶具有竞争性抑制作用。     

宽皮柑桔隔年结果对3种酶活性及蛋白质含量的影响

以15年生宽皮柑桔"本地早"为材料,研究了大、小年结果对3种酶活性和蛋白质含量的影响。结果表明,大年结果树叶片和芽的α-淀粉酶活性总体上高于小年结果树,但磷酸酯酶活性、过氧化物酶活性和可溶性蛋白质含量总体上低于小年结果树。在所测定的3种酶活性和蛋白质含量中,均是芽比叶片高。叶片中α-淀粉酶活性与叶片中淀粉含量呈显著负相关,芽中的磷酸酯酶活性与叶片中的全磷含量大部分时间里呈显著正相关。     

黑曲霉固态发酵产酸性磷酸酯酶的工艺研究

为探讨黑曲霉固态发酵酸性磷酸酯酶(ACP)的产酶条件,首次采用固态培养的方法,在对黑曲霉3350产酸性磷酸酯酶的培养基组成和培养条件单因素研究的基础上,设计了Plackett-Burman试验选取了3个主要影响因素,并进行响应面分析.结果表明,黑曲霉3350产酸性磷酸酯酶的最适培养基和发酵条件为:麸皮8.0 g,蔗糖2.0 g,豆饼粉1.11 g,水13.9 ml,土温-801.0ml/kg,NH4NO320g/kg,KH2PO42.5g/kg,自然pH值;32℃固体静置培养120h,期间翻曲2～3次.在该条件下菌株最高产酶活性为154IU/g干曲,比优化前产酶提高88%,与液态发酵周期(9d)相比缩短了44%.     

过表达海藻糖合成酶编码基因TvTPS/TPP的绿色木霉工程菌的构建及其抗逆特性分析

绿色木霉广泛用于促生抗逆、生物防治、纤维素酶生产和生物质利用等方面。木霉体内代谢途径丰富,代谢产物繁多,很多代谢产物参与调控木霉对不利环境的适应能力。海藻糖是一种典型的应激代谢产物,在逆境条件下,可以保护生物免受伤害。海藻糖合成酶主要包括海藻糖磷酸合成酶和海藻糖磷酸磷酸酯酶。本试验从绿色木霉Tv-1511中鉴定出一个海藻糖合成双功能酶编码基因TvTPS/TPP,构建了绿色木霉TvTPS/TPP基因过表达菌株Tv-1511-TPS/TPP-OE,并对其在绿色木霉Tv-1511抗逆性中的功能进行了分析。结果表明,与野生型相比,TvTPS/TPP过表达菌株具有更高的海藻糖含量,过表达TvTPS/TPP基因显著提高了绿色木霉对盐、高温和干旱的耐受性。因此,TvTPS/TPP基因在绿色木霉生长抗逆方面可能起着重要作用。     

氟化钠对大豆酸性磷酸酯酶的抑制动力学研究

以对硝基苯磷酸二钠为底物，研究了大豆体外酸性磷酸酯酶的酶促反应动力学和氟化钠对该酶的抑制动力学特性，实验结果表明，大豆酸性磷酸酯酶的酶促反应初速度时间范围为０～２０ｍｉｎ，最适ｐＨ５．６，最适反应温度为３７℃，米氏常数（Ｋｍ）为２．７８×１０－４ｍｏｌ／Ｌ，最适反应速度（Ｖｍ）为１．１５×１０－８ｍｏｌ／ｍｉｎ．ＮａＦ对大豆体外酸性磷酸酯酶有明显抑制作用，属于非竞争性可逆抑制类型，其抑制常数（Ｋｉ）为１．５３×１０－３ｍｏｌ／Ｌ．此外，还探讨了ＮａＦ的抑制机理．