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将蔗糖非发酵基因相关蛋白激酶AKIN11克隆到植物表达载体pEGAD的35S启动子下游与GFP融合,基因枪法导入洋葱表皮细胞进行瞬时表达,发现集中在细胞核内表达.农杆菌介导花序浸泡法转化拟南芥,Basta筛选和RT-PCR鉴定得到两个遗传稳定的T3代转基因株系.突变体和野生型的表型没有明显差异,但突变体叶片中淀粉含量较野生型增加.RT-PCR分析淀粉合成途径关键酶的mRNA水平,发现突变体中腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶表达量增加,而α-淀粉酶却没有变化.表明AKIN11基因可能在拟南芥淀粉积累途径中起着重要的调节作用. 相似文献
42.
[目的]去除猕猴桃皮和渣中的淀粉和蛋白质,提取并制备膳食食用果胶。[方法]通过单因素和正交试验设计,分别确定0.4%淀粉酶和0.4%胰蛋白酶提取猕猴桃皮和渣中果胶的适宜工艺条件。[结果]0.4%淀粉酶可有效去除猕猴桃皮和渣中的淀粉,其适宜工艺条件为:料液比1∶10.0,50℃下酶解60 min;0.4%胰蛋白酶可有效去除猕猴桃皮和渣中的蛋白质,其适宜工艺条件为:料液比1∶10.0,35℃下酶解60 min。在最佳工艺条件下,经离心、浓缩得到果胶,其中猕猴桃皮和渣中的果胶得率分别为3.10%和1.39%。[结论]通过改良酶法,建立了猕猴桃皮和渣中果胶提取的适宜工艺。 相似文献
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地衣芽孢杆菌WB-11菌株耐高温α-淀粉酶的酶学特性 总被引:6,自引:0,他引:6
从地衣芽孢杆菌 (Bacilluslicheniformis )中分离到一α 淀粉酶组分 ,经PAGE及SDS PAGE检测为电泳均一的纯酶蛋白。该酶最适反应温度为 95℃ ,5 0和 70℃条件下酶活性稳定 ,90℃保温 30min残余酶活力为 2 8 9%。该酶最适作用pH为 6 0~ 6 5 ,在pH 5 0~ 8 0内稳定。酶的相对分子质量为 6 5 90 0 ,等电点 6 94 ,对可溶性淀粉的Km 值为 0 4 1mg·mL-1 。Ca2 + 、Mn2 + 、Cu2 + 、Co2 + 及Ba2 + 对酶具有激活作用 ,其中Ca2 + 激活作用最显著 ,且以 4~ 8mmol·L-1 浓度为最适。Ca2 + 还能显著提高酶的热稳定性 ,4mmol·L-1 Ca2 + ,90℃保温 30min ,酶的残余活力提高至 83%。 相似文献
45.
枯草杆菌的淀粉酶基因在大肠杆菌中的表达 总被引:2,自引:1,他引:2
根据枯草杆菌(Bacillus subtilis)基因文库中的淀粉酶基因的碱基序列,设计引物。以枯草杆菌菌体DNA为模板,利用PCR扩增出分子量大约为2.3 kb的淀粉酶基因片段。借助于核酸内切酶和连接酶把该基因植入到pHMSXD1质粒中,构建pHMSXD2质粒载体。通过高压电击处理把载体植入到大肠杆菌(JM10)中并成功表达。该株大肠杆菌在酶基因表达后,其淀粉酶活力达到1.037 6 U/mL(LB培养液)和1.361 0 U/mL(矿物元素培养液),分别比原始的枯草杆菌的淀粉酶活力提高了46倍和286倍。 相似文献
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