猫冠状病毒S蛋白原核表达及鉴定

猫传染性腹膜炎是由猫冠状病毒(Feline coronavirus,FCoV)引起的慢性致死性疾病,以腹膜炎、大量腹水积聚为主要特征,不同年龄的猫均可感染,但老龄猫和2岁以内的猫发病率较高,纯种猫发病率高于一般品种的家猫,传染率非常高。本研究将猫冠状病毒S基因进行碱基序列优化并合成,亚克隆至PET30a,得到原核表达载体PET30a-NTU-2-S-RBD,进行大量诱导表达并纯化,最终得到的蛋白纯度可达90%,为后续疫苗的制备及诊断方法的建立奠定基础。     

重组杆状病毒表达鸭圆环病毒Cap蛋白及活性检测

为了获得具有活性的鸭圆环病毒Cap蛋白,笔者通过PCR方法获得鸭圆环病毒I型完整Cap基因片段,将其克隆到昆虫杆状病毒基因组中,获得重组杆状病毒qBac-P-Cap,其病毒效价TCID_(50)可以达到9.25。重组杆状病毒可在悬浮Sf9细胞中表达具有活性的鸭圆环病毒Cap蛋白。研究表明蛋白表达最佳收获时间为120 h,纯化后蛋白表达量可以达到200μg/mL。这为进一步研究Cap蛋白功能和大规模制备鸭圆环疫苗奠定了基础。     

数学史对中职数学教学的影响

随着新课程改革的深入发展，中职学校已全面进入教学改革阶段，以适应新课改的要求。数学作为中职教育中基础文化课之一，在中职教学中占据着重要的地位，将数学史融入到中职数学教学中，其影响作用不可忽视。基于此，本文首先阐述了当前中职院校学生所具备的特点，然后分析了数学史对中职数学教学的影响作用，以供参考。     

Expression,Purification and Activity Evaluation of Mb1230 Gene of Mycobacterium bovis

To explore the value of Mb1230 protein of Mycobacterium bovis in the diagnosis of bovine tuberculosis,we obtained the Mb1230 gene by PCR and constructed recombinant plasmid pET-22b-Mb1230.Recombinant Mb1230 protein was obtained by IPTG induction and purified by affinity chromatography.The activity of the recombinant protein was evaluated by TST test,IGRA test and indirect ELISA.The size of the recombinant protein matched with the theoretical value proved by SDS-PAGE;Western blotting result showed that the recombinant protein could react with mouse anti-His antibody,and had specific band;The results of TST test,IGRA test and indirect ELISA test also showed the recombinant protein had antigenic activity.The results indicated the recombinant protein Mb1230 had good B cell and T cell activity,so,it had the potential application in the diagnosis of bovine tuberculosis.     

小学数学教学存在的问题及改进措施

虽然新课程标准的实施使小学数学教学效果有了明显提高,但在教学过程中仍存在诸多问题,需要广大教师在教学中加以改进,以提高教学质量。本文分析了小学数学教学中存在的问题,并结合教学实际提出了改进措施,以使小学数学教学工作在探索中不断进步。     

浅析如何提高高中数学课堂练习设计的有效性

高中数学教学中，进行必要的课堂练习很重要，有利于学生对数学理论知识的更好理解和掌握，也有利于教师了解学生对这方面知识的掌握程度。进行课堂练习环节虽然很有必要，但是教师一定要提高课堂练习设计的有效性，这样才能使课堂练习发挥出最大的作用。本文提出了三点提高课堂练习有效性的建议，即遵循课堂练习设计的原则、把握课堂练习设计的重点、体现练习方法。     

猪白细胞介素-2重组蛋白的原核表达及其生物学活性分析

用已构建好的重组表达载体pET30-IL2转化BL-21E.coli,挑取单克隆,利用诱导剂IPTG诱导表达;通过改变诱导剂的浓度、诱导的时间来摸索最佳诱导条件,在最佳诱导条件下大量表达,并利用镍层析柱纯化重组蛋白,用MTS法测定其生物学活性。结果表明,表达产物经SDS-PAGE分析,表达出25ku的融合蛋白,表达产物主要以包涵体的形式存在,最佳的诱导剂浓度为0.1mM,最佳的诱导时间为4h;对表达产物的包涵体处理后,用镍琼脂糖凝胶FF纯化,所得蛋白的纯度约在90%以上。通过透析除去部分尿素,复性后在体外利用MTS法检测其生物学特性,结果表明其仍具有较好的生物学活性,这为进一步大量制备和研究猪IL-2重组蛋白奠定了基础。     

高中数学与高职数学教学衔接的思考

从当前高中数学与高职数学教学衔接的现状出发,分别从教学目标、教学内容、教学方法和手段以及学习方法等四个方面阐述怎样解决好高中数学与高职数学教学衔接的问题。     

家蚕生物反应器研究进展(Ⅰ) 国外重要学术期刊发表论文简介

<正>1重组蛋白表达系统及其优化1.1 Ai-chun Zhao,Tian-Fu Zhao,Yuan-Song Zhang,Qing-You Xia,Cheng Lu,Ze-Yang Zhou,Zhong-Huai Xiang,M.Nakagaki.New and highly efficient expression systems for expressing selectively foreign protein in the silk glandsof transgenic silkworm.Transgenic Research,2010,19(1):29-44