金丝桃素在大鼠体内的药代动力学研究

为了研究金丝桃素在大鼠体内的药代动力学特征,试验采用HPLC法测定大鼠血浆中的金丝桃素,色谱柱为SHIMADZU Shim-pack VP-ODS C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇∶0.006 mol/L磷酸氢二钠(90∶10,用磷酸调节p H值至6.5),检测波长为590 nm,流速为1.0 mL/min,采用3p97药动学软件对药时数据进行拟合。结果表明:大鼠尾静脉注射金丝桃素,其药动学特征符合二室模型,血药浓度-时间曲线平缓。说明金丝桃素在大鼠体内的消除较缓慢。     

藤黄果提取物对高脂日粮诱导的大鼠部分组织中氨基酸谱的影响

为探讨藤黄果提取(-)-羟基柠檬酸(HCA)对高脂日粮诱导的大鼠部分组织器官中氨基酸谱的影响,选用100只雄性SD大鼠随机分成5组:普通日粮对照组,高脂日粮对照组,高脂日粮添加藤黄果提取物低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组20只。高脂日粮组分别于日粮中添加相当于(-)-HCA的剂量为0,1 000,2 000和3 000 mg/kg的藤黄果提取物,饲养8周后采集静脉血,分离血清,取肝脏、腿肌等样品。试验结果表明:与普通日粮对照组比较,高脂日粮对照组中,大鼠体增重和BMI均极显著升高(P0.01)。与高脂日粮对照组比较,3个剂量的藤黄果提取物处理均可极显著降低大鼠的体增重(P0.01);低剂量组中肝糖原含量显著升高(P0.05),高剂量组肌糖原含量显著升高(P0.05),但对血糖浓度无显著性影响(P0.05);血清中T3和T4含量在高剂量处理组均显著升高(P0.05),血清瘦素含量在低剂量组显著升高(P0.05),而血清中胰岛素的含量则无显著变化(P0.05)。氨基酸组成分析结果表明:在血清中,藤黄果提取物处可以显著升高血清中部分生糖氨基酸的含量,支链氨基酸中异亮氨酸(Ile)及芳香族氨基酸色氨酸(Trp)的含量(P0.05);在肝脏中,藤黄果提取物可以显著降低肝脏组织中大部分生糖氨基酸和芳香族氨基酸的含量(P0.05),而对肝脏中支链氨基酸的影响不显著(P0.05);在腿肌中,(-)-HCA处理可显著降低生糖氨基酸的含量(P0.05),可以极显著降低支链氨基酸的含量(P0.01),同时(-)-HCA可以极显著降低芳香族氨基酸的含量(P0.01)。以上结果表明,藤黄果提取物通过改变大鼠血清中激素的含量、降低肝脏和肌肉中生糖氨基酸的含量,提高机体糖代谢的水平,达到抑制大鼠体重增加的效果。     

银杏叶复方干预大鼠脾虚证的代谢组学初步研究

试验基于大鼠脾虚证模型,经与传统固本方剂-四君子汤比较,初步揭示银杏叶复方干预大鼠脾虚证营养物质代谢方面的影响。选择24只雄性SD大鼠,随机分为对照组、脾虚模型组、四君子汤组和银杏叶复方组,每组6只。对照组给予生理盐水灌服(10 mL/kg)和皮下注射(0.6 mL/kg),脾虚模型组给予生理盐水灌胃(10 mL/kg)和皮下注射利血平(0.6 mL/kg),四君子汤组和银杏叶复方组分别灌服相应制剂(10 mL/kg)和皮下注射利血平(0.6 mL/kg),连续12 d。结果表明:PCA得分图显示,对照组和脾虚模型组的血浆样本散点完全分开,银杏叶复方组血浆样本散点较四君子汤组向对照组更紧凑聚集;经过筛选,银杏叶复方干预大鼠脾虚证的血浆相关差异代谢物主要为多巴胺、L-脯氨酸等29种物质[变量投影重要度(VIP)>1,P<0.05],与脾虚模型组相比,在银杏叶复方组中相关差异代谢物含量下调主要有胞嘧啶、多巴胺等,上调的主要有甜菜碱、棕榈酰溶血卵磷脂等;银杏叶复方干预大鼠脾虚证的代谢通路主要为酪氨酸代谢、精氨酸和脯氨酸代谢、缬氨酸和亮氨酸及异亮氨酸生物合成、花生四烯酸代谢[拓扑分析影响因子(Impact)>0.1]。综上所述,银杏叶复方主要通过氨基酸代谢和脂质代谢有效干预大鼠脾虚证病理状态。     

后海、后三里、大肠俞对大鼠便秘及胃肠运动神经递质的影响

后海（GV-1）、后三里（ST-36）、大肠俞（BL-25）是治疗动物便秘的常用穴位,本文旨在明确3个穴位对大鼠便秘的缓解作用及其对胃肠运动相关神经递质的调节作用,比较3个穴位作用途径的异同,探索便秘的优势穴位。选取SPF健康大鼠60只,随机分为6组。除对照A组外,其他5组大鼠每只每天灌服3 mg·（kg·d）^-1洛哌丁胺,建立便秘模型。5 d后,在便秘模型基础上,西药治疗C组灌服莫沙必利1.38 mg·（kg·d）^-1混悬液,D、E、F组分别针刺GV-1、ST-36、BL-25各30 min,连续6 d。检测血清5-羟色胺（5-HT）、生长抑素（SS）、血管活性肠肽（VIP）、P物质（SP）,结肠组织中5-羟色胺3受体（5-HT₃R）mRNA、5-羟色胺4受体（5-HT₄R）mRNA相对表达量及结肠组织结构。结果显示：造模5 d后,模型B组大鼠出现典型便秘症状,血清中5-HT、SS含量显著增加,VIP、SP显著下降,结肠组织5-HT₃R和5-HT₄R mRNA显著降低。西药治疗组和3个穴位组大鼠的便秘症状均显著缓解,首粒粪便时间缩短,粪便含水量增加,粪便长度增加。另外,针刺GV-1使血清中SS含量极显著降低36.34%（P<0.01）,5-HT含量显著下降。针刺双侧ST-36下调血清中5-HT含量23.93%,显著增加结肠组织5-HT₃R、5-HT₄R mRNA相对表达量（P<0.01）。针刺双侧BL-25,血清中VIP、SP含量分别提高27.48%、22.75%,显著降低5-HT含量。另外针刺3个穴位均可增加结肠杯状细胞表达。GV-1、ST-36、BL-25缓解便秘的途径有一定差异,但均能缓解大鼠便秘,改善胃肠道运动,调节胃肠道神经递质的含量,其中GV-1对便秘的改善作用最为显著。     

骆驼乳清蛋白对热应激所致大鼠肝氧化损伤的保护作用

本试验旨在研究骆驼乳清蛋白（CWP）对热应激（HS）大鼠肝损伤、氧化应激及肝功能的保护作用。选取6周龄SD大鼠36只,适应性饲养2周后随机分为6组：正常对照组饲喂基础日粮;CWP对照组添加400 mg·kg^-1的CWP;HS组除饲喂基础日粮外,每天进行2 h HS处理,连续8 d;3个CWP干预组分别于每次HS前灌服100、200和400 mg·kg^-1的CWP。试验结束后,取大鼠肝组织,HE染色观察肝组织病理学变化,同时检测肝功能生物标志物、氧化应激标志物水平及抗氧化酶活性。结果表明：CWP降低了HS大鼠血清谷草转氨酶（AST）和谷丙转氨酶（ALT）活性,400 mg·kg^-1的CWP干预效果最好（P<0.01）;400 mg·kg^-1CWP干预组有效降低了HS诱导的大鼠肝组织病理学改变; CWP降低了大鼠肝活性氧（ROS）及丙二醛（MDA）水平,增加了超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及谷胱甘肽（GSH）水平,400 mg·kg^-1的CWP干预效果最好（P<0.01）。结果提示,CWP干预能够以剂量依赖性方式降低大鼠肝氧化应激,增加抗氧化系统防御能力,从而缓解HS所致大鼠肝损伤。     

乳酸菌对高脂血症大鼠血脂、肝酶、肾功及血清激素影响的探究

近年来,乳酸菌正在被广泛开发和利用,对于动物机体肠道菌群的稳定、食品风味的改变以及一些保健药品的研发具有重要作用.本试验建立在大鼠高脂血症模型的基础上,通过乳酸菌的调节,了解对血脂、肝酶、肾功及血清激素指标的影响,为乳酸菌保健功能及其作用机制的研究提供参考.     

白肉灵芝水提物对脑缺血大鼠海马神经元的保护作用

试验旨在探讨白肉灵芝水提物（Ganoderma leucocontextum aqueous extracts,GLAE）对脑缺血后海马神经元的保护作用及机制。将50只健康大鼠分为对照组、模型组、GLAE低（0.05 mg/（g·BW））、中（0.1 mg/（g·BW））、高（0.2 mg/（g·BW））剂量组。利用双侧颈总动脉夹闭法建立大鼠脑缺血模型,GLAE组灌胃不同剂量的GLAE干预,对照组和模型组灌胃同体积的生理盐水,连续2周。用跳台试验方法检测记忆获得、记忆巩固和记忆再现障碍大鼠的学习记忆能力,HE染色观察大鼠海马组织的病理形态的变化,比色法检测海马组织一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,NOS）活性和一氧化氮（nitric oxide,NO）含量,Western blotting和实时荧光定量PCR法分别检测海马组织生长相关蛋白-43（growth associated protein-43,GAP-43）和脑源性神经生长因子（brain derived neurotrophic factor,BDNF）的水平。结果显示,与对照组相比,模型组大鼠跳台试验的逃避潜伏期显著缩短、电击次数显著增加（P<0.05）;海马神经元细胞出现明显核固缩、排列松散紊乱等退行性改变,细胞数量显著减少（P<0.05）;海马组织NOS活性和NO含量均显著降低（P<0.05）;大鼠海马组织GAP-43蛋白表达量显著升高（P<0.05）;海马组织BDNF mRNA表达量显著下调（P<0.05）。与模型组相比,GLAE干预后,大鼠逃避潜伏期均显著延长、电击次数均显著减少（P<0.05）;GLAE高剂量组大鼠CA1区和齿状回锥体神经元细胞形态明显改善,神经元数量显著增加（P<0.05）;GLAE低剂量组对NOS活性影响不明显（P>0.05）,显著增加NO含量（P<0.05）,GLAE中、高剂量组NOS活性和NO含量均显著升高（P<0.05）;GLAE低、中、高剂量组海马组织GAP-43蛋白表达量均显著增加（P<0.05）;GLAE低、中、高剂量组海马组织BDNF mRNA表达量均显著增加（P<0.05）。以上结果表明,GLAE可通过提高NOS活性和NO水平、促进海马神经发生和功能恢复对脑缺血后海马神经元损伤有一定的保护作用,从而改善大鼠认知功能,0.2 mg/g GLAE效果最好。     

恩诺沙星与磺胺二甲嘧啶联合毒性探究

本研究旨在探究恩诺沙星与磺胺二甲嘧啶的联合毒性。选取SD大鼠为试验对象,将其分成6组,每组12只,分别为高剂量联合用药组（500 mg/kg体重）、中剂量联合用药组（250 mg/kg体重）、低剂量联合用药组（50 mg/kg体重）、恩诺沙星单药组（250 mg/kg体重）、磺胺二甲嘧啶单药组（250 mg/kg体重）及对照组（等量0.5%羧甲基纤维素钠溶液）,配制相应的药物进行灌胃,最后一次给药1 d后对大鼠进行称重、麻醉、心脏采血并剖检取肝脏组织,然后对大鼠增重率、血常规指标、血清生化指标及肝脏病理学变化几个方面进行分析,并利用SPSS 22.0软件评估2种药物的联合作用效果。结果显示,在雌性大鼠中,高、中剂量联合用药组使大鼠增重率显著下降（P<0.05）,雄性大鼠增重率无显著变化（P>0.05）;雄性大鼠给药组白细胞数量均显著增加（P<0.05）,高剂量联合用药组中性粒细胞和淋巴细胞占比分别表现为显著升高及下降（P<0.05）;高、中剂量联合用药组大鼠外周血中谷草转氨酶含量显著增加（P<0.05）,且高、中剂量联合用药组肝脏病理切片视野可见不同程度的炎性细胞浸润,并伴有不同程度的损伤。本研究结果表明,恩诺沙星和磺胺二甲嘧啶联用可使毒性增加,对大鼠的免疫系统状态有一定的影响,且能造成一定程度的肝脏损伤,剂量越高影响越大。本研究为恩诺沙星和磺胺二甲嘧啶联合用药机制的研究提供数据支持,并为二者的临床应用提供参考,提示新的食品安全评估应考虑药物联合暴露带来的影响。     

Acute and Sub-chronic Toxicity Test on Rats of a New Kind of Antidiarrheal Chinese Herbal Medicine Compound Preparation for Livestock

In order to understand the security of a new kind of antidiarrheal Chinese herbal medicine compound preparation for livestock,acute and sub-chronic toxicity test were conducted.Acute toxicity test used the largest drug dose method,20 Wistar rats were orally treated with the Chinese medicine compound preparation.In the sub-chronic toxicity test,80 rats were randomly divided into 4 groups with 20 rats in each group and orally given a dose of 3 000,1 500,750 and 0 mg/(kg·BW）of Chinese medicine compound preparation once a day for 30 days.The general clinical status was observed,rats weight were measured and the dose was adjusted every week during the test,after the test measured blood routine index,biochemistry index,and preceded the gross anatomy observation,weighing each major organs and calculated the viscera coefficient,and proceded main viscera histopathological observation between the high dose group and the control group.The acute toxicity results showed that every rat would be alive gavaged with the lethal dose（LD₅₀）of compound preparation larger 5 g/(kg·BW).The sub-chronic toxicity autopsy showed that except heart,lung,and testicles in individual rats appeared mild bleeding in the high dose group,the other dose group organs found no abnormal change.The haematological index showed except mononuclear cell rate（P<0.05),and hematocrit declined significantly（P<0.05）in the high dose group,all the indexes of the other groups were in the normal range,there was no significant difference from the control group.The test suggested the Chinese medicine compound preparation was no toxicity under the condition of this test according to acute toxicity classification standard of exogenous chemicals by WTO,there was no effect on the growth and development of rats in the sub-chronic toxicity test,and there was no chronic toxicity at least 1 500 mg/kg feeding conditions in short-term repeated application.     

小型猪复合麻醉剂对大鼠不同脑区LKB1基因mRNA转录和p-LKB1蛋白表达的影响

旨在研究小型猪复合麻醉剂(XFM)对大鼠不同脑区LKB1基因mRNA转录和p-LKB1蛋白表达的影响。将30只SD大鼠随机分成XFM组(M组)和生理盐水对照组(C组),M组又按照时间点的不同分为4个亚组。各组大鼠到达试验设计时间点后分别采取脑组织并分离各脑区,采用PCR和Western blot技术,分别检测各试验组中大鼠不同脑区LKB1基因mRNA的相对表达量和p-LKB1蛋白表达量。结果显示:在试验的麻醉早期阶段(即M1和M2),各脑区LKB1基因mRNA转录与对照组相比均未出现显著变化(P0.05);大脑皮层、海马及小脑p-LKB1蛋白表达与对照组比较并无显著变化(P0.05),而丘脑与脑干p-LKB1蛋白表达与对照组比较则明显升高,且丘脑差异显著(P0.05),脑干差异极显著(P0.01)。而在麻醉后期阶段(即M3和M4)各脑区LKB1基因mRNA转录表达明显上升,尤以M4突出,差异极显著(P0.01),其中丘脑和脑干变化最为明显;大脑皮层、海马及小脑p-LKB1蛋白表达与对照组比较均无明显变化(P0.05),但丘脑和脑干p-LKB1蛋白表达呈现显著升高(P0.05)。研究表明,XFM麻醉作用可能影响大鼠中枢神经系统中LKB1基因mRNA的转录和p-LKB1蛋白的表达。