大豆胞囊线虫VIGS载体的构建与鉴定

拟克隆大豆胞囊线虫肌钙蛋白(Hg-tnc)和酰胺样多肽(Hg-flp)基因的部分片段,构建胞囊线虫的病毒诱导基因沉默体系(VIGS),以期为大豆抗胞囊线虫抗性品种的培育及胞囊线虫基因功能验证的研究奠定理论基础。利用RT-PCR方法从大豆胞囊线虫中克隆出目的基因,电泳检测表明,克隆的Hg-tnc基因和Hg-flp基因部分片段分别约为1 000 bp和700 bp。将目的基因连接到烟草脆裂病毒载体pYY13上,转化大肠杆菌,利用PCR进行初步鉴定后进行序列测定。结果表明,大豆胞囊线虫Hg-tnc基因和Hg-flp基因已插入到pYY13载体上,VIGS载体构建成功。     

鹿茸多肽及其生长因子制备工艺的研究进展

鹿茸是我国传统中药材,鹿茸多肽及其生长因子具有重要的生理功能。本文综述了鹿茸多肽及其生长因子的提取、分离、纯化以及文库构建表达的应用前景。     

不同价态外源硒对芥菜生长及富硒量的影响

通过盆栽试验,研究土壤外源施入两种不同价态的硒(Se~(4+)、Se~(6+))对芥菜生长及富硒量的影响,为富硒蔬菜栽培提供参考依据。结果表明:在外源施Se~(4+)处理组中,低浓度促进芥菜的生长,高浓度则抑制生长,总体表现为随浓度增加促进芥菜生长,除根长外,株高、叶片数、根粗指标均高于对照处理(CK),单株质量极显著高于CK,其中Se~(4+) 浓度为10.0 mg/kg时对芥菜生长的促进作用最大;在外源施Se~(6+)处理组中,也表现出低浓度促进芥菜生长,高浓度则抑制生长,总体表现为随浓度增加抑制芥菜生长,当Se~(6+)浓度高于10.0 mg/kg时对植株有毒害作用,各农艺性状指标表现出抑制效应。芥菜总Se含量均随外源硒Se~(4+)、Se~(6+)浓度的增大而增加,其中施用Se~(4+)芥菜的总Se含量与CK差异不显著,而Se~(6+) 各处理除浓度1.0 mg/kg外,芥菜的总Se含量均极显著高于Se~(4+)各处理和CK。综合分析认为,外源Se~(4+)的添加比Se~(6+)更能促进芥菜生长,并且能使芥菜对硒的富集控制在较安全范围内。在富硒芥菜生产中,建议以Se~(4+)作为外源硒,且浓度以1.0 mg/kg为宜。     

对虾皮下及造血组织坏死杆状病毒的精细结构、核酸、多肽及血清学研究

对纯化的对虾皮下及造血组织坏死杆状病毒（ＨＨＮＢＶ）进行了超微结构、紫外吸收、核酸类型及多肽ＳＤＳ－ＰＡＧＥ的研究。同时用单克隆抗体对ＨＨＮＢＶ的两分离株和ＭＢＶ进行了血清学比较研究。用ＴＭＶ作为内标定物测得病毒粒子大小为１５０ｎｍ×４５０ｎｍ，其衣壳为两个帽状物端夹１３圈螺旋对称的园柱体结构。病毒在２６０ｎｍ处吸光系数为０．１１７ｍｇ／ｍＬ／ＯＤ２６０。病毒核酸为双链ＤＮＡ，分子量大于３５×１０６ｄ。病毒囊膜有１２种主要多肽。病毒衣壳有两种主要多肽。从寿光（ＨＨＮＢＶ—９３７）和青岛（ＨＨＮＢＶ—９３８）分离到的病毒种在ＳＤＳ—ＰＡＧＥ和抗ＨＨＮＢＶ—９３７单抗ＥＬＩＳＡ反应上没有显著差异。ＨＨＮＢＶ与斑节对虾杆状病毒（ＭＢＶ）在抗原决定簇上存在差别。     

农杆菌介导法将反义蜡质基因转入杂交稻亲本

通过农杆菌介导法将反义蜡质基因导入特青(OryzasativaL.subsp.indica)和广粳1号(OryzasativaL.subsp.japonica)这两个杂交稻亲本的愈伤组织中,获得了经PCR检测证明外源基因已整合进植物基因组中的再生植株,其中含潮霉素抗性基因的植株有6株,但仅有2株能够扩增出反义蜡质基因的特异条带,其原因可能是在转基因植株中出现了基因丢失或沉默现象。试验表明,粳型稻广粳1号的不同外植体(成熟胚、幼胚、幼穗、花药)的愈伤诱导率比特青的高,且随着继代时间的延长,不同基因型水稻诱导的愈伤之间的转化率存在着极显著性差异(P<0.01);经过转染的水稻愈伤在一定的筛选压力下会出现“逃逸”现象,抗性筛选后成活愈伤PCR检测发现广粳1号和特青的愈伤转化率只有44.4%和29.4%;不同凝固剂对愈伤诱导的质量有着明显的影响,植物凝胶作凝固剂比琼脂作凝固剂时的愈伤褐化率低。     

外源物质对辣椒种子发芽的影响研究

用一定浓度的赤霉素(GA3)、生长素(IAA)、过氧化氢(H2O2)、硝酸钾(KNO3)、萘乙酸(NAA)溶液处理可显著提高辣椒砧木品种肩车种子的发芽率,并对其发芽势、发芽指数有一定的促进作用。比较几种药剂对辣椒种子发芽的影响发现,GA3和IAA对辣椒种子的发芽影响效果最佳,最适宜浓度分别为200 mg/L和1.5 mg/L。     

转基因植物中外源基因沉默的机制与对策

转基因植物中外源基因沉默现象是利用基因工程技术进行作物品种改良的一大障碍。结合近年来国内外在转基因沉默研究方面所取得的成果,综述了转基因植物中外源基因沉默的分子机理及提高外源基因表达的方法和策略。     

外源甲状腺素及可的松对牙鲆早期发育阶段生长、发育和变态的影响

通过外源甲状腺素（T4）及可的松浸泡卵和仔鱼,结果表明：外源甲状腺素（T4）和可的松对牙好卵的孵化率和初孵仔鱼的体长没有显著影响;外源甲状腺素（T4）对0～10日龄的仔鱼生长有显著影响,和对照组（0）相比,0．05×10-6和0．1×10－6的影响显著,外源可的松对0～10日龄的生长不显著;外源甲状腺素（T4）和可的松对11～24日龄仔鱼的生长不显著,外源甲状腺素（T4）对11～24日龄的仔鱼变态有显著影响,和对照组（0）相比,0．05×10－6和0．1×10-6的影响显著;外源可的松对11～24日龄的变态影响不显著。     

高温胁迫下外源水杨酸对百合抗氧化系统的影响

为研究外源水杨酸（SA）对百合高温胁迫下抗氧化系统的影响,用新铁炮百合‘雷山一号’（Reizah 1）扦插苗为材料,叶面喷施SA0．5mmol／L后,进行47℃高温胁迫24h,观测植株形态及相关生理指标。结果显示：与对照相比,经外源SA预处理后植株死亡率低于对照18．1％,延缓相对电导率值和丙二醛含量的增加,同时提高植株SOD、POD、GR活性及GSH含量,但降低了CAT活性和AsA含量以及高温胁迫3h后的APX活性。这说明,高温胁迫下外源SA可以通过调节百合抗氧化系统,提高抗氧化系统酶的活性来增加其耐热性。     

青皮竹与水稻远缘杂交育种关键技术研究

采用青皮竹与水稻进行远缘杂交,从中选育出竹稻966和竹稻989,用于农业生产,属国内首创。核心部分:研究的关键技术:1、掌握青皮竹开花习性。每年3￣6月为开花季节,每天早晨5:00￣7:00为盛花时段,花粉超过25℃易干死。2、选择最佳母本和授粉授精最佳时段。采用饶科F4作母本,并于早晨5:00用45℃￣46℃温水处理3￣4min杀死水稻雄性花粉后套袋,再收集青皮竹的花粉授粉2￣3次,又随即套袋。3、采用0.05%的秋水素液浸杂种一代的宿根分蘖苗3h。4、采用二种竹稻的复合体进行反复回交、复交。不能忽略部分:青皮竹的开花习性,选择最佳母本和杀雄授粉的最佳时段,0.05%的秋水仙素液处理杂种一代的蓿根分蘖苗,用二种竹稻的复合体回交、复交。