兰花高频再生体系探究

[目的]为兰花转基因工程研究奠定基础。[方法]以大花蕙兰原球茎、小苗和春兰种子为材料,以MS为基本培养基,将原球茎切成薄片slice、小苗叶片切成小段进行诱导培养,用舍有GFP基因的农杆菌对春兰幼小原球茎进行转化,检测GFP,的瞬间表达。[结果]薄层切片较薄时,褐化和死亡率较高,但从切口处长出的原球茎多而圆;薄层切片较厚时,褐化和死亡率较低,但切口处无再生原球茎产生;对切片进行7d的暗处理可提高薄层的再生率,黑暗中再生的白色原球茎见光培养2～3d后即可转绿,并很快分化出小芽;叶片原球茎仅在叶片基部的居间分生组织处产生;小于1min的类原球茎为最佳转化受体,GFP的瞬间表达率可达60％。[结论]建立了兰花高频再生体系。     

蝴蝶兰原球茎诱导研究进展

对影响蝴蝶兰原球茎的诱导因素,包括外植体、培养基、生长调节剂、添加物和活性炭等进行了探讨.     

蝴蝶兰无菌播种及快繁技术研究

以蝴蝶兰无菌种子为材料,对蝴蝶兰种子消毒和萌发、原球茎诱导、增殖和分化培养、芽生根培养基、壮苗培养基配方进行研究。结果表明,种子经次氯酸钠和洗衣粉消毒,有利于促进种子萌发和原球茎的形成;最适合种子萌发的培养基为MS＋香蕉泥100g/L＋马铃薯50g/L＋NAA 0.5mg/L;原球茎的形成及增殖培养以MS＋6-BA 2.0mg/L＋NAA0.1mg/L＋香蕉泥100g/L为佳,分化培养基为MS＋6-BA 0.1mg/L＋NAA 0.1mg/L＋香蕉泥80g/L＋蔗糖20g/L＋活性炭2.0g/L＋卡拉胶7.0g/L。小苗生根培养基为MS＋NAA 0.1mg/L＋香蕉泥100g/L＋蔗糖20g/L＋卡拉胶7.0g/L＋活性炭2.0g/L,生根率达98%以上;壮苗培养基为MS＋香蕉泥80g/L＋马铃薯汁50g/L＋蔗糖20g/L＋卡拉胶7.0g/L＋活性炭2.0g/L。经过适当驯化处理,将壮苗移栽到疏松的水草或苔藓基质中,注意温度、湿度及光照管理,成活率可达90%以上。     

基于正交试验法的铁皮石斛原球茎生长和多糖合成研究

以无菌铁皮石斛原球茎为材料,采用液体悬浮培养的方式,以正交设计方法研究不同的pH、摇床转速、接种量、植物生长调节剂对铁皮石斛原球茎生长和多糖合成的影响,以确定适合铁皮石斛原球茎生长和多糖合成的不同植物生长调节剂配比最佳组合和不同的pH、摇床转速、接种量最佳组合.结果表明:以干重和多糖产量为指标,促进原球茎干物质形成的不同植物生长调节剂配比最优水平的组合为NAA O.6mg/L+BA0.5mg/L+ KT 1.5mg/L,促进原球茎多糖合成的植物生长调节剂配比最佳组合为NAA 0.4mg/L+BA 0mg/L+KT 1.5mg/L;摇床转速120r/min、初始pH6.0、接种量90g/L是有利于铁皮石斛原球茎的干物质形成和多糖合成的最佳组合.     

铁皮石斛组织培养研究进展

在介绍铁皮石斛的自然生长条件和繁殖状况的基础上,从种子的无菌萌发、器官发生诱导、原球茎发生与分化成苗、细胞培养、试管开花等方面阐述了近年来关于铁皮石斛组织培养的研究概况,并初步分析存在的问题及发展方向。     

ABA预处理对蝴蝶兰类原球茎耐脱水性及生理基础的影响

探讨ABA溶液预处理蝴蝶兰类原球茎(PLB)对耐脱水性及生理学基础的效应,本实验观测H2O和ABA溶液分别预处理PLB的脱水成活率及脱水前后的相关生理指标。结果表明,80μmol/L的ABA溶液预处理PLB,显著降低失水速度,极显著提高脱水后成活率。新鲜PLB、H2O或ABA溶液浸泡的PLB三者之间的干物质重量、相对电导率和成活率均无显著差异。ABA溶液预处理能极显著提高PLB可溶性蛋白、热稳定蛋白、可溶性糖和蔗糖含量,明显地降低还原糖含量,也能使PLB的SOD活性极显著提高,POD、CAT活性均极显著降低,但总抗氧化能力极显著提高。所以,ABA溶液短时间处理蝴蝶兰PLB并不能明显改变重量和造成损伤,预处理能提高脱水保护物质含量和总抗氧化能力水平,是增强PLB脱水耐性的基础。     

铁皮石斛原球茎悬浮液培养研究进展

铁皮石斛是我国名贵中药材,其原球茎悬浮液培养能很好地解决铁皮石斛人工育苗成活率低及其有效成分多糖提取原材料不足的问题。为提高铁皮石斛原球茎悬浮液培养技术,通过查阅近几年相关文献,综述铁皮石斛原球茎悬浮液培养中的几个关键技术的研究现状,旨在为铁皮石斛产业的发展提供参考。     

蝴蝶兰基因工程研究进展

蝴蝶兰作为热带和亚热带最重要的观赏花卉之一,在基因工程的改良上有着诱人的前景。综述了蝴蝶兰遗传转化的转基因受体材料、导入的外源基因和克隆的相关基因、抗病毒基因的研究现状,展望了蝴蝶兰转基因技术及其应用前景。     

野生西藏虎头兰组培技术研究

以野生西藏虎头兰种子为试验材料,应用组培技术开展种子无菌播种、原球茎诱导芽分化、试管苗生根等试验,初步筛选出不同发育阶段的培养基配方。种子萌发培养基为:Hyponex 1号1 g.L-1+Hyponex 2号1 g.L-1+6-BA1 mg.L-1+10%香蕉汁+2%苹果汁+蔗糖20 g.L-1+琼脂6 g.L-1+AC 1 g.L-1,种子萌发率达90%～98%;原球茎分化最佳培养基为:MS+NAA1 mg.L-1+5%香蕉汁+2%苹果汁+蔗糖20 g.L-1+琼脂6 g.L-1+AC1 g.L-1,芽分化率高达89%;壮苗生根最佳培养基为:1/2 MS+NAA1 mg.L-1+5%香蕉汁+AC 1.5 g.L-1+蔗糖20 g.L-1+琼脂6 g.L-1,生根率达100%。     

化学发光法测定烟叶中的总氮

建立测定烟叶中总氮含量的新方法。烟叶中的含氮化合物经消化后,加碱蒸馏,用硫酸吸收,全部转化为氨态氮,根据NH4+在碱性溶液中能还原ClO ,该反应和化学发光反应ClO?-－Luminol相耦合,降低化学发光强度,从而达到测定NH4+的目的。本方法的检测下限达到10-3mg/kg,线性范围选择0.01～1.5（mg/kg）,加标回收率在87.3%～109.9%之间,RSD＜5%(n=5),完全能满足烟叶中总氮测定的要求。