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41.
为探索干扰素诱导跨膜蛋白1(interferon-inducible transmembrane protein 1,IFITM1)对猪源冠状病毒复制的影响,本研究选用猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)高致病毒株及其宿主细胞PK15作为研究对象。正常PK15细胞接种TGEV后,实时荧光定量PCR检测感染后不同时间点PK15细胞中一些干扰素刺激基因(interferon-stimulated genes,ISGs)的mRNA表达水平;利用慢病毒表达系统构建稳定表达和稳定干扰IFITM1表达的PK15细胞系。将一段靶向干扰猪源IFITM1的shRNA序列及猪源IFITM1全长,分别插入pLKO.1-EGFP-Puro载体及pLVML-Myc-MCS-IRES-Puro载体中,分别构建出pLKO.1-IFITM1shRNA-EGFP-Puro及pLVML-Myc-IFITM1-IRES-Puro重组质粒。将重组质粒与慢病毒包装质粒共转染293FT细胞后获得带有目的基因的重组慢病毒,慢病毒侵染PK15细胞后用嘌呤霉素进行筛选,获得稳定表达及稳定干扰IFITM1表达的PK15细胞系,分别命名为PK15-IFITM1及PK15-IFITM1-/-,并分别用实时荧光定量PCR、间接免疫荧光试验(IFA)及Western blotting检测IFITM1干扰效率及表达情况;TGEV接种PK15-IFITM1-/-和PK15-IFITM1,实时荧光定量PCR测定细胞中TGEV的拷贝数。结果显示,PK15细胞接种TGEV后的48 h内,一些ISGs的mRNA水平均有所上升;PK15-IFITM1-/-细胞系的干扰效率为70%,PK15-IFITM1细胞系表达成功;在PK15-IFITM1-/-细胞系中,IFITM1的mRNA水平显著下调,促进了TGEV的复制。反之,在PK15-IFITM1细胞系中,TGEV的复制受到了抑制。但IFITM1的表达或缺失却不影响TGEV对PK15的吸附作用。总之,IFITM1对TGEV有显著的抗病毒作用,IFITM1不影响TGEV对PK15细胞的早期吸附,这为后续IFITM1抗冠状病毒机制的研究奠定了基础。 相似文献
42.
Akihito TAKAHASHI Ajalli RAHIM Miki TAKEUCHI Emiko FUKUI Midori YOSHIZAWA Kuniaki MUKAI Makoto SUEMATSU Hidetoshi HASUWA Masaru OKABE Hiromichi MATSUMOTO 《The Journal of reproduction and development》2016,62(1):43-49
Tubulointerstitial nephritis antigen-like 1 (Tinagl1, also known as adrenocortical zonation factor 1 [AZ-1]
or lipocalin 7) is a matricellular protein. Previously, we demonstrated that Tinagl1 expression was restricted
to extraembryonic regions during the postimplantation period and detected marked expression in mouse
Reichert’s membranes. In uteri, Tinagl1 is markedly expressed in the decidual endometrium during the
postimplantation period, suggesting that it plays a physical and physiological role in embryo development
and/or decidualization of the uterine endometrium during pregnancy. In the present study, in order to
determine the role of Tinagl1 during embryonic development and pregnancy, we generated
Tinagl1-deficient mice. Although Tinagl1–/– embryos were not
lethal during development to term, homologous matings of Tinagl1–/– females and
Tinagl1–/– males showed impaired fertility during pregnancy, including failure
to carry pregnancy to term and perinatal lethality. To examine ovarian function, ovulation was induced with
equine chorionic gonadotropin (eCG) and human chorionic gonadotropin (hCG); the number of ovulated oocytes did
not differ between Tinagl1–/– and Tinagl1flox/flox.
In vitro fertilization followed by embryo culture also demonstrated the normal
developmental potential of Tinagl1-null embryos during the preimplantation period. Our
results demonstrate that Tinagl1 deficiency affects female mice and results in subfertility phenotypes, and
they suggest that although the potential of Tinagl1–/– oocytes is normal, Tinagl1
is related to fertility in adult females but is not essential for either fertilization or preimplantation
development in vitro. 相似文献
43.
44.
三棱栎种子特性与其致濒关系初步分析 总被引:3,自引:0,他引:3
三棱栎是云南特有种,国家二级保护植物,主要分布在澜沧、沧源、孟连、西盟、勐腊等县.研究表明,其萌发温度在20~35℃范围内,萌发率在5.3%~9.1%之间.4个不同分布地和8种温度条件下萌发率差异不显著.本文认为三棱栎濒危的主要原因是:(1)三棱栎果实结实率低;(2)果实的特殊形状,不利于传播;(3)幼苗缺乏竞争力.针对三棱栎的濒危现状和原因,提出了三棱栎的一些保护措施. 相似文献
45.
Tu Zhiying Yu Chuzhong 《保鲜与加工》1988,(1)
In this paper, the machine( physical) parameters of the alternator system are on-line estimated on the basis of the derived system continuous-tims model, using Recursive Least-squares Estimation and Inverse Calculation Method proposed by Authors. Therefore, the estimated machine parameters can effectively track the changes of their true values and accomplish the fault detection for the alternator system. This paper gives a new way for machne parameter estimation and fault detection of the alternator systems. 相似文献
46.
Feng Hailiang Wu Junliang 《保鲜与加工》1997,(6):108-113
Some conceptions of stable quaternion matrices and some judging criteria are given.The Robrach theorem,Taussky theorem,Ostrowski Schneider theorem and Gerschgorin theorem are generalized to quaternion field.The conclusion about two quaternion matrices,i.e.,inferior positive matrices are unstable,interior negative matrices are stable and some other results are pointed out. 相似文献
47.
48.
This paper takes "how to estimate the complex security of Large Convention and Exhibition Centre effectively" as the research goal.Based on analyzing the difficulties,target system,technical constitution,probing into the architecture,safety science,and using for reference the mathematics,operational research,statistics and modern system theory and method,trying to explore establishing an evaluation methodological system,which is provided with integrated characters on subject.Based on these ways,it exerts "quality to quantity" fuzzy analytical hierarchy process(FAHP) and aims at discussing the safety grade assessment of the Chongqing International Conference Exhibition Center focusing on designing theories.The aim is to enhance the integration of design practice and safe consciousness,strengthen the building safety management,and perfect city public security system.In practice,it is also an efficient tool for favoring values of architectural environmental safety. 相似文献
49.
以 2个示范区作为实例构建了一套对南方涝渍地实施以农业工程技术为基础的综合整治与建设后的效果进行评价的评价体系。该体系由工程效果、农业综合开发效果和综合效益等 3部分构成。在工程效果评价中 ,重点对工程实施后的抗灾减灾效果和代表经过改良后农田物理构架改变的“农田综合生产力指数 (IPI)”等二方面进行了分析。研究表明 ,该评价体系能比较全面、有重点地对涝渍地综合改良的实效做出评价。由于该体系实现了评价的数量化 ,使用该评价体系既利于对同一地区改良前后的效果做出对比分析、找出存在的问题 ,也利于对邻近不同地区的改良效果做出比较评价。对 2个示范区进行实际评价的结果表明 ,该地区的涝渍地综合整治开发效果良好 ,其第一期工程取得成功。 相似文献
50.