全文获取类型
收费全文 | 3326篇 |
免费 | 91篇 |
国内免费 | 227篇 |
专业分类
林业 | 125篇 |
农学 | 191篇 |
基础科学 | 72篇 |
126篇 | |
综合类 | 1702篇 |
农作物 | 145篇 |
水产渔业 | 174篇 |
畜牧兽医 | 897篇 |
园艺 | 135篇 |
植物保护 | 77篇 |
出版年
2024年 | 22篇 |
2023年 | 65篇 |
2022年 | 104篇 |
2021年 | 116篇 |
2020年 | 115篇 |
2019年 | 116篇 |
2018年 | 46篇 |
2017年 | 109篇 |
2016年 | 142篇 |
2015年 | 111篇 |
2014年 | 164篇 |
2013年 | 143篇 |
2012年 | 215篇 |
2011年 | 269篇 |
2010年 | 273篇 |
2009年 | 262篇 |
2008年 | 273篇 |
2007年 | 223篇 |
2006年 | 156篇 |
2005年 | 131篇 |
2004年 | 95篇 |
2003年 | 97篇 |
2002年 | 67篇 |
2001年 | 48篇 |
2000年 | 45篇 |
1999年 | 38篇 |
1998年 | 47篇 |
1997年 | 27篇 |
1996年 | 28篇 |
1995年 | 16篇 |
1994年 | 6篇 |
1993年 | 11篇 |
1992年 | 11篇 |
1991年 | 14篇 |
1990年 | 21篇 |
1989年 | 6篇 |
1988年 | 1篇 |
1987年 | 6篇 |
1986年 | 3篇 |
1985年 | 2篇 |
排序方式: 共有3644条查询结果,搜索用时 15 毫秒
1.
2.
3.
对猪瘟病毒(CSFV)C株、LT株E2基因主要抗原区在pGEX系列表达载体中原核表达的融合蛋白进行了变性、复性和纯化回收试验。用建立的变性、复性和纯化方法,获得了可溶性的纯化蛋白E2,其纯度达70%,回收率为10%。对复性纯化的E2蛋白进行了免疫活性检测,结果表明,其比未纯化蛋白的免疫活性高20倍左右。 相似文献
4.
人工蛹虫草子实体及大米培养基残基中虫草素的提取纯化方法 总被引:9,自引:0,他引:9
本实验主要对人工蛹虫草子实体及培养基中虫草素(3‘-脱氧腺嘌呤核苷)进行提取、纯化及纯度鉴定。结果表明:经过对蛹虫草子实体及培养基的粉碎、石油醚脱脂、80-85℃水浴12小时、调节等电点沉淀、732-NH4离子交换树脂的分离、浓缩、4℃下低温结晶,可得到一定纯度的虫草素晶体。 相似文献
5.
本文对近年来中草药多糖在提取、分离纯化和免疫药理作用等方面的研究进展作一综述,为以后中草药多糖的深入研究奠定基础。 相似文献
6.
7.
【目的】筛选黄曲霉颉颃菌,探究其最佳培养条件及有效抗菌成分,为实际生产中应用生物防治方法抑制黄曲霉污染提供新的理论依据。【方法】通过平板对峙法及分子生物学鉴定方法对待测菌株进行筛选鉴定。以抑菌率作为衡量标准,判断所得黄曲霉颉颃菌的最佳培养温度、培养时间、接种量、转速、pH及装液量。通过硫酸铵沉淀法从颉颃菌无菌发酵上清液中提取蛋白,观测粗提物对黄曲霉菌丝生长的影响。通过离子交换色谱和凝胶过滤色谱进一步纯化粗提蛋白,并进行质谱测序及序列对比分析,筛选鉴定颉颃菌产生的有效抑菌成分。【结果】筛选到1株解淀粉芽孢杆菌B10(菌种保藏号CCTCCNO:M2018353)。最佳培养条件为温度40℃,培养时间36 h,接种量3%,转速120 r/min, pH 6.0,装液量30 mL,最大抑菌率可达46.56%。其粗提蛋白能有效抑制黄曲霉生长,破坏菌丝正常形态,并从中筛选出几丁质结合蛋白、壳聚糖酶、葡聚糖酶等8种可能的有效抑菌成分。【结论】本试验分离鉴定出1株抑制黄曲霉正常生长发育的解淀粉芽孢杆菌B10,其产生的多种蛋白成分对黄曲霉有显著抑菌活性。 相似文献
9.
为验证牛分枝杆菌外膜蛋白A是否具有免疫活性,以牛分枝杆菌Vallee Ⅲ株基因组DNA为模板扩增牛分枝杆菌外膜蛋白基因ompA,采用DNA重组技术将此基因片段连于表达载体pGEX6p-1,构建重组质粒pGEX6p-1-ompA,并将其转化到大肠杆菌中BL21(DE3)中,IPTG诱导(终浓度为0.1mmol/L),表达产物进行SDS-PAGE分析.用glutathione sepharose 4B纯化蛋白和Western blot分析该蛋白的免疫学活性.结果表明:pGEX6p-1-ompA以可溶形式表达,蛋白分子量大小为60 kDa,与预计大小相符,纯化的蛋白具有良好的免疫学活性. 相似文献
10.
从采取的新鲜麋鹿血液中提取麋鹿基因组DNA,通过PCR的方法从麋鹿基因组中扩增麋鹿PrP蛋白核心片段的DNA,并分别在引物的5′和3′端引入EcoRⅠ和HindⅢ两个酶切位点,下游引物将原序列TATTAC突变为TAAT从变成两个终止密码子。通过两个酶切位点将麋鹿PrP蛋白核心片段DNA连接到pET-32a(+),转化DH5α,通过酶切鉴定和PCR鉴定,筛选出阳性克隆送菌液测序,从测序结果分析阳性克隆是否符合要求。测序正确后将核心片段基因连接到pET-32a(+),阳性质粒命名为MPrP-pET-32a(+),阳性质粒转化E.coli BL21(DE3),进行诱导表达、蛋白质纯化鉴定。 相似文献