Measurement of urinary concentrations of the mycotoxins zearalenone and sterigmatocystin as biomarkers of exposure in mares

Mycotoxins may affect animal health, including reproduction. Little is known about the clinical relevance of exposure of horses to contaminated feed. This study aimed at (i) monitoring the levels of the mycotoxins zearalenone (ZEN), with its metabolites α‐ and β‐zearalenol (α‐ and β‐ZOL), and sterigmatocystin (STC) in urine samples from thoroughbred mares in Japan and (ii) relating these findings to the potential effects on reproductive efficacy of breeding mares. Sixty‐three urine samples of breeding mares from 59 breeding farms were used. Urine samples and reproductive records were collected from each mare when it was presented to the stallion station. Urinary concentrations of ZEN, α‐ and β‐ZOL, and STC were measured using liquid chromatography‐tandem mass spectrometry (LC‐MS/MS). ZEN, α‐ and β‐ZOL were measurable in the urine of all examined mares, indicating the prevalence of ZEN in equine feeds. In seven of the 63 samples, STC was also detected at levels ranging from 1.3 to 18.0 pg/mg creatinine. No significant correlation between the concentrations of mycotoxins and pregnancy status was observed. In conclusion, measurement of mycotoxins in urine samples is a useful non‐invasive method for monitoring the systemic exposure of mares to multiple mycotoxins.     

玉米赤霉烯酮对不同时期小鼠子宫细胞凋亡及凋亡因子的影响

本试验旨在研究在饲粮中添加不同水平的玉米赤霉烯酮(ZEA)对发情前期、发情期、产仔后雌性小鼠子宫细胞凋亡及相关因子的影响。选取4周龄昆明雌性小鼠120只,随机分为4组,每组30只。选取雄性小鼠20只,随机分为4组,每组5只。7 d预试期结束后,试验分2个阶段。第1阶段,各组雌鼠分别饲喂在基础饲粮中添加0(对照)、50、100、150 mg/kg ZEA的饲粮,饲喂时间是20 d。饲养试验结束后的第2、3、4天,通过阴道涂片法每组挑选出发情前期、发情期小鼠各10只,脱椎处死,摘取子宫角,用于子宫细胞凋亡原位末端标记法(TUNEL)染色和凋亡相关因子mRNA表达量的检测。第2阶段,每组剩余雌鼠与雄鼠按2∶1进行合笼,至产仔后,按上述方法采样检测。结果表明:1)发情前期凋亡细胞主要位于子宫内膜间质细胞及上皮细胞;与对照组相比,添加100、150 mg/kg ZEA极显著提高凋亡阳性表达细胞平均光密度值(P<0.01),且极显著上调半胱天冬蛋白酶(caspase)-3、caspase-8、caspase-9及B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2) mRNA相对表达量(P<0.01); 2)发情期细胞凋亡主要集中在子宫内膜间质细胞、子宫内膜上皮细胞及子宫腺上皮细胞;与对照组相比,随着ZEA添加水平的增加,凋亡细胞呈剂量依赖性增加(P<0.01),能够极显著上调凋亡相关基因mRNA相对表达量(P<0.01); 3)产仔后期凋亡细胞分布较为均匀;与对照组相比,添加150 mg/kg ZEA凋亡程度极显著增加(P<0.01);添加100 mg/kg ZEA能够显著上调Bcl-2、caspase-3 mRNA相对表达量(P<0.05),添加150 mg/kg ZEA能够显著上调caspase-8、caspase-9 mRNA相对表达量(P<0.05)。综上所述,ZEA能够促进不同时期小鼠子宫细胞凋亡,并且能够上调凋亡相关基因caspase-3、caspase-8、caspase-9、Bcl-2表达。     

玉米赤霉烯酮与大麻的性别表达

大麻９Ｃｏｎｎａｂｉｓ ｓａｔｉｖａ Ｌ．）发育过程中内源玉米然酮含量发生规律性变化,茎尖内源玉米赤霉烯酮在花原基出现前和花期前出现含量高峰,在达到花期前的真叶内出现ＺＥＮ含量高峰。外源玉米赤霉烯酮处理提高大麻的雄株／雌株比例,而６－ＢＡ处理高大 麻雄株／雄株比,同时ＺＥＮ处理降低性别决定关键时期的ＣＴＫ含量,首先降低２大麻真叶内的ＣＴＫ含量,而后降低茎尖内的ＣＴＫ含量。说明ＺＥＮ可能通过降低２细     

呕吐毒素和玉米赤霉烯酮的理化及毒理特性分析

由于谷物中含有真菌的有毒次生代谢物霉菌毒素,其对动物的健康、生产性能及动物源性食品的质量可能有负面影响,这对动物营养是一个永久性的挑战。因此,本文综述了霉菌毒素在动物营养中存在的问题、对易感动物的影响以及应对谷物感染毒素污染的管理策略。     

Enhanced mycotoxin production of a lipase-deficient <Emphasis Type="Italic">Fusarium graminearum</Emphasis> mutant correlates to toxin-related gene expression

Fusarium graminearum causes important diseases of small-grain cereals and maize and produces several mycotoxins. Among them, deoxynivalenol (DON) and zearalenone (ZEA) can accumulate in feedstuffs and foods to health-threatening levels. Although DON is important for fungal virulence in wheat, disease severity in the field does not correlate with mycotoxin concentrations. We compared gene expression and mycotoxin production of lipase-deficient mutants (Δfgl1), strongly reduced in virulence, and the respective wild-type isolate. Δfgl1 mutants exhibited up-regulated DON production during wheat head infection. On isolated wheat kernels, DON was only produced in low quantities, but higher in wild-type than in Δfgl1 mutants. In contrast, neither wild-type nor Δfgl1 mutants produced ZEA during wheat head infection. However, ZEA was clearly detectable on wheat kernels. Here, Δfgl1 mutants revealed a dramatically enhanced ZEA production. We could correlate the altered amounts of DON and ZEA directly with the expression of the toxin-related genes Tri5 for DON and PKS4 and PKS13 for ZEA. Based on Tri5 expression and the infection pattern of the wild-type and Δfgl1 mutants, we suggest that the transition zone of rachilla and rachis is important in the induction of DON synthesis. Gene expression studies indicate an involvement of the lipase FGL1 in regulation of 8 PKS genes and ZEA production.     

玉米赤霉烯酮降解酶在枯草芽孢杆菌中的表达及其对母猪繁殖性能的影响

本试验旨在建立玉米赤霉烯酮(ZEN)降解酶基因ZEN-jjm在枯草芽孢杆菌中的表达体系,确定其产物的生物降解活性及对母猪繁殖性能的作用。克隆ZEN-jjm基因,经EcoRⅠ和NotⅠ双酶切后连接至p HT01表达载体中,构建重组质粒;转化枯草芽孢杆菌,通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析ZEN-jjm蛋白表达水平。高效液相色谱法(HPLC)检测表达的ZEN-jjm蛋白降解ZEN的活性。通过对母猪的繁殖性能的评价,确定ZEN降解酶降解ZEN对母猪繁殖性能的影响。双酶切和测序结果表明:ZEN-jjm成功插入p HT01中,SDSPAGE表明获得1株高效表达目的蛋白的重组枯草芽孢杆菌,其大小约为29 ku。HPLC结果表明表达的ZEN-jjm蛋白能有效地降解ZEN;表达的ZEN-jjm蛋白能显著缓解ZEN对繁殖母猪的毒害作用(P0.05)。综上:1)本研究成功构建了表达ZEN-jjm在枯草芽孢杆菌中的表达载体,并在枯草芽孢杆菌中得到了表达。2)表达的ZEN-jjm蛋白具有降解ZEN的生物活性。3)在饲粮中添加ZEN-jjm蛋白能显著降低ZEN对母猪能繁殖性能的危害。     

青海省部分地区猪饲料中霉菌毒素污染情况调查分析

为了解青海省部分地区猪饲料中霉菌毒素的污染情况,应用ELISA方法对2012年采集的青海省部分地区205份猪饲料样品进行了赭曲霉毒素A （OTA）、黄曲霉毒素B1（AFB1）、呕吐毒素（DON）、玉米赤霉烯酮（ZON）的检测与分析.结果表明.156份商品化饲料中,OTA、AFB1、DON、ZON阳性率分别为7.05％、16.03％、83.33％和69.87％,49份自制饲料中,OTA、AFB1、DON、ZON阳性率分别为6.12％、28.57％、85.71％和73.4％;156份商品化饲料中,总单污率为11.54％,总混污率为79.49％,在49份自制饲料中,总单污率为8.16％,总混污率为91.84％;试验显示,青海省部分地区饲料中存在霉菌毒素的污染,且混合污染现象严重,同时自制饲料的污染程度较商品化饲料高.     

日粮中玉米赤霉烯酮和大豆异黄酮联合作用对后备母猪生殖器官发育和雌激素受体基因转录的影响

本试验旨在研究玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEA)和大豆异黄酮(Soybean isoflavone,ISO)二者联合作用对后备母猪生长性能、生殖器官发育及生殖器官雌激素受体(Estrogen receptors,ERs)基因转录的影响。采用3×3两因子析因法设计,将90头75日龄的D×L×Y三元杂交后备母猪随机分为9个处理,每个处理5个重复,每个重复2头猪。各处理组在基础日粮基础上分别添加ZEA 0、0.5、2 mg.kg-1和ISO 0、300、600 mg.kg-1。试验时间为21 d。结果表明:日粮中同时添加ZEA和ISO对后备母猪平均日增体质量(ADG)和平均日采食量(ADFI)影响不显著(P>0.05)。日粮中同时添加ISO和0.5 mg.kg-1ZEA与单独添加0.5 mg.kg-1ZEA处理组相比,生殖器官质量和阴户宽度增加。但日粮中添加ISO可缓解2 mg.kg-1ZEA导致的生殖器官增加质量和阴户红肿(P<0.05),降低子宫和阴道组织ERαmRNA的转录水平,而增加了ERβmRNA转录水平。结果提示,日粮中添加ZEA和ISO联合作用对后备母猪ADG和ADFI无显著影响,日粮中I...     

免疫分析中五参数Logistic模型的应用

在计算机中用五参数 Logistic 回归方程对玉米赤霉烯酮不同免疫分析方法的数据进行处理,方便、快速、准确地建立标准曲线及测定样品中未知抗原浓度,克服了手工绘制曲线、查算抗原浓度的随意性及繁琐性,使免疫分析方法的数据处理更科学更简便,同时与常用的 Logit-log 模型的处理结果进行了比较,表明五参数 Logistic 回归模型更合理更准确。模型中的五个参数具有特定的物理及生物意义,与免疫分析方法的基本参数有一定的联系。