鸡新城疫病毒F48E9株血凝素神经氨酸酶基因免疫诱导免疫保护的初步研究

 将我国新城疫病毒标准强毒F4 8E9株的血凝素 神经氨酸酶基因克隆于真核表达载体 pcDNA3 中 ,进行鉴定后筛选阳性质粒。将此阳性质粒进行大量法提取并纯化后作为基因疫苗以每只鸡 10 0 μg的剂量肌肉接种 4 5日龄SPF鸡 ,并以 pcDNA3 空质粒作为对照。结果表明 ,新城疫基因疫苗能够诱导机体产生新城疫病毒特异的血清IgG抗体反应 ,但产生抗体所需的时间较长 ,抗体滴度的增加较为缓慢。人工接种新城疫强毒后 ,基因疫苗免疫组 4 / 6的鸡得到保护 ,而且保护鸡具有明显的抗体反应 ,2只鸡未得到保护 ,但其死亡时间明显迟于对照组鸡 ,死亡鸡具有典型的新城疫病毒感染鸡的病理形态学变化。     

猪瘟兔化弱毒荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

【目的】建立一种能够实际应用于猪瘟兔化弱毒疫苗中猪瘟病毒含量检测的荧光定量PCR方法。【方法】根据GenBank中登录号为AF091507的猪瘟病毒(CSFV)兔化弱毒株的全长基因组序列,在其5′非编码区设计2对特异性引物(标准品引物、定量引物)和1条探针(qPCR-P),通过标准品引物进行RT-PCR扩增及T7 RNA聚合酶体外转录构建标准品RNA。对荧光定量PCR方法的各项条件进行优化,建立猪瘟兔化弱毒荧光定量PCR检测方法,并采用该法对成品猪瘟兔化弱毒疫苗中的病毒含量进行检测。【结果】成功构建了体外转录的标准品RNA,建立了检测猪瘟兔化弱毒的荧光定量PCR方法。该方法检测灵敏度可达10拷贝/μL,比RT-nPCR方法的灵敏度高出1个数量级;该法对标准品RNA检测的线性范围为1.0×108~1.0×102拷贝/μL。对1.0×108,1.0×106,1.0×103拷贝/μL 3种稀释度的标准品RNA进行重复性试验,批内变异系数分别为0.54%,0.52%和0.39%;批间变异系数分别为1.47%,1.85%和1.01%,具有良好的可重复性。应用该方法对不同厂家猪瘟兔化弱毒疫苗中的病毒含量进行测定,可知同一厂家脾淋苗中的病毒含量比细胞苗高出1~2个数量级,而不同厂家同一类型疫苗中病毒含量也有差异,其中脾淋苗差异不大,而细胞苗间的差异较大,最高可达27.2倍。【结论】建立的猪瘟兔化弱毒荧光定量PCR方法,具有敏感性高、特异性强、重复性好的特点,为实际工作中对猪瘟兔化弱毒疫苗的质量监控提供了重要的技术支撑。     

姬松茸60Co辐射诱变菌株J5与原菌株J1蛋白质

采用非生物学评价法对姬松茸60Co辐射诱变菌株J5和其原菌株J1不同潮次菇蛋白质的营养价值进行评价.结果表明:J5子实体的必需氨基酸指数、生物价、营养指数、氨基酸比值系数分、化学评分和氨基酸评分分别比J1高1.02％、2.26％、2.93％、11.72％、9.35％和5.13％;以上6项蛋白质评价指标中,J5第1、第2...     

释放菌株与宣城放菌区球孢白僵菌流行菌株营养亲和性的研究

将1株释放菌株Bb13以及111株皖南宣城放菌区从僵虫、空气和土壤中分离获得的土著球孢白僵菌菌株进行配对培养,了解彼此间的营养亲和性.结果表明,112个菌株分属于9个营养亲和群,VCG1由36个菌株组成,VCG2由23个菌株组成,VCG3由25个菌株组成,VCG4由16个菌株组成,VCG5由8个菌株组成,VCG6、VCG7、VCG8和VCG9均只包含1个菌株.其中111株土著菌株中有35株与Bb13是亲和的,亲和比例为31.53%,有76株与Bb13不亲和,不亲和比例为68.47%.这些结果揭示了马尾松林生态系中球孢白僵菌具高度的种群异质性和丰富的遗传多样性.     

猪瘟病毒兔化弱毒株5’端调控序列及P23基因的扩增与克隆

从猪瘟病毒兔化弱毒株（ＨＣＬＶ）的细胞培养液中直接提取ＲＮＡ，同时根据猪瘟病毒Ａｌｆｏｒｔ株的基因组序列化学合成了６条引物，应用“半巢式”ＰＣＲ方法扩增了ＨＣＬＶ两个ｃＤ－ＮＡ片段，其大小与推算的长度相符，依次为６９３ｂｎ和２７６ｂｐ。这２个片段包括了ＨＣＬＶ基因组５’端非编码区调控序列，编码具有蛋白酶活性的Ｐ２３蛋白的基因和编码大部分核衣壳蛋白Ｐ１４的基因。最后，按标准方法将这２个ｃＤＮＡ片段克隆到ｐＵＣ１８的ＳｍａＩ切点。     

前裂长管茧蜂对不同抗性寄主的寄生特性研究

【目的】明确前裂长管茧蜂对不同抗性水平桔小实蝇的选择趋性及抗性寄主品系对寄生蜂的生长 发育特性。【方法】采用“Y”型嗅觉仪测试法和选择试验两种方法,测定前裂长管茧蜂对桔小实蝇 3 种农药不 同抗性品系的行为反应和寄生情况;同时通过生物学观察试验,研究裂长管茧蜂在桔小实蝇 3 种农药不同抗性 品系上的幼虫发育历期。【结果】前裂长管茧蜂对桔小实蝇敌百虫、高效氯氰菊酯、阿维菌素抗性品系均无显 著的趋向性选择;前裂长管茧蜂对不同抗性品系桔小实蝇的寄生量也无显著差异;前裂长管茧蜂在不同抗性寄 主品系上的幼虫发育历期表现出雌雄差异性,即雌虫在不同抗寄主品系上的幼虫发育历期均无显著差异,而雄 虫在高抗寄主品系上的幼虫发育历期显著短于中抗寄主品系和常规寄主品系。【结论】桔小实蝇不同农药抗性 品系不影响前裂长管茧蜂的选择寄生,但显著影响雄蜂的幼虫发育历期,试验结果为田间科学释放利用前裂长 管茧蜂防控桔小实蝇提供了理论基础。     

Pathogenic Antigenic and Molecular Characterization of the Very Virulent Strain(Gx) of Infectious Bursal Disease Virus Isolated in China

The very virulent infectious bursal disease virus (vvIBDV) strain Gx was isolated from a poutl-try farm in Guangxi Province, China, during 1996. The mortality in the infected flock was 80% and occurred5 days after immunization with serotype I IBD vaccine. The results of antigen-capture ELISA (AC-ELISA),pathogenicity testing, cloning and sequence analysis of the VP2 gene showed that the deduced amino acid se-quence of strain Gx VP2 was the same as vvIBDV UK661, which is considered as a reference strain for Europe-an vvIBDVs. The antigenicity of the Gx strain was the same as an European vvIBDV strain 849. The EID50 of Gx virus was 10-8. 25/0. 2 ml, and the mortality was 64 % when 4 week-old SPF chickens were challenged atdosage of 2 × 103 EID50. We have demonstrated that the IBDV strain Gx isolated in China is vvlBDV according to European standards.     

姜瘟致病菌高毒力菌株及拮抗菌的分离

[目的]筛选强拮抗能力强的芽孢杆菌。[方法]从山东莱芜采集病姜及附近土壤中分离出姜瘟致病菌高毒力菌株,并利用芽孢杆菌进行了拮抗试验。[结果]LW-4、LW-7、LW-32这3株菌对姜瘟致病菌有较强的拮抗能力,其抑菌圈面积较其他菌株大。[结论]为防治姜瘟病提供了理论依据。     

五氯硝基苯降解菌株的分离筛选及应用效果

从多年施用五氯硝基苯的栽参地土壤中分离出8株可降解五氯硝基苯的菌株，并对其降解效果进行了研究。结果表明：其中细菌B1、B2、真菌R、放线菌S1的降解效果最好，降解率分别为73．6％、81．0％、73．4％、72．0％。将这4株优势菌株制成复合菌剂，对复合菌剂中各组成菌种的生长情况及其对五氯硝基苯代谢效果的研究结果表明：复合菌剂A、B、C、D、F、G对五氯硝基苯的代谢能力强于单一菌株。     

白酒丢糟发酵生产蛋白质饲料的菌种筛选

研究了产朊假丝酵母、热带假丝酵母、白地霉、酿酒酵母、绿色木霉、黑曲霉与米曲霉发酵白酒丢糟生产蛋白质饲料的效果.结果表明:白地霉、黑曲霉、绿色木霉和热带假丝酵母效果最好,发酵后白酒丢糟的蛋白质质量分数提高了6.49%以上;对这4种菌进行组合筛选,发现由黑曲霉、绿色木霉和白地霉组合发酵,能将白酒丢糟的蛋白质质量分数提高9.96%.