西瓜嫁接砧木资源及其杂交组合枯萎病抗性鉴定

为了筛选西瓜枯萎病抗性砧木材料,对近年来收集整理的部分西瓜亲本材料及选配的砧木组合进行苗期枯萎病抗性人工接种鉴定。以国际上公认的5个西瓜枯萎病鉴别寄主材料(‘Black Diamond’‘Crimson Sweet’‘Charleston Gray’‘Calhoun Gray’‘PI296341-FR’)以及选配的49份西瓜砧木资源为试材,采用尖镰孢菌(Fusarium oxysporum f.sp.niveum)孢子悬浮液人工接种法,鉴定试验所用的西瓜枯萎病菌生理小种和砧木材料的枯萎病抗性。结果表明:鉴别寄主‘Black Diamond’‘Crimson Sweet’‘Charleston Gray’‘Calhoun Gray’‘PI296341-FR’的病情指数分别达85.2、53.0、27.2、19.2和7.8,抗性级别分别为感病、轻抗、中抗和抗病;49份西瓜砧木材料中,筛选出对Race 1表现抗病的材料有10份,占总供试材料的20.4%,中抗材料29份,占59.2%,轻抗材料10份,占20.4%,不存在免疫和完全感病的材料。确认该试验所用尖孢镰刀菌为生理小种1,筛选确定了高抗西瓜枯萎病的4份亲本材料588、893、BEH和FR328,6份杂交材料威砧101、Be-3×893、(BEH-15×Sugarlee)×893、(BEH1-15×Sugarlee)×341、(BEH1-15×AW2-1)×341和(BYH-1×Sugarlee)×893,可为设施西瓜生产提供优良的嫁接砧木资源。     

Biocontrol potential of Pseudomonas azotoformans,Serratia marcescens and Trichoderma virens against Fusarium wilt of Dalbergia sissoo

Wilt disease caused by Fusarium solani is a serious constraint to Dalbergia sissoo (shisham) plantations in northern India. In this study, the antagonistic potential of 40 bacterial isolates recovered from rhizophere soil of healthy shisham trees, and a well‐characterized Trichoderma species (Trichoderma virens) were tested for their possibility as biocontrol agents for F. solani. Two promising isolates (S1 and S15) were identified which inhibited pathogen growth, caused chitin degradation, produced siderophores and solubilized phosphate in vitro. Isolate S15 scored highest for hydrogen cyanide (HCN) production while isolate S1 was a non‐HCN producer. These two isolates were identified as Serratia marcescens (S1) and Pseudomonas azotoformans (S15) following sequence analysis of 16S rDNA. In dual culture assays, T. virens caused 80% inhibition of mycelial growth of the test fungus. The three selected antagonists when tested in planta in the glasshouse completely suppressed production of wilt symptoms on 12‐month‐old shisham plants. Further work is needed to ascertain the potential of these isolates to be used as biocontrol agents to manage shisham wilt under field conditions.     

番茄青枯病抑病土壤根际微生物群落特征及其抑制性传递机制

根际微生物在宿主植物抵御土传病害发生过程中发挥着重要作用。为探究抑病土壤与感病土壤根际微生物群落特征及其微生物群落构建机制,分别采集抑病土和感病土中的番茄根际土壤,采用实时荧光定量PCR技术检测两种根际土壤中的病原菌含量,并利用16SrRNA基因扩增子高通量测序技术分析抑病和感病土中番茄根际土壤微生物群落多样性、组成、结构以及基于零模型的微生物群落构建机制的差异。结果表明,与感病土相比,抑病土壤中番茄的青枯病病情指数明显降低（病情指数分别为47.5和22.5）,其根际中细菌群落具有更高的alpha多样性、更丰富的放线菌门、厚壁菌门以及芽孢杆菌科和链霉菌科等有益微生物,较低的青枯病菌丰度（病原菌丰度降低了12.22倍）并伴随着较高的随机性过程,因此抑病土壤受病害胁迫的适应性较强。将感病土壤与抑病土壤按照一定比例进行混合,形成了仅有感病土D10H0、感病土与抑病土质量比为1︰1的D5H5以及仅有抑病土D0H10这三种处理以进一步检测抑病土壤抑病特性的可传递性。结果表明,随着抑病土比例的增加,番茄青枯病病情指数逐步降低,D10H0、D5H5和D0H10的病情指数分别为41.67、29.17与...     

黄瓜品系WIS2757对黄瓜枯萎病生理小种4和黑星病的抗性遗传与连锁分析

【目的】黄瓜枯萎病和黑星病是危害中国黄瓜生产的两种主要病害,明确黄瓜品系WIS2757对黄瓜枯萎病生理小种4和黑星病的抗性基因遗传与连锁关系,为黄瓜抗病育种提供重要依据。【方法】以抗枯萎病生理小种4和黑星病的黄瓜材料WIS2757和感病材料津研2号为亲本,获得98个F3代株系,分别对双亲、F1和F3代株系进行苗期抗枯萎病和黑星病接种鉴定,并根据鉴定结果对枯萎病与黑星病的抗性遗传及两个抗病基因的连锁关系进行分析。【结果】亲本WIS2757抗枯萎病生理小种4和黑星病,津研2号高感两种病害。F1群体抗两种病害。根据F3株系对两种病害的抗病表现推断F2对应株的抗病基因型并进行卡方测验,结果表明,F2群体对枯萎病和黑星病的抗性分离均符合1﹕2﹕1的理论比例,而两对等位抗病基因的遗传不符合9﹕3﹕3﹕1的理论分离比例。连锁分析表明,黄瓜抗枯萎病生理小种4和黑星病的两对等位基因位于同一连锁群,两者的遗传距离为17.5 cM。【结论】WIS2757对枯萎病和黑星病的抗性均由单显性基因控制,将抗枯萎病生理小种4的基因暂定名为Foc-4。Foc-4和抗黑星病基因Ccu间存在遗传连锁关系。     

棉花NBS-LRR类基因RNA干扰载体的构建及烟草转化

【目的】初步获知棉花NBS-LRR类基因的生物学意义,构建干扰载体。【方法】以抗枯萎病棉花中棉12号为材料,用霍格兰营养液培养至三叶期,进行枯萎病菌接菌诱导处理,以不接菌为对照。利用cDNA-AFLP技术筛选差异基因片段,在GenBank中进行序列同源性比对,找到抗枯萎病基因片段,该基因片段的序列与GenBank中报道的序列同源性达到72%。将此基因片段以正向和反向插入到pPZP35S,经限制性酶切和质粒PCR鉴定。【结果】已成功构建了干扰载体。采用农杆菌侵染法将干扰载体转入烟草中。【结论】为研究棉花NBS-LRR类基因的功能打下基础,为通过转基因技术深入研究该基因在棉花抗病机理创造条件。     

木麻黄青枯病抗性鉴定方法比较及抗病种质筛选

【目的】筛选出简便、准确、可靠的木麻黄(Casuarinaceae)青枯病抗性鉴定方法,对我国现有的木麻黄种质资源开展抗病性鉴定与评价,筛选出优良抗病无性系。【方法】在木麻黄抗病品系筛选技术基础上,参考番茄Lycopersicon esculentum、烟草Nicotiana及桉树Eucalyptus等植物青枯病抗性鉴定方法,设计8种木麻黄青枯菌人工接种方法,系统探讨水培生根苗、嫩枝、绿梗小枝、褐梗小枝、青枯菌粗毒素及盆栽小苗伤根接种、盆栽小苗无伤接种等接种方法对木麻黄青枯病抗性鉴定的影响。【结果】不同无性系利用盆栽幼苗伤根接种法接种后的死亡率介于25.79%~83.06%,无性系K18、A14与G1、30差异极显著(P0.05);不同无性系用褐梗小枝室内水培接种的病情指数介于2.16~69.48,无性系K18、A14与G1、30差异极显著(P0.05)。这2种接种方法能够有效区分木麻黄抗、感无性系,且呈极显著正相关(r=0.856 5)。不同无性系在盆栽幼苗不伤根接种及水培生根小苗、嫩枝室内水培接种中抗病性差异不显著(P0.05),不能有效区分抗、感无性系。绿梗小枝接种后症状变化小,不易分级,容易出现观测误差;青枯菌粗毒素接种存在浓度难以控制等问题。利用褐梗小枝室内水培接种法,对53份木麻黄育种材料进行抗性评价,筛选出X1、30、杂交、G1等12份高抗材料。【结论】盆栽幼苗伤根接种及褐梗小枝室内水培接种方法是木麻黄青枯病抗性鉴定的较好方法,文中其他接种方法不是木麻黄青枯病抗性鉴定的优选方法。     

烟草根际细菌铜绿假单胞菌swu31-2的定殖能力及其对烟草青枯病的防治作用

从重庆黔江烟草田间分离获得一株烟草青枯菌拮抗菌株Pseudomonas aeruginosa swu31 2（简称swu31 2）。采用逐步提高药物浓度的方法,筛选获得了抗链霉素300 μg/mL对烟草青枯病菌拮抗活性稳定的swu31 2突变菌株。采用灌根接种法,研究其在烟草根、茎和叶表面及内部的定殖能力及其对烟草青枯病的防治作用。结果表明,swu31 2能在烟草各组织的表面及内部定殖。该菌株在烟草各组织内部的数量均表现为“由增到减”的趋势。在接种后第8天定殖数量达到最高峰,随后有所下降;到第20天各组织内的数量仍然维持较高水平（105 cfu/g 以上）。同时,在接种20 d后,烟草的根、茎和叶的表面仍然可以检测到swu31 2的存在。盆栽试验结果表明,swu31 2的菌液和活性物质对烟草青枯病均有一定的防治效果。其中先施swu31 2菌液和活性物质粗提物的防效好于农用链霉素（51.25%）,分别为60.87%和 60.32%,而后施菌液和活性物质粗提物的防效也分别达39.50%和20.90%。     

丙基双氢茉莉酮酸酯诱导棉花耐黄萎病的效应

温室内以10mg·L 1的丙基双氢茉莉酮酸酯(PDJ)灌根预处理后,再用黄萎病菌(Verticilliumdahliae)孢子悬浮液接种棉苗,处理棉苗与对照相比发病率和病情指数有所降低,表现出对棉花黄萎病的耐病性。对一些生化指标进行测定发现,PDJ灌根和接种都可引起棉苗叶片中苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性升高和木质素含量的增加,与此同时棉花叶片中的过氧化物酶(POD)活性及丙二醛(MDA)含量也都有所上升,在此基础上对PDJ诱导棉花耐黄萎病的可能生化机制作了归纳。     

2,4-二乙酰基藤黄酚产生菌在番茄根部的定殖及对番茄青枯病的防治

2,4-二乙酰基藤黄酚(2,4-DAPG)产生菌是荧光菌对土传病害进行生物防治的主要类群之一。室内筛选结果表明：供试的12个2,4-DAPG产生菌菌株对番茄青枯病菌均有不同程度的抑制作用,其中CPF、10抑菌效果最佳,抑菌带宽为3．5mm;而2P24、5J10次之,抑菌带宽为3．0mm。CPF10和2P24培养原液对番茄胚根的生长均有明显的抑制作用。CPF10和2P24根部定殖结果表明,两菌株均可在番茄幼苗根部大量定殖,根表细菌数量随着时间延长呈下降趋势但仍维持较高数量;而根内细菌数量有明显上升的趋势。CPF10和2P24对番茄青枯病均有一定的防治效果,其中2P24的防治效果最好。而CPF10在所有的处理中变异系数(CV)最小,防治效果最稳定。     

七株抗青枯病菌生防菌的初步鉴定

为了有效地利用有益微生物，对从湖南省23个烟草区62块烟地烟草根际和根表土壤以及苎麻土中分离筛选的7个抗青枯病菌而相互之间无颉抗作用的生防细菌菌株进行了细菌学性状的研究和DNA（G＋C）含量测定。初步鉴定出这7个菌株分别为：23－3为真养产碱菌（Alcaligene eutrophus)；湘1－2为不动杆菌（Acinetobactersp.)；湘2－3为蜡质芽胞杆菌（Bacillus cereus)；弯2－2为欧文氏菌属的一种（Erwinia sp.)；弯2－4为气单胞菌属的一种（Aeromonas sp.)；2－轻－9为侧胞芽孢杆菌（Bacillus.laterosporus)；1－1－8为黄杆菌属的一种（Flavobacter sp.)。