一株对鳞翅目蔬菜害虫具有广谱高毒力的新Bt菌株

从河北省土壤分离出苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)MB-15菌株,利用室内生物活性测定的方法,与Bt标准菌株HD-1的杀虫毒力进行比较,结果发现该菌株胞晶混合液对棉铃虫(Helicoverpaarmigera)、甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)、小菜蛾(Plutella xylostella)、斜纹夜蛾(Spodoptera litura)和菜青虫(Pieris rapae)等5种鳞翅目蔬菜害虫的毒力均高于标准菌株Bt HD-1胞晶混合液。对发酵液各组分活性的分析发现,该菌株的上清液对胞晶混合物的杀虫活性有明显的增效作用。光学显微镜下观察该菌株伴胞晶体为菱形,SDS-PAGE分析显示其伴胞晶体主要由130.0 kDa和65.0 kDa两种晶体蛋白组成。利用PCR-RFLP对其杀虫基因型进行鉴定,结果表明该菌株含有cry1Ac、cry2Aa、cry1I和vip3Aa基因。推断该菌株是一株对鳞翅目蔬菜害虫的防治具有潜在的商业开发价值的Bt野生株。     

Mode of inheritance and stability of resistance to Bacillus thuringiensis var kurstaki in a diamondback moth (Plutella xylostella) population from Malaysia

Genetic inheritance of resistance to Bacillus thuringiensis var kurstaki (BTK) was examined in a diamondback moth (Plutella xylostella) population collected from the Melaka region of Malaysia. A BTK‐selected sub‐population (BTK‐SEL) which was more than 100‐fold resistant to BTK compared with a susceptible (ROTH) population of P xylostella was used with standard reciprocal crosses and back‐crosses between ROTH and BTK‐SEL. Logit regression analysis of F ₁ reciprocal crosses indicated that BTK resistance was inherited as an incompletely recessive autosomal trait and controlled by a single locus. In contrast, other studies have shown that resistance to Cry1Ac is inherited as an incompletely dominant autosomal trait in a Cry1Ac‐selected sub‐population of the same Melaka population. The frequency of the allele responsible for resistance decreased without exposure to insecticide in the laboratory. © 2000 Society of Chemical Industry     

SOD对紫外辐射受损的苏云金芽孢杆菌作用的研究

探讨了超氧化物歧化酶 (SOD)等自由基清除剂对苏云金芽孢杆菌紫外辐射的影响。结果表明 ,SOD、绞股蓝皂甙等自由基清除剂能够明显地提高紫外辐射损伤细胞的存活率 ,并且SOD的保护作用表现为防护与恢复两种不同的作用。又通过细胞电泳与琼脂糖凝胶电泳发现紫外辐射后其细胞膜及质粒DNA均受到了明显的损伤 ;SOD对细胞膜损伤有一定的恢复作用 ,而对DNA不表现恢复效应。由此认为 :紫外线对细胞膜及DNA均有损伤 ,SOD恢复作用的主要部位在细胞膜而不是DNA分子。为进一步确定SOD的作用以及利用自由基清除剂制备高效的Bt农药提供了理论基础。     

食物颗粒和非食物颗粒对苏云金杆菌以色列亚种生物活性的影响

以埃及伊蚊幼虫为材料,比较了食物和非食物颗粒对苏云金杆菌以色列亚种致病能力的影响,结果表明：食物和非食物性颗粒皆能显著提高伊蚊幼虫对苏云金芽胞杆菌以及色列亚种商品制剂的抵抗力,颗粒物的这种作用与其营养功能无关。     

苏云金芽孢杆菌HD -1δ- 内毒素蛋白的纯化及其单克隆抗体细胞株的建立

从苏云金芽孢杆菌HD-1伴胞晶体中分离得到的毒素蛋白经过Sepharose 6B和DEAE Sephadex DE-52得到了纯化,纯化后的蛋白在SDS-PAGE上呈现一条带,其分子量约为68000。用纯化蛋白作为抗原免疫小鼠,通过杂交瘤技术建立了抗HD -1δ- 内毒素蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株。经过半年的体外培养,大多数细胞株仍能持续分泌高滴度的单克隆抗体。文中还讨论了抗体的特异性及理化特性。此单克隆抗体细胞株的建立将为植物基因工程产物的检测提供有力工具。     

Bt对分月扇舟蛾体毒性及体内保护酶系影响

以分月扇舟蛾5龄幼虫为研究对象,采用叶片药膜法测定了Bt对其毒性,研究了致死剂量的Bt对其体内SOD、CAT、POD保护酶活性的影响.结果表明:Bt对分月扇舟蛾36、48、72h的LC30和LC50分别为:24.674、8.578、5.622 ng·L-1和78.311、17.252、11.741 ng· L-1.9 ...     

苏云金芽胞杆菌质粒p26复制功能区的克隆

利用特异引物从基因组BAC文库筛选到1个35 kb的片段,对该片段测序比对分析发现可能含有p26的复制区.为了验证该片段中是否含有p26的复制区,首先,将大肠杆菌和苏云金芽胞杆菌穿梭载体pHT304用EcoR I酶切切掉苏云金芽胞杆菌复制子后自连,获得复制子克隆载体pHT304E;随后,将12 kbEcoR I片段亚克...     

转基因抗虫水稻的研究进展

本文综述了转基因抗虫水稻国内外研究的最新进展,阐述了利用生物工程技术进行转基因的程序和技术方法,指出了当前国内外转基因抗虫水稻研究存在的问题,提出了转基因抗虫水稻对人类安全性问题、昆虫产生抗性问题,并从基因构建、启动子选用等方面提出了解决途径     

苏云金芽胞杆菌菌株94的培养基优化及对4种鳞翅目幼虫的毒力

采用正交设计，获得了苏云金芽胞杆菌菌株９４（Ｂｔ９４）的最适液体培养基配方：葡萄糖质量浓度为０．７６ｋｇＬ－１、胰蛋白胨＋酵母浸膏为０．８ｋｇＬ－１、无机盐为０．１ｋｇＬ－１．采用该培养基进行摇床培养，活芽孢数可达１０１×１０１１个Ｌ－１．用摇瓶培养液对斜纹夜蛾和小菜蛾进行毒力测定，其ＬＣ５０分别为３５５．９９５１±２．６０９８和５８．２９０８±１．４２６２ｍＬＬ