端粒酶和细胞衰老

端粒是真核细胞染色体末端的一种特殊结构 ,由端粒 DNA和端粒蛋白质组成。端粒DNA是富含 G的高度保守的重复核苷酸序列 ,人和其他哺乳动物的端粒 DNA序列均由 5′-3′,方向 (TTAGGG) n 反复串联组成 ,它参与 DNA复制 ,对维持染色体的稳定和完全复制有重要作用。正常动物细胞 DNA的端粒随着细胞分裂而缩短 ,当缩短到一定长度时细胞将停止增殖并死亡。细胞中的端粒酶在正常细胞不表达 ,只在生殖细胞、干细胞和肿瘤细胞中表达。文章介绍了细胞衰老的细胞生物学机制、端粒酶和细胞衰老的关系 ,讨论了端粒酶和克隆动物的早衰现象的关系     

端粒酶活性检测方法的改进及dNTP浓度对端粒酶活性的影响

利用重新设计的引物和反应步骤 ,对检测端粒酶活性的 TRAP反应进行了改进。与原有方法相比 ,新方法在PCR扩增过程中不改变端粒酶产物的长度和比例 ,能更准确地反映端粒酶反应产物的性质。利用这个方法 ,考察了d NTP浓度对端粒酶的影响 ,发现不同的脱氧核苷酸对端粒酶活性的影响有差异。     

端粒、端粒酶与肿瘤

端粒,端粒酶与肿瘤的关系是当今生物学,医学研究的热点之一。端粒是一种封闭了真核染色体末端的脱氧核糖核酸。它与端粒结合蛋白结合在一起,对染色体起到了保护的作用,另外,端粒的长度和细胞增殖有很大关系。端粒酶是一种特异的染色体末端转移酶,它的存在解决了染色体末端复制引缩问题,而且认为端粒酶的过度表达和细胞的永生化和癌变直接相关。端粒酶的结构和功能决定了它在肿瘤与癌症治疗等方面具有广泛的应用前景。文章综述了端粒、端粒酶的结构、功能,以及端粒与端粒酶活性在细胞癌变中的重要作用。     

端粒酶活性在子宫颈癌组织中的表达

目的 :了解不同临床分期、组织学分级子宫颈鳞癌组织中端粒酶活性。方法 :采用以 PCR为基础的端粒酶重复扩增方法及非变性 PAGE银染定性法检测不同临床分期、组织学分级子宫颈鳞癌组织中端粒酶活性。结果 :在子宫颈癌组织中端粒酶活性的表达率较正常宫颈、不典型增生宫颈组织的端粒酶活性高 (P<0 .0 1 ) ,且不同临床分期的子宫颈癌宫颈组织间端粒酶的表达率差异有显著性 (P〈0 .0 5) ,但不同病理分级的子宫颈癌宫颈组织间端粒酶活性的表达率差异无显著性 (P>0 .0 5)。结论 :端粒酶在子宫颈癌组织中呈现高表达 ,且与临床分期有关 ,端粒酶可望成为检测子宫颈癌的一个重要指标。     

应用端粒长度推断个体年龄的研究进展

细胞衰老机制是细胞生物学研究的一个重要课题。随着端粒及端粒酶与细胞衰老和年龄增长关系的揭示,端粒长度的缩短已经成为细胞衰老和年龄增长的生物学标志之一。作者首先介绍了端粒和端粒酶的结构、功能,进而分析其与细胞衰老、年龄增长的关系,并对端粒和端粒酶在年龄推断中的应用研究加以综述。     

人脂肪干细胞体外增殖的安全性评价

目的探讨体外培养条件下增殖的人脂肪干细胞是否具有做为种子细胞的安全性。方法体外分离、培养人脂肪干细胞并传代,观察其生物学特性,分别对第4代及第12代的人脂肪干细胞用TRAP法检测端粒酶活性,并进行染色体核型分析。结果新鲜分离和传代的人脂肪干细胞在体外培养12代的端粒酶活性呈阴性或者低水平表达,且未见染色体核型的改变。结论体外分增殖过程中,人脂肪干细胞的端粒酶活性及染色体核型未发生异常变化,符合作为种子细胞安全性的要求。     

RNA干涉水稻端粒酶再生植株的初步研究

依据水稻端粒酶基因的相关生物学信息,构建了含有水稻端粒酶序列RNA干扰结构的植物表达载体pC am 23A-1-2,并利用农杆菌介导法将目的基因导入到粳稻品种日本晴中,获得了78个独立转化子,共165棵转基因植株。通过PCR和Southern杂交分析,证明RNA干扰结构已整合进水稻基因组中;应用染色体末端限制性片段分析法,显示在转基因水稻中端粒DNA序列长度有逐代缩短的趋势,初步证明这些转基因水稻中端粒酶亚基已失活,但是T0和T1代转基因水稻植株的主要农艺性状没有发生明显变化。