葡萄种质离体保存中低温和矿物油覆盖延长继代间隔的效应

以‘巨峰’等14个葡萄品种试管苗为试材,研究不同保存温度和培养基表面覆盖矿物油对其生长的影响。结果表明:低温可有效延长试管苗的继代间隔时间,转入常温培养后恢复生长良好,但不同品种适宜的温度不同。设定存活率降至30%～40%时的保存时间为最长继代时间,‘红斯威特’‘莫丽莎’‘皇家夏天’‘克瑞森无核’葡萄最适低温9℃,可保存850 d以上,部分可至1 060 d;‘巨峰’‘巨玫瑰’‘皇家秋天’‘火焰无核’‘夏黑’‘公主’‘粒粒特’‘赤霞珠’‘美人指’‘魏可’最适低温12～15℃,可保存350～600 d。葡萄试管苗低温保存前需常规培养一段时间(预培养),并根据培养温度及品种决定适宜的预培养时间,一般为7～21 d。接种不带叶片的单芽茎段并立即在培养基表面覆盖6～8 cm厚矿物油能将多个葡萄品种试管苗在常温下的继代间隔时间由150 d延长至420 d,将矿物油倒出,试管苗即可恢复生长。     

水稻胚性愈伤组织继代培养中的生理生化特性

为探明水稻胚性愈伤组织继代培养中的生理生化特性,以水稻湘早籼１３号和超丰早１号的幼穗和胚轴诱导的胚性愈伤组织为材料,研究了继代培养中所建立的胚性愈伤组织无性系过氧化物酶、酸性磷酸酯酶的活性变化及同工酶谱变化。结果表明,不同基因型与不同外植体来源的胚性愈伤组织无性系,继代培养过程中两种酶活性均呈下降趋势,与胚性愈伤组织无性系培养力降低的结果一致,其同工酶谱也发生了一定的变化。     

用于遗传转化的花生植株再生体系研究

以广西花生主栽品种桂花17和桂花22的成熟种子胚小叶为外植体,探讨外植体处理方式、不同激素组合和蔗糖浓度对外植体不定芽诱导、继代、生根培养的影响。结果表明,在MS培养基中预培养0、4d的花生种子的胚小叶利于不定芽的诱导,具有较高的分化率;近叶柄1/3处横切的小叶不定芽分化率较远离叶柄部位的高。适宜小叶不定芽分化的蔗糖浓度为40～50g/L,40、50g/L蔗糖分别利于桂花22、桂花17不定芽的分化。培养基MS＋4.0mg/L 6-BA＋1.0mg/L NAA＋2.0mg/L AgNO3对桂花17不定芽的分化效果较佳,MS＋6.0mg/L 6-BA＋1.0mg/L NAA＋2.0mg/L AgNO3利于桂花22不定芽的分化,两者的不定芽分化率均达100%;继代培养基MS＋1.5mg/L 6-BA＋0.4mg/L NAA有利于促进两个花生品种的不定芽成苗,而最佳生根培养基为1/2 MS＋0.5mg/L 6-BA＋2.0mg/L NAA。已构建的花生植株再生体系,不定芽分化率高,再生植株多,适合进行花生的遗传转化。     

荔枝LcAsr基因的生物信息学分析与载体构建

根据荔枝果皮cDNA微阵列信号分析结果,对荔枝cDNA文库的BA05-H4克隆测序.NCBI(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)ORF分析发现其含有1个完整的开放读码框.编码152个氨基酸残基的多肽,为一全长cDNA序列.Blastx比对分析表明该基因编码的蛋白与其它植物来源的ASR(abscisic acid,stress and ripening indueible)蛋白高度同源,该基因被命名为LcAsr,通过PCR的方法获得其DNA全长序列.生物信息学分析结果表明,LcAsr基因的DNA序列全长为1 177 bp,读码框中间包含1个488 bp的内含子.Protparam预测分析结果表明LcAsr基因编码蛋白的分子式为C756H1130N228O238S1,相对分子质量为17 252.7,等电点pI6.10,富含Glu、His、Lys、Ala.Predict protein预测该蛋白的二级结构主要是α螺旋.有1个酪氨酸激酶磷酸化位点、2个酪蛋白激酶II磷酸盐化位点、3个豆蔻酰化位点等,并具有很高的亲水性,预测该蛋白位于细胞核.构建了植物荧光表达载体pCAMBIA-LcAsr,并通过基因枪转化法转化洋葱表皮细胞进行瞬时表达,对LcASR蛋白进行亚细胞定位,结果表明LcASR蛋白定位于细胞核.     

草地早熟禾耐盐愈伤组织筛选的适宜NaCl浓度和继代次数研究

草地早熟禾(Poa pratensis L.)是禾本科早熟禾属多年生草本植物,是我国北方地区应用最广泛的冷季型草坪草.近年来,由于土壤的盐化问题日益严重,培育耐盐的草地早熟禾品种显得尤为重要.体细胞无性系变异是来源于已经存在的细胞变异和培养过程中诱导的变异[1].变异的诱导与选择为提高植物的耐盐性提供了一条有效的途径.     

脐红猕猴桃组培快繁技术研究

以脐红猕猴桃带腋芽茎段为外植体,研究了不同的植物生长调节剂对外植体初代培养、继代培养、生根培养的影响。结果表明,最佳初代培养基为MS+ZT 1.0mg/L+NAA 0.2mg/L,外植体成活率达83.3%;最佳增殖培养基为MS+6-BA 3.5mg/L+NAA 0.2mg/L,增殖系数达4.54;生根率最高的培养基为1/2MS+IBA 0.6mg/L+IAA 3.0mg/L,培养30天生根率95.2%,平均每株生根4.8条。     

鲤鱼尾鳍细胞的体外培养及其生长状态的研究

采用组织块培养法，对鲤鱼尾鳍组织进行培养，在28℃温度下，用添加20％胎牛血清的M199培养基进行培养，在此过程中，对培养的细胞进行观察及研究，描述了细胞形态及其它相关细胞生物学特征。     

继代培养时间对抗性黑松体胚发生的影响

以继代培养0.5、1.5 a和3.5 a的抗性黑松37^#家系胚性愈伤组织为材料,观察不同培养时间胚性细胞的形态和体胚成熟的过程,并对愈伤组织的增殖率、每克愈伤形成的体胚数量及体胚萌发率和植株成活率进行测定。结果表明：在继代培养过程中,胚性胚柄细胞团（ESM）结构逐渐疏松,胚柄细胞呈现缩短、增粗的现象;培养时间对抗性黑松愈伤组织的增殖、分化、体胚萌发及植株成活率均有显著影响。3种不同培养时间愈伤组织的增殖率分别为200.37%、182.47%和111.63%,每克胚性愈伤组织形成成熟体细胞胚分别为77、31、5个,萌发率分别为84.43%、51.10%、11.13%;植株成活率分别为73.00%、50.00%、6.70%,均呈下降趋势;3种愈伤体胚成熟的时间也存在显著差异,继代培养时间越长,体胚分化成熟过程越慢,愈伤组织形成子叶胚的时间最短为46 d,最长为74 d。因此,抗性黑松胚性愈伤组织在继代培养过程中胚性逐步降低,体胚发生和植株再生能力下降,短期培养的胚性愈伤组织（0.5 a）为抗性黑松体胚发生较为理想的初始材料,且愈伤组织继代培养时间不宜超过1.5 a。     

保存8~33年的苹果试管苗增殖能力与端粒长度分析

为分析苹果试管种质端粒长度与繁殖能力、衰老的关系,探索端粒长度与苹果试管种质离体保存年限的关系,对保存多年的不同继代次数的3个苹果品种试管苗进行了表型、增殖能力以及端粒长度的研究。结果表明:保存了8~33年的‘富士’、保存8~27年的‘金冠’和保存8~25年的‘嘎拉’苹果茎尖试管苗继代增殖能力大部分没有变化,表型未发生明显变化;3个品种不同继代次数30 d苗龄试管苗叶片端粒长度均差异不显著;继代73代苗龄分别为10、30、50和90 d的试管苗叶片端粒长度变化因品种而异,‘富士’‘嘎拉’差异不显著,‘金冠’50 d苗龄的最长,90 d苗龄的最短;继代71代苗龄30 d的‘金冠’试管苗茎段端粒长度显著高于叶片,茎段和愈伤组织、叶片和愈伤组织之间差异不显著,‘嘎拉’表现为愈伤组织>叶片>茎段。苹果试管苗端粒长度变化与其增殖能力、表型及同一继代周期内衰老程度的变化相吻合。     

满天星茎尖试管苗的继代培养基研究

探讨了满天星试管苗继代培养过程中,不同生长调节剂、碳源、水质、活性碳对芽增殖效果的影响.结果表明,NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L的生长调节剂组合下,试管苗增殖效果最好,芽的长势好,增殖倍数达5.0;用40 g/L的市售白糖代替30 g/L的化学纯蔗糖作为培养基的碳源,既可降低配制培养基的成本,又不影响苗的增殖和质量,可用于满天星试管苗的商业化生产;但以自来水代替蒸馏水对试管苗进行继代培养,则不利于苗的生长和增殖;在培养基中加入0.2%的活性碳有利于试管苗株高的增加,但不利于芽的增殖.