矮牵牛细胞的长期离体培养及再生植株的ISSR分析

 【目的】实现矮牵牛细胞的长期离体培养和再生，不但可以获得矮牵牛体细胞突变体，从中选出优良株系，而且可以为研究外源基因在矮牵牛细胞增殖与分化过程中的稳定性提供技术体系。【方法】以重瓣矮牵牛叶片为外植体，使用不同浓度BA与NAA的组合在黑暗条件下诱导愈伤组织。在不同光条件下，将愈伤组织在MS+ BA 2.0 mg•L-1+0.5 mg•L-1 NAA+200 mg•L-1 CH 与 MS+ BA 0.5 mg•L-1+0.5 mg•L-1 NAA+200 mg•L-1 CH两种培养基进行愈伤组织3年多的继代培养，并利用筛选的8个引物对20个再生植株的总DNA进行ISSR分析。【结果】不同的生长素与分裂素配比诱导的愈伤组织状态明显不同，继代后的愈伤组织在低激素培养基上分化出不定芽，再生芽复壮后可得到正常植株。对再生植株的总DNA进行ISSR分析发现，再生植株之间存在很大的遗传变异。【结论】矮牵牛愈伤组织在高BA浓度培养基上可长期继代保存；在低激素培养基上可实现植株再生。长期离体培养矮牵牛是获得其突变体的有效方法。     

菠萝百合组织培养技术研究

以菠萝百合花序上胚珠为外植体,接种于3种诱导培养基中,发现加有少量激素的MS+NAA 0.01mg/L及MS+6-BA 0.01mg/L培养基上的胚珠萌芽率明显高于未加激素的MS培养基。以启动培养获得的叶片及小鳞茎纵切块为外植体,接种到3种继代培养基中,发现两种外植体在3种继代培养基上均能分化出不定芽,MS+6-BA 1mg/L+NAA 1mg/L(S3)为最适初次继代培养基。以S3培养基为基础,设计了6种配方进行第二次继代培养研究,发现MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 1 mg/L(T4培养基)上发育的不定芽数最多、质量最好,可作为最适继代培养基。离体生根研究发现:培养基中添加NAA比IBA生根质量更好,最适生根培养基为MS+NAA 0.1mg/L。至此,建立了菠萝百合组培快繁技术体系。     

茉莉花愈伤组织的诱导及其继代保持

以福州茉莉花茎段或花器官组织为外植体,进行愈伤组织诱导、继代增殖和长期保持等方面的研究。结果表明,在光照条件为1 500~2 000 lx下,能够诱导获得6种类型的愈伤组织,愈伤组织诱导适宜培养基为MS＋BA 2.0 mg·L-1 ＋NAA 0.2 mg·L-1 ＋蔗糖30 g·L-1,诱导率可达100%;同时在MS＋BA 2.0 mg·L-1 ＋NAA 0.2 mg·L-1 ＋蔗糖30 g·L-1培养基中,能长期继代保持茉莉花愈伤组织,并维持旺盛的生长能力。     

朱砂根组织培养防褐化探讨

探讨了朱砂根继代培养中抗氧化剂(维生素C、L-半胱氨酸、硫代硫酸钠)和吸附剂(活性炭、聚乙烯吡咯烷酮)对外植体褐化的影响。结果表明:培养基中添加活性炭3 g.L-1,继代周期控制在30 d之内,平均褐化率可控制在18.89%,效果最理想;培养基中添加维生素C 0.2 g.L-1也能有效控制褐化,但整体效果不如活性炭。     

保存8~33年的苹果试管苗增殖能力与端粒长度分析

为分析苹果试管种质端粒长度与繁殖能力、衰老的关系,探索端粒长度与苹果试管种质离体保存年限的关系,对保存多年的不同继代次数的3个苹果品种试管苗进行了表型、增殖能力以及端粒长度的研究。结果表明:保存了8~33年的‘富士’、保存8~27年的‘金冠’和保存8~25年的‘嘎拉’苹果茎尖试管苗继代增殖能力大部分没有变化,表型未发生明显变化;3个品种不同继代次数30 d苗龄试管苗叶片端粒长度均差异不显著;继代73代苗龄分别为10、30、50和90 d的试管苗叶片端粒长度变化因品种而异,‘富士’‘嘎拉’差异不显著,‘金冠’50 d苗龄的最长,90 d苗龄的最短;继代71代苗龄30 d的‘金冠’试管苗茎段端粒长度显著高于叶片,茎段和愈伤组织、叶片和愈伤组织之间差异不显著,‘嘎拉’表现为愈伤组织>叶片>茎段。苹果试管苗端粒长度变化与其增殖能力、表型及同一继代周期内衰老程度的变化相吻合。     

山薯组培苗继代培养基配方筛选

以山薯组培苗带腋芽茎段为外植体,以MS为基本培养基,探讨植物生长调节剂6-BA（0.5、1.0、2.0 mg/L）或TDZ（0.01、0.10、0.50、1.00、2.00、4.00 mg/L）、不同培养方式和活性炭对其继代培养的影响。结果表明,添加不同浓度6-BA对山薯组培苗增殖系数、茎长及腋芽点芽球的影响不明显,而随着TDZ浓度的升高,山薯组培苗增殖系数和茎长逐渐降低而芽球显著增加,茎段腋芽生长受到明显抑制。山薯组培苗较优的继代培养基为MS＋1.0 mg/L 6-BA＋0.1 mg/LNAA＋30 g/L蔗糖＋1.5 g/L活性炭的液体培养基。液体培养基利于促进山薯组培苗增殖,其增殖系数、茎长、植株鲜重和干重显著高于固体培养基。活性炭的添加可以减少褐化,促进组培苗的增殖培养。此外,培养方式与活性炭交互作用对组培苗茎长、增殖系数、植株鲜重及干重无显著影响。     

继代培养对燕山红栗组培微枝不定根生根生理的影响(英文)

随着继代培养次数的增加,燕山红栗(Castanea mollissimac v.'yanshanhong')组培微枝的生根能力提高。本实验通过测定内源激素水平和酶活性来研究继代培养燕山红栗对不定根生根的作用。对继代2、4、6、8次的微枝诱导生根,通过高效液相色谱法测定内源生长素(IAA)、脱落酸(ABA)、细胞分裂素(CTK)和赤霉素(GA);用紫外分光光度法测定生长素氧化酶(IAAO)、过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)。微枝的生理特征和继代次数或者生根能力的关系的如下:通过继代培养,内源IAA的含量逐渐上升;ABA、CTK和GA3的含量略有下降。IAA含量和继代次数与生根率高度有正相关;在连续继代过程中,IAA/ABA和IAA/CTK含量比率都剧烈上升,并且与生根率高度相关;IAAO和POD活性与继代次数显著负相关,而PPO活性随着继代次数的增加而提高。图3表1参34。     

北美红杉组织培养技术研究

通过不同激素对北美红杉离体繁殖影响的实验,建立了相应的组培技术体系。研究结果表明,北美红杉茎段外植体经消毒后接种在MS+IBA 0.1 mg/L+KT 1.0 mg/L上诱导,出芽率最高;北美红杉继代增殖随着继代次数的增加,逐步降低细胞分裂素6-BA的浓度,而获得健壮的植株;生根培养以1/4MS+NAA 1.5 mg/L+IBA 2.5 mg/L培养基效果最好,生根率为74%,且枯顶率和萌蘖率也较低。     

甘蔗组培苗继代增殖的浅层培养

甘蔗组织培养技术的应用为甘蔗品种的快速繁殖和良种推广提供了有效的手段,而浅层培养作为植物组培技术的一种,可为完善甘蔗组培苗增殖培养提供不同的解决途径,在不降低增殖效果的前提下,降低培养基的使用量,从而降低生产成本。本试验在使用相同配方[MS液体培养基(30 g/L的蔗糖＋1 mg/L 6-BA＋0.1 mg/L NAA)pH 6.0]、不同容量的培养基对甘蔗组培苗进行增殖培养,并观察对比其增殖效果,以确认浅层培养是否具有较好的增殖效果。结果表明：在增殖F2～F5代的培养中,果酱瓶中加入10 mL容量的液体培养基较常用的20 mL容量的液体培养基增殖效果明显。     

外源基因在苹果植株中稳定性研究

以常规离体继代培养的转豇豆胰蛋白酶抑制剂(Cowpea trypsin inhibitor,CpTI)基因苹果(Malus domestica Borkh.)(包括皇家嘎拉、王林、乔纳金和富士等60个株系)组培苗为试材,应用卡那霉素筛选、PCR扩增及RT-PCR扩增对其外源基因的稳定性进行研究.结果表明,在60个常规继...