九株绿僵菌液体振荡培养初步研究

本文对九株绿僵菌液体振荡培养的研究表明，不同氮源和菌株对菌丝生长量和液生孢子产孢量影响显著．某些绿僵菌菌株可以微循环产孢形式直接产生液生分生孢子，但微循环产孢现象发生与否可能与菌株有一定的相关性．     

淡紫拟青霉NH-PL-03菌株的培养特性

跟踪检测了淡紫拟青霉NH PL 03菌株液体培养过程中D(620nm)值、pH值、菌丝干重、产孢量以及基质消耗 (碳、氮)等培养参数,对培养因子进行了相关分析和主成分分析,并对该菌株的培养阶段进行了聚类分析.结果表明:菌丝干重、产孢量、D(620nm)值分别与营养生长、生殖生长、生理特性主成分;基质消耗 (C、N)与产物生成呈显著相关;当λ=2. 582时,可将淡紫拟青霉菌株NH PL 03培养过程分为 4个阶段,第 1阶段为适应期,培养时间为 1 -2d,菌的培养参数变化不大;第 2阶段为生长期,培养时间为 3-5d,菌体开始生长,D(620nm)值上升,pH值下降,菌丝和产孢量增加;第 3阶段为对数期,培养时间为 6-7d,D(620nm)值、pH值上升,菌丝和产孢量急剧增加; 8d后进入稳定期 (第 4阶段 ),D(620nm)值、pH值趋于稳定,菌丝干重和产孢量达到峰值并趋于稳定.     

大豆灰斑病产孢动态的定量研究

通过生长箱内人工接种试验和定点取样调查两个途径，分别研究了温度、保湿时间、斑龄及温、湿度综合作用对大豆灰斑病叶斑产孢的影响。结果表明，温度、湿度及其互作对病斑产孢均有显著影响，病斑日龄也是影响其产孢的重要因素。单个病斑的传染期一般为１９－２０天，以显症后第十一天产孢最多，供试三个品种规律一致。     

金龟子绿僵菌菌株培养基的改良

采用液体振荡与固体平板双培养的方法,对金龟子绿僵菌MA4,MAIml两菌株的培养基进行改良.研究结果表明:MA4,MAIml菌株的最适复合碳源均为玉米粉、最适氮源为蛋白胨、最适碳氮比为4:1(m:m,下同)、碳浓度分别为0.5,1.0mol/L,即改PPDA培养基为:MA4菌株以11.8g/L的玉米粉代替蔗糖,17.1g/L的酵母浸膏代替蛋白胨;而MAlml菌株的则以23.6g/L的玉米粉代替蔗糖,蛋白胨由10.0g/L更换为16.2g/L.     

花生网斑病原菌孢子差异及其致病力分析

花生网斑病（peanut web blotch）,由花生亚隔孢壳菌（Didymella arachidicola）引起,病原菌又称花生茎点霉（Phoma arachidicola）或派伦霉（Peyronella arachidicola）,在我国南北的各大花生产区均有发生,已成为生产上严重的叶部病害。为筛选产孢效率高、致病力强的菌株,研究病原菌进化机制和环境适应性,从来自不同地区的花生网斑病叶片样本中分离病原菌菌株,研究分生孢子及致病力差异。结果表明,18个菌株中YY187的产孢时间最短,22℃黑暗条件下燕麦琼脂培养基培养7 d即可产孢;菌株YY187和NY206产生的分生孢子器数量显著多于其它菌株;采用孢子悬浮液接种花生叶片,供试所有菌株均可造成叶片发病,其中菌株LY128和YY187在供试18个菌株中致病力相对较强。因此,综合评价产孢效率更高、致病力更强的本地菌株YY187适合作为花生抗网斑病研究的材料。     

银杏内生小孢子链格孢的分离与鉴定

【目的】对银杏内生小孢子链格孢进行分类鉴定,探索鉴别内生小孢子链格孢的有效方法。【方法】采用组织分离法分离银杏叶片中的小孢子链格孢,分别用产孢表型鉴定法和OPA2-1核苷酸序列分析法对分离的小孢子链格孢进行初步鉴定。【结果】从银杏叶片中分离到55株内生小孢子链格孢,老叶中内生小孢子链格孢的分离几率(7.8%)明显比新叶(4.3%)高,是新叶的1.8倍。根据产孢表型可将55个分离物归为5个类群;通过OPA2-1核苷酸序列及系统发育分析,将银杏内生小孢子链格孢分为2个聚类组,其中分离物N02-4和XL-7聚在一个独立的分支上,而其余9个分离物与细链格孢(A.alternaria)、细极链格孢(A.tenuissima)、粗柠檬链格孢(A.limoniasperae)聚为一类,未能反映遗传上的差异。分离物N02-4的产孢表型与其他分离物不同,且其OPA2-1核苷酸序列与其他分离物有3个碱基的差异;分离物XL-7的产孢表型与细极链格孢(A.tenuissima)一致,但在核苷酸序列上存在3个碱基的差异。【结论】仅根据产孢表型对银杏内生小孢子链格孢进行归类,信息有限,结果不准确,需结合分子生物学手段才能进行准确归类。     

堆型艾美耳球虫与柔嫩艾美耳球虫卵囊最短孢子发育时间的测定

将收集到的新排出的堆型艾美耳球虫(E.acervulina)与柔嫩艾美耳球虫(E．tenella)卵囊于29℃静态系统中孢化。以30min为间隔，对卵囊孢子发育的4个阶段在显微镜下进行观察。以1h为间隔，用发育中的卵囊连续接种无球虫鸡，以确定最短孢子发育时间(MST)。对影响孢子发育的外部因素进行了初步探讨。用堆型艾美耳球虫比较不同卵囊浓度，不同悬液深度在卵囊孢化过程中第20h时子孢子形成的卵囊百分率。E.acervulina与E.tenella的MST分别为11b与18b。卵囊浓度和悬液深度与孢子发育时间呈明显反比关系。     

臭椿炭疽病菌盘长孢刺盘孢(Colletotrichum gloeosporioides Penz.)生物学特性研究

本研究测定了不同培养基、碳源、氮源、温度、pH条件下臭椿盘长孢刺盘孢(Colletotrichum gloeosporioides Penz.)菌株SQD-107的生长、产孢和孢子萌发情况.该菌株在PSA培养基上生长最快、产孢最多;在供测碳源中病原菌对蔗糖、葡萄糖利用较好,供测氮源中对硝酸铵、氯化铵利用较好.菌丝生长的适宜温度范围为10-35℃,最适25℃;产生分生孢子的适宜温度范围为10～30℃,最适25～30℃;孢子萌发的适宜温度范围为5～35℃,最适25℃.在pH3～10的范围内该菌均能生长和产孢,菌丝生长最适pH7～8;产生分生孢子最适pH为7.孢子萌发最适pH 6～8.孢子的致死温度为60℃,持续时间10 min.     

食线虫性真菌Duddingtonia flagrans F088的生长和产孢特性

【目的】研究食线虫性真菌Duddingtonia flagrans生长特性和不同营养要素对产孢量的影响,为其规模化发酵工艺的确定提供参考。【方法】以D.flagrans F088分离株为研究对象,研究该菌培养过程中pH值、厚垣孢子产量、菌丝干质量等指标的变化;通过单因素试验及正交试验,研究几种常见碳源、氮源、无机盐、维生素和碳氮比对厚垣孢子产量和菌丝平均生长速率的影响。【结果】供试真菌在培养2 d后进入对数生长期,4 d时达到高峰(OD_(600)值为7.46,菌丝干质量为12.07 g/L),而pH快速下降至4.45;3 d开始产生厚垣孢子,4 d时呈爆发式增长。OD_(600)与菌丝干质量、厚垣孢子产量呈极显著正相关,与pH呈极显著负相关。单因素试验结果表明,产生厚垣孢子的最佳碳源为白糖,氮源为大豆蛋白胨,碳氮比为40∶1,维生素为V_(B_1)、无机盐为MgSO_4;菌丝生长较好的碳源为红糖,氮源为大豆蛋白胨,与对照相比,无机盐和维生素对菌丝生长无显著促进作用。4因素3水平正交试验结果显示,D.flagrans F088产生厚垣孢子和菌丝生长的最佳配方组合为:30 g/L白糖、4 g/L大豆蛋白胨、1 g/L MgSO_4和30 mg/L V_(B_1)。【结论】初步明确了D.flagrans F088培养过程中pH、厚垣孢子产量、菌丝干质量等的变化趋势,确定了该菌菌丝平均生长速率和厚垣孢子产量达到最佳时的营养要素和配方组成。     

金丝桃素抗鸡球虫效果观察

为探明金丝桃素是否具有抗鸡球虫的作用,特进行了金丝桃素体外抗球虫孢子化试验及体内抗球虫试验.体外抗球虫孢子化试验结果表明,金丝桃素浓度达到0.03％即有明显的抑制球虫孢子化的作用;体内抗球虫试验也表明金丝桃素具有抗鸡球虫的活性,服用金丝桃素6、8、10、12 mg/只,其抗球虫指数分别为66.1、100.3、126.0、131.3.研究结果为拓展药物资源应用的新领域、研发抗球虫新药提供了良好基础.