拟无枝酸菌宿主构建及次级代谢基因簇异源表达

为将生长快、发酵时间短、遗传操作便捷的稀有放线菌拟无枝酸菌TNS106开发成异源表达宿主,通过同源重组将内源的瑞斯托霉素生物合成关键基因rpsA替换为ΦC31和ΦBT1噬菌体细菌附着位点attB,清除代谢背景并引入整合位点,得到菌株HXR1;将含有来自天蓝色链霉菌的放线紫红素基因簇或来自刺糖多孢菌的多杀菌素基因簇的质粒转到HXR1进行异源表达,检测发酵产物。结果显示,HXR1成功表达放线紫红素和多杀菌素;与红色糖多孢菌宿主LJ161相比,放线紫红素的产生提前1 d,产量提高1.3倍。拟无枝酸菌异源表达宿主HXR1可为从链霉菌和稀有放线菌中发现新的次级代谢产物提供有用的平台。     

磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶基因过量表达对集胞藻PCC6803脂肪酸合成的影响

磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶（phosphopantetheinyl transferases,PPTase）是细菌脂肪酸合成中的关键酶。本研究利用同源重组手段构建集胞藻PPTase基因（slr0495）过量表达重组质粒,在集胞藻PCC6803中进行表达研究,并在DNA和RNA水平进行验证,利用气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）检测不同条件下突变藻株脂肪酸组分及含量。结果表明：在温度为30 ℃、光照强度为50 μmol ·m^-2 · s^-1培养条件下,过量表达slr0495基因突变藻株中C12:0、C16:0和C18:0的含量分别为1. 31 mg · g^-1、8.07 mg · g^-1和1.35 mg · g^-1,比野生型藻株分别提高了23.58%、25.31%和13.45%;在温度为20 ℃、50% NaNO₃浓度、光照强度为50 μmol · m^-2 · s^-1培养条件下,与野生型相比,突变藻株中C16:0和C18:0含量分别提高了44.71%和41.51%。以上结果表明,过表达slr0495基因增加了集胞藻PCC6803中长链饱和脂肪酸的含量,并且在低温（20 ℃）和缺氮（50% NaNO₃）双重胁迫培养条件下中长链饱和脂肪酸含量得到进一步提高。本研究为探究slr0495基因功能以及在逆境中基因产生的应激反应提供了理论依据,为微藻高产多不饱和脂肪酸代谢研究奠定了基础。     

呕吐毒素降解菌A4的分离及降解特性研究

为了给呕吐毒素（DON）污染的谷物和饲料脱毒提供菌株资源,本研究从赤霉病污染区域的小麦田采集土壤样品,通过富集培养,分离筛选到一株DON降解菌,通过形态、16S rDNA、gyrB基因序列对降解菌进行菌种鉴定,液相色谱串联质谱和核磁共振鉴定降解产物,明确其降解途径和解毒机制,通过菌株生长特性、降解特性和基因组间差异分析比较DON降解菌A4、A8和A16之间的差异。结果表明：分离筛选获得DON降解菌A4,该菌能在10 h内降解9.7 μg·mLP＞-1P＞ DON,降解率高达97%。经鉴定,A4为德沃斯氏菌（Devosia sp.）。A4通过降解DON为3-keto-DON进行脱毒。A4的最适生长温度为35℃,最适NaCl浓度为2%,其耐热性和耐盐性优于菌株A8和A16。A4的最适降解温度为35℃、最适降解pH为8.0,其降解速率高于菌株A8和A16。通过平均核苷酸相似度（ANI）分析,A4与A8和A16之间的ANI分别为81.54%和77.87%,均低于95%,因此属于不同种的菌株。研究表明,筛选得到的新型DON脱毒菌株A4具有良好的抗逆性,为DON的污染控制提供了新的降解菌资源。     

耐辐射丝状真菌F161的分离鉴定及其对锶的吸附特性

【目的】鉴定分离自新疆某辐射污染区的丝状真菌F161,研究其吸附锶特性。【方法】采用形态学观察、分子生物学鉴定及碳源利用实验鉴定菌种;采用压力试验和吸附试验研究特性,对锶的吸附测定采用ICP-MS,对放射性90锶的吸附的测定采用液闪检测仪。【结果】菌株F161鉴定为青霉属真菌;菌株F161能够耐受10 KGy剂量的钴源照射,对重金属离子Cr³⁺、Zn²⁺、Co²⁺、Pb²⁺、Hg²⁺均有较高耐受性。在pH 7.0,28℃下,伴随生长3~4 d,F161对Sr²⁺吸附效率最高能达到36.67%,对放射性90锶的吸附率为49.45%。【结论】F161是1株对放射性核素污染具有修复能力的土著丝状真菌,在有较高的重金属离子混合污染的放射性环境中具有一定的修复应用潜力。     

四个观赏海棠品种光合特性比较研究

为比较引种观赏海棠品种间光合特性,以海棠粉芽、红宝石、凯尔斯和绚丽为试材,测定了净光合速率(P_n)、胞间CO₂浓度(C_i)、气孔导度(G_s)、蒸腾速率(T_r)等光合生理指标和光响应曲线。结果表明:凯尔斯净光合速率的日变化呈单峰型,但粉芽、红宝石和绚丽的净光合速率的日变化呈双峰型。胞间CO₂浓度日变化均呈V型曲线变化,均为早、晚高,中午低;气孔导度日变化曲线为单峰型和双峰型;蒸腾速率日变化曲线均为单峰型,出现峰值时间为10:00—14:00;水分利用效率日变化曲线呈多种类型,均表现为上午高、下午低;凯尔斯的最大净光合速率、光饱和点和表观量子效率最高,绚丽光补偿点最低,红宝石暗呼吸速率最低;4个观赏海棠品种净光合速率平均值为:凯尔斯(8.33 μmol·m^-2·s^-1)>绚丽(7.71 μmol·m^-2·s^-1)>粉芽(7.29 μmol·m^-2·s^-1)>红宝石(5.57 μmol·m^-2·s^-1)。综上,凯尔斯光合能力最强,且对光照要求低,可广泛栽植;红宝石光合能力最弱,且对光环境适应性较窄,可作为盆栽海棠新品种;粉芽表现为喜光型,应栽植在光照充足的地区;绚丽具有较强的弱光利用能力,可与其他树种混栽,栽植在光照较弱的地区。     

日粮中裂殖壶藻渣对多鳞白甲鱼生长、脂代谢及健康的影响

本研究旨在探究裂殖壶藻渣作为饲料原料对土著鱼类多鳞白甲鱼的生长性能、脂质代谢及健康状况的影响。在五种等氮等脂饲料中分别添加0g/kg(DS0)、30g/kg(DS3)、60g/kg(DS6)、90g/kg(DS9)和120g/kg(DS12)的裂殖壶藻渣,饲喂养殖于室内循环水系统的180尾多鳞白甲鱼（9.00g±0.25g/尾,12尾/缸）56天。结果显示：（1）增重率(WG)、特定生长率(SGR)及饲料系数(FCR)在各组间无显著差异(P>0.05);（2）DS9组和DS12组的肥满度(CF)、肝体比(HSI)、腹脂指数(IFI)、肝脏和腹脂甘油三脂(TG)含量均显著低于对照组(P<0.05);（3）DS6、DS9和DS12组肌肉中DHA含量、∑n-3 LC PUFA（N-3长链多不饱和脂肪酸）含量、n-3/n-6 PUFA比例、胆固醇血症指数(h/H)和血脂质量指数(FLQ)显著高于对照组,而动脉粥样硬化指数(AI)和血栓形成指数(TI)均显著低于对照组(P<0.05);（4）所有处理组肝脏的脂肪酸合成酶(FAS)和乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)的mRNA表达水平显著低于对照组(P<0.05);DS6、DS9和DS12组腹腔脂肪组织的乙酰辅酶A羧化酶2(ACC2)和甘油三酯水解酶(ATGL)的mRNA表达水平显著高于对照组(P<0.05)。（5）所有处理组血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性显著高于对照组,丙二醛(MDA)含量显著低于对照组(P<0.05)。研究表明,在日粮中添加90g/ kg的裂殖壶藻渣可能通过影响脂代谢相关基因的表达显著降低多鳞白甲鱼腹腔脂肪和肝脏脂肪蓄积,并提升其肌肉营养价值,增强机体抗氧化能力。     

Active metabolism in larval and juvenile fish: ontogenetic changes,effect of water temperature and fasting

Oxygen consumption, ammonia excretion and fish swimming speed were measured in fish induced to swim by optomotor reaction in a circular metabolism chamber. The relationship between the swimming speed and fish metabolism described by exponential equations allowed the extrapolation to the standard metabolism, i.e. at zero swimming speed. The partitioning of the catabolised protein in the energy supply was estimated based on AQ (volume of ammonia/ volume of oxygen) values. Weight specific standard metabolism, as expressed by the ammonia excretion rate, decreased by one order of magnitude in coregonids as the fish grew from 20 to 780 mg body weight. The slope of the relationship between oxygen uptake and swimming speed decreased in coregonid ontogenesis. In salmon, after 12 days of fasting 28% of energy used was derived from protein, whilst coregonid juveniles utilized mostly lipid. Active swimming in fasted juveniles of coregonid, as well as in salmon, led to the accelerated utilization of protein as a source of energy, based on AQ coefficients. In juveniles acclimated to a range of water temperatures from 14 to 26°C, the changes in standard or active metabolic rate (expressed as oxygen uptake or ammonia excretion) were described by Q₁₀ coefficients. They were generally higher for the ammonia excretion rate than for the oxygen uptake rate and for active metabolism than for standard metabolism. Utilization of protein as energy for swimming differed significantly between the species, being in general one order of magnitude higher in coregonids than in salmon. The use of protein for swimming activity tended to decrease during coregonid ontogenesis.     

青蟹的营养需求研究及其配合饲料研制

青蟹属（Scylla）有锯缘青蟹（Scylla serrata），拟穴青蟹（S．paramamosain），紫螯青蟹（S．tranquebarica）和榄绿青蟹（S．olivacea）等4个种。我国以拟穴青蟹占绝对优势，它有个体大、生长快、适应性强、肉味鲜美、营养丰富等特点，已成为具有重要经济价值的海水养殖蟹类之一。     

粘帚霉对几种水生生物有害菌的抑制作用测定

采用对峙培养法测定了粘帚霉16株菌株对嗜水气单胞菌、耶耳森菌、鳗弧菌、褐藻酸降解菌-MA10和褐藻酸降解菌-MB16的作用。试验结果表明,粘帚霉中NCH-3-1、YJS-3-2、GJ-1-1、SS-1-1、SHW-2-1、SHW-1-1、BD-2-2 7株菌株对供试的5种有害菌表现出较强的抑制作用。     

罗非鱼鱼种肠炎病的病理组织学及病原体的研究

本文从病理组织学的角度,研究了罗非鱼鱼种肠炎病的发生与发展,为其诊断与防治奠定了理论基础。结果表明,该病病原体为产气单胞菌。