1株解淀粉芽孢杆菌B7快速液态发酵优化工艺研究

本试验以1株饲用益生菌解淀粉芽孢杆菌B7（Bacillus amyloliquefaciens B7，B.amyloliquefaciens B7）为研究对象，为了增强其在液态条件下的发酵水平，提高其芽孢发酵工艺优化效率，拟采用测定芽孢吡啶二羧酸（dipicolonic acid，DPA）浓度的方法来代替传统的平板芽孢计数法，以探讨此测定方法在芽孢发酵优化工艺中的可行性。首先，通过单因素试验筛选出对菌株产孢有显著促进作用的因子，进一步通过正交优化试验确定蛋白胨、玉米粉、大米蛋白粉和Mn²⁺组合的最优水平。结果表明，发酵液中的芽孢浓度与测定的DPA荧光强度呈线性相关，在蛋白胨20 g/L、玉米粉10 g/L、大米蛋白粉20 g/L、Mn²⁺1.0 mmol/L时发酵48 h，检测到DPA荧光强度达到最大，其相应的芽孢浓度达到7.0×10⁹ CFU/mL。与实验室常用的LB培养基相比，芽孢浓度提高了3.3倍；与工业生产用培养基相比，芽孢浓度提高了2.2倍。本研究为芽孢杆菌发酵过程中芽孢浓度测定提供了一种快速方法，为工业菌株B.amyloliquefaciens B7的发酵提供了一种成分简单且高产芽孢的培养基。     

斑茅纤维降解生产燃料酒精的发酵工艺研究

以能源植物斑茅纤维为原料,探讨纤维素糖化液生产燃料酒精的发酵工艺研究,分析了时间、温度、pH、氮源种类、酵母膏用量与酵母用量等因素对斑茅纤维素酒精发酵的影响。结果表明:反应时间72~96h,温度35℃,pH4.8~5.2,酵母膏氮源用量0.8%~1.0%,酵母用量10%~15%时斑茅纤维糖化液的酒精发酵效果最好。通过正交试验确定了最佳发酵条件:时间84h、温度35℃、酵母膏用量1.2%、酵母用量20%,发酵验证酒精值达4.6%(V/V),酒精得率32.62%。     

一株Fusarium oxysporum f. sp. niveum拮抗菌的筛选、鉴定及其抑菌特性

为筛选西瓜枯萎病拮抗菌株并探究其抑菌特性,以齐齐哈尔市青昕蔬菜基地根际土为材料,采用平板对峙法筛选到1株能高效抑制西瓜专化型尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum f.sp. niveum,Fon)的拮抗菌株,通过形态特征、16S rDNA、gyrA和gyrB序列分析鉴定其菌种;通过盆栽试验验证拮抗菌株对西瓜枯萎病的抑制作用;采用生长速率法研究拮抗菌株不同生长时期的无菌发酵滤液及其不同贮存条件下的抑菌能力;利用扫描电子显微镜(SEM)和共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)观察并分析无菌发酵滤液对Fon孢子形态和膜完整性的影响。结果表明,拮抗菌株WD为Bacillus amyloliquefaciens,能有效抑制西瓜枯萎病的发生,抑制率达到57.57%,其无菌发酵滤液在衰亡期有较高的抑菌能力,对Fon菌丝生长抑制率为54.32%;无菌发酵滤液对温度、pH具有较高的耐受性,30 ℃、pH 7时抑菌活性最强,抑菌率可达58.36%;在4 ℃贮存至少45 d,且紫外光照120 min内对其抑菌活性没有影响;Fon孢子暴露在WD无菌发酵滤液下,孢子表面皱缩凹陷,膜完整性被破坏。综上所述,Bacillus amyloliquefaciens WD是1株高效的拮抗菌株,为西瓜枯萎病生防菌剂的研发与利用奠定了基础。     

豆粕酶解发酵物对仔猪生长性能、血清指标及肠道菌群结构的影响

本试验旨在研究豆粕酶解发酵物对仔猪生长性能、血清指标及肠道菌群结构的影响。选用144头49日龄健康的"杜×长×大"三元杂交育肥仔猪,随机分为3组,每组6个重复,每个重复8头猪(公母各占1/2)。阴性对照组饲喂无抗生素添加的基础饲粮,抗生素对照组饲喂基础饲粮+60 g/t吉他霉素,试验组饲喂试验饲粮(基础饲粮中10%豆粕被豆粕酶解发酵物替代)。试验期为42 d。结果表明:1)试验组仔猪的末重、平均日增重、平均日采食量分别比阴性对照组高5.06%、10.07%、5.03%(P0.05),腹泻率比阴性对照组低39.59%(P0.05),与抗生素对照组相比各指标差异均不显著(P0.05)。2)试验组仔猪血清碱性磷酸酶和谷丙转氨酶活性、总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性均显著高于阴性对照组(P0.05),丙二醛(MDA)含量显著低于阴性对照组(P0.05);试验组和抗生素对照组仔猪血清指标差异不显著(P0.05)。3)试验组仔猪盲肠、大肠中乳酸杆菌数量显著高于阴性对照组和抗生素对照组(P0.05),十二指肠中总细菌数显著低于阴性对照组和抗生素对照组(P0.05)。综上,豆粕酶解发酵物能提高仔猪生长性能,增强机体抗氧化能力,利于乳酸杆菌在肠道内形成优势菌群,降低腹泻率,生长性能达到使用抗生素水平。     

Effects of Adding Mannan Oligosaccharides to Diets with Different Concentrate to Forage Ratios on Ruminal Fermentation of Sheep in vitro

The test was aimed at determining the effects of adding MOS to diets with different concentrate to forage ratios on ruminal fermentation of sheep in vitro.The 4×6 two-factor experimental design was chosen.There were 4 diets with different concentrate to forage ratios(20:80, 30:70, 40:60 and 50:50) and added to 6 dosages MOS(0, 0.4%, 0.8%, 1.2%, 1.6% and 2.0%), respectively.The method of gas production in vitro was used to measure the total gas and CH₄ production, IVDMD, IVCPD and IVOMD after cultured for 3, 6, 9, 12 and 24 h.The results showed that the gas(except 12 and 24 h) and CH₄ production(except 9 h) were not impacted by the two factors(P>0.05).The IVDMD, IVCPD and IVOMD were significantly affected by concentrate to forage ratios(P<0.05), while the IVCPD at 24 h was significantly affected by MOS(P<0.05).Meanwhile, all the indexes were not influenced by the interaction of two factors(P>0.05).The IVDMD and IVOMD increased with the rising of concentrate approximately, while the IVCPD decreased with the rising of MOS roughly.The biggest associative effect was gained in 30:70 concentrate to forage diet when adding 1.2% MOS.     

Influence of Aguamiel (Agave atrovirens) as a Natural Feed Additive on Cecal Fermentation Kinetics of Some Forage Species in Horse Feeding

This study aimed to evaluate the effect of different dose levels of aguamiel (Agave atrovirens) on in vitro cecal gas, methane (CH₄), and carbon dioxide (CO₂) productions of five forage species (Avena sativa [hay]), Moringa oleifera, Caesalpinia coriacea, Salix babylonica, and Eichhornia crassipes using inocula from the horse. The forage samples were incubated with three doses of aguamiel: 0, 34, and 68 μg of aguamiel/g dry matter (DM) of substrate. Cecal inocula were collected from four adult female Criolla horses (3–4 years of age and weighing 300 ± 15.0 kg) grazed on native grasses for about 8 hours without supplementation. Forage type affected (P < .001) cecal asymptotic, rate and lag time of gas, CH₄ and CO₂ productions (mL/g DM), pH and DM degradability. Aguamiel dose had linear and quadratic effects (P < .05) on the asymptotic and rate of CH₄ productions and rate and lag time of CO₂ productions (mL/g DM). Forage type × aguamiel dose interactions were significant (P < .05) for asymptotic, rate and lag time of gas, and CH₄ and CO₂ productions (mL/g DM). Forage species effects were pronounced (P < .05) on CH₄ and CO₂ productions (mL/g incubated and degraded DM) and proportional CH₄ production at all hours of incubation, except for CO₂ production (mL/g incubated DM). Aguamiel dose affected (P < .05) CO₂ production (mL/g incubated DM) and proportional CO₂ production at the incubated hours. Forage type × aguamiel dose interactions were observed (P < .05) for CO₂ production (mL/g incubated DM) and proportional CO₂ production at the incubated hours but had no impact on CH₄ production. It is concluded that addition of aguamiel to five forage species affected fermentation kinetics of gas production resulting in different in vitro cecal gas, CH₄ and CO₂ productions from these substrates.     

固态发酵醋糟饲料对育肥猪生长性能、养分表观消化率、血清指标及粪便中挥发性脂肪酸含量的影响

本试验旨在研究固态发酵醋糟饲料(SFVD)对育肥猪生长性能、养分表观消化率、血清指标及粪便中挥发性脂肪酸(VFA)含量的影响。选择体况相近[(59.04±0.33)kg]的健康“杜×长×大”三元杂交生长育肥猪60头,随机分为2个组,每组3个重复,每个重复10头猪。对照组饲喂基础饲粮+150 mg/kg土霉素钙,试验组饲喂基础饲粮+5%的SFVD。预试期6 d,正试期35 d。结果表明:与对照组相比,基础饲粮中添加5%的SFVD对育肥猪平均日采食量(ADFI)具有一定的促进趋势(P=0.056);显著降低了育肥猪饲粮中干物质(DM)、粗蛋白质(CP)、有机物(OM)和总能(GE)的表观消化率(P<0.05),对粗脂肪(EE)表观消化率有一定的促进趋势(P=0.052);显著提高了育肥猪血清谷草转氨酶(AST)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性(P<0.05),血清高密度脂蛋白(HDL)和免疫球蛋白A(IgA)含量也呈现出一定的升高趋势(P=0.055和P=0.077);显著提高了育肥猪粪便中丙酸含量(P<0.05),粪便中甲酸和总挥发性脂肪酸(TVFA)含量也呈现出一定的升高趋势(P=0.071和P=0.054)。由此可见,基础饲粮中添加5%的SFVD对育肥猪生长性能、肠道健康及免疫性能的提高具有潜在的促进作用。     

脂肪酸组合对体外瘤胃微生物发酵挥发性脂肪酸的影响

为研究长链脂肪酸组合对体外培养瘤胃微生物发酵挥发性脂肪酸（VFA）的影响，并得出最优脂肪酸组合及添加水平，试验选取硬脂酸、油酸、亚油酸及α-亚麻酸4种脂肪酸因子，设置0.5%、1.0%、1.5%等3个水平进行L₉（3⁴）正交试验，其中Ⅰ~Ⅸ组为试验组、Ⅹ组为对照组，各处理均设3个重复。以3头瘤胃瘘管山羊为瘤胃液供体进行体外发酵试验，测定各组培养液VFA 24 h内的动态变化。结果显示，各组的总挥发性脂肪酸（TVFA）浓度总体上呈先上升后下降再上升的波动变化趋势。其中在6 h时Ⅶ组TVFA浓度最高。乙酸/丙酸比值总体呈下降趋势，6 h前下降较快，6 h后趋于平缓。丁酸摩尔百分比在7.97%~15.41%间变动。主成分与最优组合分析表明，TVFA浓度影响的主次顺序为亚油酸、油酸、硬脂酸、α-亚麻酸；以添加1.5%硬脂酸、0.5%油酸、1.5%亚油酸、0.5%α-亚麻酸时组合效应最好。     

日粮不同CP及RUP水平对奶牛瘤胃发酵的影响

试验旨在研究不同水平的粗蛋白（CP）及瘤胃非降解蛋白（RUP）的日粮对奶牛瘤胃代谢的影响。试验选择18头健康、体重相近的荷斯坦奶牛作为试验动物,随机分为6组,每组3头。采用2×3因子完全随机试验设计,其中CP设7.5%（低）、9.0%（中）、10.5%（高）3个水平,RUP设45%CP（低）、55%CP（高）2个水平,共6个处理组,饲喂相同基础日粮,精粗比为3∶7,预饲期10d,饲喂后2、4、8、12、24h从食道采集瘤胃液2d,测定瘤胃液pH值,NH3-N、微生物蛋白质（BCP）、挥发性脂肪酸（VFA）含量。结果表明,日粮CP水平对瘤胃液NH3-N浓度的影响极显著（P〈0.01）,对BCP及VFA的含量影响较小,总体而言,9.0%CP水平组对奶牛的瘤胃发酵略好于其他两组;日粮中高RUP（55%CP）可以显著降低瘤胃pH值且有降低NH3-N浓度的趋势,同时,对瘤胃BCP及VFA的合成有一定的促进作用。该试验条件下,日粮中CP（9.0%）和RUP（55%CP）可在一定程度上改善瘤胃代谢。     

体外发酵法评定不同茬次和生长年限苜蓿的营养价值

本试验采用瘤胃体外发酵技术比较研究了不同茬次和生长年限紫花苜蓿的营养价值及体外发酵特性。试验以3头装有永久性瘤胃瘘管的荷斯坦奶牛为瘤胃液供体,称量1 g苜蓿样品于含有10 mL瘤胃液和90 mL培养基的发酵瓶内,39℃体外发酵96 h,分别于24、48、72及96 h冰浴终止发酵,采样。结果显示:茬次、生长年限对苜蓿体外发酵产气量、氨态氮(NH3-N)和菌体蛋白(MCP)浓度均有显著影响(P0.05),茬次对苜蓿体外发酵营养物质降解率有显著影响(P0.05),且茬次与生长在苜蓿体外发酵产气量、营养物质降解率上均存在交互作用(P0.05)。发酵结束后,苜蓿的产气量,营养物质降解率及挥发性脂肪酸(VFA)、NH3-N和MCP浓度在第3茬最高。产气量、营养物质降解率、NH3-N浓度在1和4年龄较高,3年龄较低。综上,以1年龄第3茬和4年龄第3茬苜蓿营养价值较高,3年龄第2茬较低。