New furostanol saponins from Smilax aspera L. and their in vitro cytotoxicity

The occurrence of the two new cis-fused A/B rings furostanol saponins (25S)-26-O-β-d-glucopyranosyl-5β-furostan-1β,3β,22α,26-tetraol-1-O-β-d-glucopyranoside and (25S)-26-O-β-d-glucopyranosyl-5β-furostan-1β,2β,3β,5β,22α,26-hexaol and the known compounds (25S)-26-O-β-d-glucopyranosyl-5β-furostan-3β,22α,26-triol-3-O-α-l-rhamnopyranosyl-(1→2)-O-β-d-glucopyranosyl-(1→2)-O-β-d-glucopyranoside and (25S)-26-O-β-d-glucopyranosyl-5β-furostan-3β,22α,26-triol-3-O-β-d-glucopyranosyl-(1→2)-O-β-d-glucopyranoside, trans-resveratrol, (+) catechin and (−) epicatechin in the rhizomes of Smilax aspera is reported. All saponins have been isolated as their 22-OMe derivatives, which were further subjected to extensive spectroscopic analysis. The isolated furostanol saponins were evaluated for cytotoxic activity against human normal amniotic and human lung carcinoma cell lines using neutral red and MTT assays. In vitro experiments showed significant cytotoxicity in a dose dependent manner with IC₅₀ values in the range of 32.98-94.53 µM.     

苦瓜总皂甙含量测定及超声提取最佳条件的研究

建立了苦瓜总皂甙的超声提取和分光光度测定方法,并优化了超声提取的提取温度、乙醇浓度、料液比和提取时间等因素。结果显示,超声波提取法最佳工艺组合为:70%乙醇,液料比为30∶1,振荡频率为60%,70℃超声提取30 m in/次,重复提取2次;且分光光度测定法操作简便、快速、准确,可作为苦瓜制品提取及质量评价方法。     

苜蓿生物活性物质在动物上的应用

苜蓿中含有许多生物活性物质,能够显著影响动物的生长性能、繁殖机能和免疫功能,有些活性物质还可以作为人的保健品使用。本文主要介绍苜蓿皂苷、苜蓿多糖、苜蓿黄酮的生物学功能以及国内外学者对苜蓿中活性成分研究的最新成果。苜蓿中活性物质可以作为动物的饲料添加剂使用,一定剂量的苜蓿活性物质可以提高动物体内的淋巴细胞水平,增加免疫力;提高谷胱甘肽过氧化物酶的活性,抑制丙二醛的水平,具有抗氧化功能;增加动物的生产性能和繁殖性能。     

紫花苜蓿MsSQE1的克隆及对皂甙合成的功能分析

【目的】鲨烯环氧酶(squalene epoxidases,SQE)是苜蓿皂甙合成途径中的一种限速酶,与苜蓿皂甙的合成密切相关。通过对苜蓿鲨烯环氧酶(MsSQE1)基因的克隆及在苜蓿中过表达,探究鲨烯环氧酶对皂甙合成的作用机制。【方法】以模式植物蒺藜苜蓿鲨烯环氧酶基因序列设计引物,同源克隆苜蓿MsSQE1。对MsSQE1进行生物信息学分析;通过基因枪轰击技术,使MsSQE1在洋葱表皮瞬时表达,进行亚细胞定位。利用qRT-PCR方法分析该基因在根、茎、叶中的表达水平,以及在紫外辐射、ABA和GA3条件下的表达模式。在茉莉酸甲酯(MeJA)的诱导下,分析MsSQE1的转录水平,及对苜蓿皂甙含量的影响。利用根癌农杆菌转化体系,获得过表达MsSQE1的阳性转基因植株,并测定转基因植株的皂甙含量。【结果】克隆了MsSQE1的cDNA序列,开放阅读框1 578 bp,编码525个氨基酸,等电点为8.59。同源性比对分析,其氨基酸序列与蒺藜苜蓿中SQE1氨基酸序列同源性为98.6%,与拟南芥的同源性为80%。亚细胞定位显示,MsSQE1可能定位于细胞膜。组织特异性表达分析显示,MsSQE1在叶中的表...     

人参果皂苷口服液质量标准研究

通过对人参果皂苷口服液质量进行研究，建立人参果皂苷口服液质量标准。利用薄层检查对其鉴定。采用分光光度法及滴定法对人参果皂苷口服液中人参皂苷含量和木糖醇、山梨酸含量进行测定。结果表明人参果皂苷口服液质量检验方法简便、准确，可用于快速检验人参果皂苷口服液的质量。     

Panax notoginseng saponins suppress oxygen-glucose deprivation/reoxygenation-induced pyroptosis of SH-SY5Y cells

AIM To investigate the effect of Panax notoginseng saponins (PNS) on pyroptosis of SH-SY5Y cells induced by oxygen-glucose deprivation/reoxygenation (OGD/R). METHODS The OGD/R was conducted to induce ischemia/reperfusion injury in SH-SY5Y cells. The effects of PNS on the viability (detected by CCK-8 assay) and membrane permeability [indicated by lactate dehydrogenase (LDH) leakage and propidium iodide (PI) staining positive cell proportion] of OGD/R-induced SH-SY5Y cells were observed. The protein levels of gasdermin D (GSDMD), GSDMD N-terminal fragment (GSDMD-N), caspase-1 and caspase-4, and the release of interleukin-1β (IL-1β) and IL-18 in the cells were also determined. RESULTS After exposure to OGD/R, the viability of SH-SY5Y cells dramatically decreased (P<0.01), while the LDH leakage, the PI staining positive cell proportion, the protein levels of GSDMD, GSDMD-N, caspase-1 and caspase-4, and the release of IL-1β and IL-18 were significantly increased (P<0.01). However, PNS treatment enhanced the viability of SH-SY5Y cells inhibited by OGD/R (P<0.01), but reduced the leakage of LDH and the percentage of PI staining positive cells (P<0.05 or P<0.01). Moreover, PNS reversed the increases in the protein levels of GSDMD, GSDMD-N, caspase-1 and caspase-4 and the release of IL-1β and IL-18 in OGD/R-induced SH-SY5Y cells (P<0.05 or P<0.01). CONCLUSION Treatment with PNS alleviates OGD/R-induced injury in SH-SY5Y cells. Its mechanism may be related to inhibition of SH-SY5Y cell pyroptosis induced by OGD/R.     

计算机软件模拟α-乳白蛋白与皂苷的分子对接

皂苷小分子具有很强的生理活性,在人体中必须与靶细胞生物大分子相互作用才能发挥其生物作用。α-乳白蛋白（α-lactalbumin,α-LA）是球状蛋白质,能结合疏水配体,在食品工业作为功能性配料。采用计算机模拟的方法,对2类皂苷（达玛烷型皂苷和齐墩果型皂苷）和α-LA相互作用进行研究,并获得其相互作用模式的相关图像。分子对接结果表明,2种类型的皂苷与α-LA活性口袋内的氨基酸残基均以疏水相互作用及氢键作用结合,但达玛烷型皂苷结构更复杂,可以提供更多结合位点,且其形成氢键的作用力更强。     

海参加工废液中皂苷的提取及其抗肿瘤作用的研究

为了研究其对肿瘤小鼠的抑瘤作用,以及对免疫器官的影响。从海参废液中提取海参皂苷,通过建立S180皮下肿瘤小鼠模型,采用经口灌胃和腹腔注射2种方式给药后,将小鼠称重,断颈处死,然后剥离的肿瘤组织、胸腺、脾脏,称重并进行统计学分析。结果表明：海参皂苷能显著抑制S180皮下瘤小鼠的肿瘤生长;通过2种给药方式相比较,腹腔注射给药方式抑瘤效果(60.29%,P＜0.01)明显优于经口灌胃给药方式(37.70%;P＜0.05);与阳性对照环磷酰胺相比,海参皂苷对小鼠的生长影响较小,而且提高小鼠的脾脏指数和胸腺指数,对小鼠免疫器官有促进作用。本实验为今后海参皂苷抗肿瘤活性的进一步研究提供了有效依据。     

苜蓿皂甙对断奶仔猪生长性能和抗氧化性能的影响

为探讨苜蓿(Medicago sativa)皂甙对断奶仔猪生长性能和抗氧化性能的影响,选用72头体重7.5 kg左右的"杜×长×大"三元杂交断奶仔猪进行研究。试验随机分为4组:基础日粮组(C)、基础日粮添加0.5%苜蓿皂甙组(T1)、基础日粮添加1%苜蓿皂甙组(T2)和基础日粮添加2%苜蓿皂甙组(T3),每组3个重复,每个重复6头猪(公母各3头)。结果表明:苜蓿皂甙可以显著提高断奶仔猪的日增重(P<0.05),降低料重比,以T2组(1%苜蓿皂甙)效果最好;苜蓿皂甙可以显著提高断奶仔猪血清和组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性(P<0.05),降低丙二醛(MDA)的含量(P<0.05),而且随着苜蓿皂甙水平的增加,仔猪血清和组织中GSH-PX,SOD的活性呈升高趋势,MDA的含量呈下降趋势。因此,在断奶仔猪日粮中添加苜蓿皂甙可以提高其抗氧化能力,促进其生长。     

苜蓿皂苷对大鼠肝脏及肝脏细胞低密度脂蛋白受体、三磷酸腺苷结合盒转运体mRNA表达的影响

本试验旨在研究苜蓿皂苷对大鼠肝脏及大鼠肝脏细胞(BRL细胞)胆固醇清除和转运途径中关键基因低密度脂蛋白受体(LDLR)、三磷酸腺苷结合盒转运体G5(ABCG5)、三磷酸腺苷结合盒转运体G8(ABCG8)mRNA表达量的影响,从个体和细胞水平初步探讨苜蓿皂苷调控胆固醇清除和转运的分子机制。采用高脂饲粮建立大鼠高脂模型,测定苜蓿皂苷对正常、高脂大鼠血清指标[总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量]和肝脏LDLR、ABCG5、ABCG8 mRNA表达量的影响;采用高糖DMEM培养液建立BRL细胞脂变模型,测定苜蓿皂苷浓度对BRL细胞活性的影响,测定苜蓿皂苷对正常、脂变细胞LDLR、ABCG5、ABCG8 mRNA表达量的影响。结果表明:1)苜蓿皂苷显著降低高脂大鼠血清中TG、TC和LDL-C的含量(P0.05);2)苜蓿皂苷显著上调正常大鼠肝脏LDLR、ABCG5、ABCG8及高脂大鼠ABCG5、ABCG8 mRNA表达量(P0.05);3)添加200、250μg/m L苜蓿皂苷显著提高了BRL细胞的活性(P0.05);4)苜蓿皂苷显著上调正常BRL细胞LDLR、ABCG5、ABCG8 mRNA表达量(P0.05),而对脂变BRL细胞各基因mRNA表达量无显著影响(P0.05)。结果提示,苜蓿皂苷可通过调控LDLR、ABCG5、ABCG8 mRNA的表达来增加肝细胞内胆固醇的清除和转运,从而降低机体胆固醇的含量。