全文获取类型
收费全文 | 3671篇 |
免费 | 129篇 |
国内免费 | 341篇 |
专业分类
林业 | 44篇 |
农学 | 153篇 |
基础科学 | 5篇 |
173篇 | |
综合类 | 1014篇 |
农作物 | 154篇 |
水产渔业 | 198篇 |
畜牧兽医 | 2033篇 |
园艺 | 50篇 |
植物保护 | 317篇 |
出版年
2024年 | 6篇 |
2023年 | 38篇 |
2022年 | 66篇 |
2021年 | 95篇 |
2020年 | 91篇 |
2019年 | 91篇 |
2018年 | 44篇 |
2017年 | 88篇 |
2016年 | 128篇 |
2015年 | 114篇 |
2014年 | 175篇 |
2013年 | 206篇 |
2012年 | 239篇 |
2011年 | 289篇 |
2010年 | 243篇 |
2009年 | 262篇 |
2008年 | 200篇 |
2007年 | 240篇 |
2006年 | 242篇 |
2005年 | 177篇 |
2004年 | 137篇 |
2003年 | 101篇 |
2002年 | 97篇 |
2001年 | 93篇 |
2000年 | 63篇 |
1999年 | 68篇 |
1998年 | 75篇 |
1997年 | 73篇 |
1996年 | 47篇 |
1995年 | 43篇 |
1994年 | 46篇 |
1993年 | 43篇 |
1992年 | 38篇 |
1991年 | 36篇 |
1990年 | 30篇 |
1989年 | 36篇 |
1988年 | 22篇 |
1987年 | 24篇 |
1986年 | 9篇 |
1985年 | 5篇 |
1984年 | 2篇 |
1983年 | 4篇 |
1982年 | 4篇 |
1981年 | 5篇 |
1979年 | 1篇 |
1956年 | 4篇 |
1955年 | 1篇 |
排序方式: 共有4141条查询结果,搜索用时 0 毫秒
71.
应用TaqMan-MGB探针进行松材线虫的实时荧光定量检测技术研究 总被引:7,自引:0,他引:7
松材线虫是国际公认的最重要的检疫性有害生物之一,也是我国2类检疫危险性有害生物,我国口岸多次从货物的木质包装中截获该线虫。由于松材线虫与拟松材线虫在形态上极其相似,难以区分,幼虫更无法用于鉴定。传统的形态学鉴定、生化以及其他分子技术等方法存在费时、准确度不高、灵敏度低等缺点,不易形成标准。我们设计筛选一对引物以及一条MGB探针,对松材线虫进行实时荧光PCR检测。建立了一条从1 pg到104pg标准曲线,相关系数r=0.965。该检测方法省时、准确、快速、无污染。 相似文献
72.
Fu-ying Zheng Guo-zhen Lin Chang-qing Qiu Ji-zhang Zhou Xiao-an Cao Xiao-wei Gong 《Research in veterinary science》2009,87(2):211-212
The gene encoding antigenic site G1 of bovine ephemeral fever virus (BEFV) was highly expressed in the host cell Escherichia coli. An indirect G1-ELISA with the recombinant protein as the coating antigen was established to detect antibodies against BEFV. The result revealed that the optimal concentration of the coated antigen was 0.5 μg/well and the dilution of serum was 1:20. It was optimal that sera with P/N value 2.2 were considered positive, P/N value 2.0 negative, and between 2.0 and 2.2 ambiguous. The G1-ELISA method gave a sensitivity of 97.6% and a specificity of 98.6% by testing 590 field serum samples. These results suggest that the G1-ELISA may be a good alternative tool for seroepidemiological surveys. 相似文献
73.
以分离的猪萨佩罗病毒PSV Hu N1/2016株感染PK15细胞,制备抗原板,建立检测猪血清中PSV抗体的间接免疫荧光(IFA)方法。结果表明:一抗最佳稀释浓度为1∶300;FITC标记的羊抗猪荧光二抗最佳稀释浓度为1∶300。该方法特异性强,敏感度高,既能将PSV抗体与PRRSV、FMDV、PCV、CSFV抗体区分开,也可以检测到中和效价0.128的阳性血清。用该方法检测湖南省部分规模化猪场208份临床血清样品的总阳性率为68%,表明PSV在湖南省流行普遍,且其感染主要发生在保育阶段。 相似文献
74.
为了研究触角结合蛋白(Antennal binding proteins,ABPs)的生理功能,利用RT-PCR方法克隆了小菜蛾Pxyl ABP基因,并在大肠杆菌中表达,纯化的重组蛋白通过荧光竞争结合试验测定其与29种化合物的结合特性,并运用Auto Dock 4.2进行Pxyl ABP蛋白和化合物的分子对接。结果表明,Pxyl ABP与异硫氰酸丙烯酯、己醛、己烷、2-己酮、吲哚和β-紫罗兰酮结合,解离常数分别为0.91,1.81,1.17,2.71,2.74,14.95μmol/L;分子对接显示,Tyr100与异硫氰酸丙烯酯形成1个氢键。说明Pxyl ABP参与了小菜蛾识别十字花科蔬菜和虫害诱导的植物挥发物的生理过程。 相似文献
75.
用酶联免疫法测定虾蟹中残留的氯霉素 总被引:1,自引:0,他引:1
采用酶联免疫法测定了南美白对虾Penaeus vannamei和中华绒螯蟹Eriocheir sinensis中残留的氯霉素。比较了用不同方法处理样品对检测结果的影响,通过对检测范围、精密度、回收率等项目的测定,验证了该方法的可靠性。结果表明:氯霉素标准液为50~4050ng/L时,具有良好的线性关系;板问变异系数小于16.4%,样品测定的变异系数为9.4%~13.8%;用乙腈水溶液方法提取的回收率(84%~116%)比用乙酸乙酯提取的回收率(62%~92%)高。 相似文献
76.
梨火疫细菌实时荧光PCR和诱捕PCR-ELISA检测方法的建立 总被引:8,自引:1,他引:8
根据梨火疫细菌中独特而保守存在的质粒pEA29,设计了1对引物和3条探针,建立了实时荧光PCR检测方法和诱捕PCR-ELISA检测方法。实时荧光PCR采用带荧光标记的核酸杂交探针,边扩增边检测,步骤简单,不需PCR后处理,可避免假阳性和交叉污染;诱捕PCR-ELISA检测方法只需简单处理的样品就能检测,减少了核酸不纯出现的漏检,由于增加了核酸杂交探针,可不需凝胶电泳EB染色检测,不会出现假阳性问题。 相似文献
77.
78.
J亚群禽白血病病毒(ALV-J)ELISA检测方法的建立 总被引:2,自引:0,他引:2
利用抗J亚群禽白血病病毒(ALV—J)囊膜蛋白特异性单克隆抗体JE9,建立了检测ALV—J env抗原抗体免疫复合物的ELISA方法。应用该方法检测SPF鸡血清、鸡抗禽流感H9亚型阳性血清、鸡沙门氏菌阳性血清、鸡腺病毒阳性血清、鸡新城疫阳性血清.结果均为阴性,无交叉反应;抗ALV—J阳性血清与ALV—J特异性单克隆抗体JE9能相互阻断;ALV—J阳性血清经酸处理后,ELISA检测的D490差值明显下降。对部分攻毒鸡血清样本及田间ALV—J阳性血清样本进行电镜观察,可见ALV—J样病毒粒子及ALV—J样免疫复合物。经与间接免疫荧光(IFA)检测ALV—J env抗体结果比较表明,建立的ELISA方法与IFA方法两者具有较好的群体符合率,群体符合率为8/9。这些结果表明,本研究建立的ELISA方法在ALV—J的诊断中具有很好的应用前景。 相似文献
79.
80.
用基因疫苗pcDNA-H9和纯化H9N2亚型AIV免疫Balb/C小鼠,细胞融合后用HI和ELISA方法筛选出5株抗H9亚型AIV HA的特异性单克隆抗体H9-01(2E6),H9-02(3B1),H9-03(3H11),H9-04(1A4),H9-05(2G9)。各株单抗亚型测定的结果为H9-01,H9-02和H9-05均为IgG2b,H9-03为IgG1,H9-04为IgG2a,轻链的亚型均为kappa链。经特异性和与同型病毒的反应谱检测,它们均是HA特异性单克隆抗体。用制备的抗H9亚型AIV HA的单克隆抗体做成胶体金层析检测试纸条,可以检测到200个EID50的H9亚型AIV,为监测该亚型AIV试剂盒的进一步商品化奠定了基础。 相似文献