芦丁对奶牛瘤胃体外发酵参数、微生物区系、乳酸代谢产物含量及酶活性的影响

本试验旨在研究高精料底物条件下添加芦丁对奶牛瘤胃体外发酵参数、微生物区系、乳酸代谢产物含量及酶活性的影响。采用体外批次培养法及单因素试验设计,以精粗比为7∶3的0.7 g混合精料（玉米∶豆粕=4∶1）和0.3 g混合干草（苜蓿∶燕麦=1∶1）为发酵底物,按芦丁的添加水平[0（对照）、1.5%、3.0%和4.5%]分为4组,每组设3个平行;同时,选取4头体况相近的健康荷斯坦奶牛,晨饲前采集瘤胃液,制备人工瘤胃培养液,于39℃下进行厌氧发酵,并分别于培养3、6、9、12、18和24 h时取样测定相应指标。结果表明：1）在高精料底物条件下,瘤胃发酵液pH<5.80的时间长达6 h,表明成功建立了亚急性瘤胃酸中毒（SARA）模型;且与对照组相比,添加1.5%和3.0%芦丁能显著提高18～24 h瘤胃发酵液pH(P<0.05),显著降低24 h丙酸、异丁酸、戊酸及乳酸含量（P<0.05）,显著降低24 h甲烷产量（P<0.05）。多项指标综合指数（MFAEI）结果表明,芦丁添加水平为4.5%时,对瘤胃液体外发酵参数产生了正组合效应,具有较好的体外发酵效果。2）与对照组相比...     

响应面法优化玉米须中芦丁的提取工艺及检测

为探讨玉米（Zea mays）须中芦丁提取工艺和检测条件,本试验选取乙醇体积分数、液料比、回流时间和超声时间4个因素,采用响应面法优化玉米须中芦丁的提取工艺,并将最佳工艺条件提取的芦丁样品进行紫外光谱和红外光谱测定。结果表明,玉米须中芦丁的最佳提取工艺条件为乙醇体积分数49%、液料比30 mL∶1 g、回流时间1.7 h以及超声时间36 min。在该工艺条件下,玉米须芦丁含量为12.152 mg·g-1,且经紫外、红外光谱测定,其主要官能团吸收峰显著,HPLC检测重现性好。说明该工艺对玉米须中芦丁的提取优化效果显著,为玉米须深层次研究提供了一定参考。     

野生荞麦籽粒中芦丁降解酶的分离纯化

从野生荞麦种金荞麦籽粒中提取出芦丁降解酶,具有将芦丁降解为槲皮素的作用.该粗酶液用葡聚糖凝胶柱G-100和DEAE阴离子交换柱分离纯化后,最终酶的比活性由59.2 U/mg提高到671.4 U/mg,纯化倍数和回收率分别为11.3倍和3.5％.所得酶液经SDS-PAGE检测酶分子量大小为60 kDa左右.对酶液反应条件...     

Plant polyphenols can directly affect ovarian cell functions and modify toluene effects

The influence of toluene alone and in combination with plant polyphenols apigenin, daidzein or rutin on viability, proliferation (proliferating cell nuclear antigen accumulation), apoptosis (Bax accumulation) and release of progesterone (P), testosterone (T) and estradiol (E) in cultured porcine ovarian granulosa cells was evaluated. Toluene reduced ovarian cell viability, proliferation and E release; it promoted P release, demonstrating no effect on apoptosis or T output. Apigenin alone failed to affect cell viability, proliferation, apoptosis and P and T release, but stimulated E release, promoting the inhibitory action of toluene on proliferation, preventing and even reversing the stimulatory effect of toluene on apoptosis and P. Daidzein alone reduced cell viability and promoted T release, preventing and reversing the stimulatory effect of toluene on cell proliferation. Rutin administration reduced cell viability and E output, promoting the inhibitory action of toluene on cell viability and stimulatory effect on P release, and preventing the inhibitory action of toluene on E release. Toluene reduced apigenin- and rutin-induced E release, promoting action of daidzein on cell viability. These observations suggest the action of toluene and plant polyphenols on ovarian cell functions and the functional interrelationships between these molecules in the ovary.     

番茄植株中黄酮类对菜青虫(Pieris rapae L.)的活性组分及其对截形叶螨(Tetranychus truncalus Ehara)的毒效

本研究对番茄(Lycopersicon esculentum)植株中黄酮类进行了提取、分离和部分纯化,从中得到一种黄酮醇,经红外光谱、紫外光谱、质谱、核磁共振等分析,并与标准图谱对照,确定其分子结构为芦丁。生物测定结果表明,黄酮类对菜青虫有一定拒食作用,但未达到显著标准;黄酮类及芦丁有抑制菜青虫生长发育的作用;芦丁对截形叶螨有毒效,LC_(50)为94.00 μg·g~(-1)。     

苦荞麦苦味物质与呈色物质的鉴定

采用感官鉴别、显色反应及薄层层析等方法,对苦荞麦主要苦味物质和呈色物质进行了鉴定,结果表明苦荞麦中主要苦味物质和呈色物质是黄酮类化合物,并且主要可能是芦丁.     

苦荞全生育期芦丁积累与其生物合成途径相关基因表达分析

【目的】探究苦荞全生育期芦丁含量变化与其合成途径关键酶基因和调控因子MYB基因表达量之间的相关性,以期进一步明确苦荞植株体内芦丁生物合成的分子机制。【方法】以九江苦荞为试验材料,整个生育期分别在萌发期、子叶期、真叶期、盛叶期、现蕾期、盛花期、灌浆期和籽粒成熟期共8个时期取材(S1—S8)。采用RT-PCR方法,克隆获得与黄酮类代谢相关的MYB类转录因子基因。采用T-coffee软件进行氨基酸同源序列比对及保守结构域分析。与拟南芥黄酮类代谢相关的MYB转录因子及荞麦同源MYB转录因子序列比对,基于邻近法构建系统进化树;实时荧光定量PCR技术分析芦丁合成途径中5个关键酶Ft CHS、Ft F3H、Ft4CL、Ft FLS-like和Ft UFGT及上述克隆到的MYB转录因子在不同组织中的表达模式。基于高效液相色谱法(HPLC)测定全生育期取材组织的芦丁含量。同时采用相关性分析方法分析不同组织中芦丁含量变化与基因表达模式的相关性。转换上述数据为矩阵,采用欧式距离法构建共表达层次聚类图谱。【结果】克隆到2个MYB类转录因子,即Ft MYB7和Ft MYB9,其核酸序列长度分别为876和912 bp,分别编码291和303个氨基酸残基。氨基酸序列同源性比对分析结果表明,二者均具有典型的R2R3保守结构域,为R2R3类型的MYB转录因子。结合Nr数据库中17个苦荞和3个拟南芥黄酮类代谢相关MYB转录因子同源氨基酸序列构建系统进化树,结果表明这22个基因分成6大类群,其中Ft MYB7属于第II类群,Ft MYB9属于第IV类群,二者分属于不同类群,暗示这2个MYB转录因子可能涉及调控植物生长发育过程中不同功能类型。荧光定量结果显示,Ft MYB7在S3(真叶期)和S5(现蕾期)基因相对表达量最高,达到501和867倍;Ft MYB9在S1(萌发期)和S2(子叶期)相对表达量最高,分别为34和72倍。上述基因表达量与芦丁含量变化模式相关性分析表明,8个生长时期中,Ft4CL、Ft CHS、Ft F3H、Ft UFGT和Ft MYB7相对表达模式与芦丁含量变化幅度呈正相关,其相关系数分别为0.748、0.683、0.704、0.890和0.862。而Ft FLS-like和Ft MYB9与芦丁含量的变化幅度呈负相关,其相关系数分别为-0.442和-0.501。【结论】Ft MYB7和Ft MYB9转录因子在整个生育时期中表达模式存在明显差异。其中Ft MYB7可能在苦荞芦丁积累的过程中起到正调控作用,而Ft MYB9则为负调控作用。     

高效毛细管电泳法测定加杨叶芦丁含量的动态变化

建立了加杨叶中芦丁含量测定的高效毛细管电泳方法。用甲醇溶解样品采用超声提取,研究了缓冲溶液浓度、pH值、电压、温度及进样时间等因素对分离检测的影响;确定了最佳的测定条件:50mmol/L硼酸盐缓冲溶液(pH值为9.3),压力进样时间为5s,温度为25℃,运行电压为20kV,检测波长为254nm。在此条件下,峰面积与芦丁浓度具有良好的线性关系,平均回收率达到98.58%,方法准确。同时,利用建立的方法研究了加杨叶生长过程中芦丁含量的变化。     

变黄环境对烤烟中部叶芸香甙含量变化规律的影响

试验采用206最优回归设计方案,研究了不同烘烤变黄温度和相对湿度对烤烟中部叶芸香甙含量的变化规律。结果表明,在试验温度和相对湿度范围内,随着温度的升高,芸香甙含量呈现先降后升的趋势,相对湿度对芸香甙的影响则与温度相反,中温及高湿有利于芸香甙含量的增加。     

槐花中芦丁的正交提取工艺及抗氧化活性研究

以芦丁的紫外最大吸收波长510nm为指标,进行正交试验设计,筛选出从槐花中提取芦丁的最佳工艺参数,将芦丁用超氧负离子自由基清除法进行抗氧化活性试验。结果表明,醇提法提取工艺最为理想,其工艺参数为:乙醇浓度80%、乙醇用量100mL、振荡温度45℃,该工艺提取出的芦丁含量最高可达11.6%;芦丁对超氧负离子自由基O2-·的清除作用呈量效关系,清除作用的IC50值为:0.0305g/L,存在显著性差异(t=2.93,P<0.05)。