噬菌体展示技术及其应用

噬菌体展示技术是一项新兴的分子生物学技术;该技术将基因型和表现型有效地联系起来,是后基因组时代的有力工具。目前用于构建展示文库的噬菌体主要有丝状噬菌体、λ噬菌体、T4噬菌体和T7噬菌体;它们所展示的外源蛋白可以保持相对独立的空间结构和生物活性。随着此项技术的不断完善和发展,噬菌体展示技术已在新型疫苗的研制、酶抑制剂的筛选、医学诊断和治疗、多肽药物的开发、蛋白质相互作用的研究等领域得到了广泛的应用,并显示了良好的应用前景。     

水稻悬浮细胞中稻瘟菌激发子诱导性受体类似激酶cDNA的克隆及特征分析

采用改进的差异显示方法由稻瘟菌激发子处理的水稻悬浮培养细胞中得到７个诱导表达的蛋白激酶 ｃＤＮＡ 片段。为获得这些蛋白激酶的编码全长序列,构建了稻瘟菌激发子处理的水稻细胞ｃＤＮＡ 文库。以上述一个 ｃＤＮＡ 片段作为探针筛选文库,得到一个含有完整阅读框的 ｃＤＮＡ 克隆ＯｓＥＰＫ１。分析ＯｓＥＰＫ１的推定氨基酸序列的结果表明：它由Ｎ 端信号肽、胞外区域、跨膜结构和胞内蛋白激酶结构域等几部分组成,可能为一受体类似蛋白激酶。对比 ＯｓＥＰＫ１与其它植物受体类似蛋白激酶在胞外区域的相似性,结果显示ＯｓＥＰＫ１与小麦叶锈激酶家族同源性较高,推测它们可能属于同一类植物受体类似蛋白激酶。此外,ｎｏｒｔｈｅｒｎ 杂交显示,ＯｓＥＰＫ１可由稻瘟菌激发子迅速瞬时诱导,因而它的诱导可能也是水稻对稻瘟菌侵染做出的一种早期防卫反应。     

不同生长速度牙鲆的肌肉组织基因差异表达研究

为探讨牙鲆生长的分子遗传机理,选取同一饲养环境下生长的60日龄牙鲆,根据体重和体长的显著差异分成大小两组,筛选出14对引物组合,应用mRNA差异显示技术,研究了两组牙鲆肌肉组织的基因表达差异。在8%的聚丙烯酰胺凝胶上共获得241条可重复扩增的条带,占可扩增条带(288条)的77．43%。其中有223条为共有条带,占总条带数(241)的92．53%;差异表达的片段有18条,占总条带数(241)的7．47%;它们只表现为强弱的差异,没有发现“有或无”的基因表达差异现象。实验结果说明:在长期相同的人工养殖条件下,牙鲆肌肉组织中基因的mRNA表达差异较少;相同养殖环境条件下表现出不同生长速度的牙鲆鱼肌肉组织中所存在的强与弱的基因表达差异的原因,可能源于调控其肌肉组织生长发育基因的内含子调控序列存在某些差异。     

噬菌体展示技术在农药等小分子检测中的应用

噬菌体展示技术是将外源蛋白基因与噬菌体表面特定蛋白基因在其表面融合表达,用于筛选和改造功能性多肽的生物技术,具有库容量大,结合特异性强等特点,现已被广泛应用于生命科学的许多领域。本文在系统介绍了噬菌体展示技术及其载体系统发展的基础上,对该技术在农药等小分子化合物免疫检测中的应用进行了综述。     

金属/防锈油防锈性能试验——多电极探头直测法

提出了金属/防锈油防锈性能试验——多电极探头直测法.该方法测评速度快，比ISO湿热、盐雾法缩短试验时间几十到几百倍.设备体积小，便于携带，特别有利于缩短新产品研制周期、在线检测和节能.