雏鹅大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验

为有效防治雏鹅大肠杆菌病,试验无菌采集疑似大肠杆菌病例雏鹅的肝、脾等组织,进行病原菌的分离培养,经过培养特性、形态染色、生化特性以及致病性试验,鉴定为大肠杆菌。选用7种临床常用抗菌药物进行药敏试验,药敏试验结果表明,分离菌株对庆大霉素、阿莫西林、氧氟沙星、头孢唑啉产生耐药性,对丁安卡娜高度敏感。试验结果为雏鹅大肠杆菌病的临床治疗提供依据。     

猪伪狂犬病病毒LC株的分离鉴定及其重要功能基因的进化分析

为确诊广东某猪场母猪流产发病原因,本研究收集该猪场流产死胎的脑、淋巴结、肺脏混合液,进行PCR鉴定、病毒分离培养、半数组织培养感染剂量（tissue culture infective dose,TCID₅₀）测定、猪伪狂犬病病毒（pseudorabies virus,PRV）重要功能基因（gB、gC、gD、gE）序列测定和进化分析及动物回归试验。结果显示,病料混合液为PRV阳性,接种Vero细胞传至第3代即出现稳定的细胞病变（CPE）,第5代TCID₅₀达到10^-6.8/0.1 mL,PRV gB、gC、gD、gE基因序列测定、同源性及进化树分析显示为,PRV中国变异株,命名为LC株。动物试验显示,LC株对12周龄猪具有一定致病性,可形成PRV典型临床症状及病理变化。本研究分离到一株PRV流行毒株,推测当前使用疫苗Bartha-K61株尚无法完全控制新毒株的流行。     

siRNA干扰ATGL基因表达对猪脂肪细胞脂肪分解的抑制作用

【目的】探讨猪脂肪甘油三酯水解酶(adipose triglyceride lipase,ATGL)基因在脂肪细胞脂解中的作用。【方法】构建针对猪ATGL基因CDS区113和1 358位点的慢病毒干扰载体,包装后用其感染猪成熟脂肪细胞,检测ATGL和激素敏感脂酶(hormone-sensitive lipase,HSL)基因mRNA及其蛋白的表达情况;用甘油试剂盒检测细胞甘油释放量。【结果】成功构建了ATGL基因的慢病毒干扰载体,用其感染猪成熟脂肪细胞后,RT-PCR分析和Western印迹检测结果表明,试验组脂肪细胞ATGL的表达显著下调,HSL的表达没有明显变化;甘油释放量显著降低,其中针对ATGL基因CDS区113位点的siRNA1对ATGL mRNA的干扰效率达55%,甘油释放量降低了49%。【结论】成功构建了猪ATGL基因慢病毒干扰载体,其能显著降低ATGL基因mRNA及其蛋白在猪成熟脂肪细胞中的表达,降低脂肪细胞的甘油释放量,表明ATGL在猪脂肪细胞脂解中有着重要作用,且113位点是ATGL基因CDS区的最佳干扰靶位点。     

连续降雨后太湖流域典型农田土地利用方式下土壤至入湖河流水体细菌群落的变化

研究以太湖区域中林地、桃园、稻田以及链接这些典型土地的河流共8个点为取样地,借助16S rRNA扩增子高通量测序和分析技术,基于Illumina HiSeq测序平台,利用双末端测序的方法得到1 865 862条原始序列,通过对原始序列进行拼接、过滤,得到1 712 497条有效序列,按照97%相似性将优质序列划分为95 132 条可操作分类单元（OTU, operational taxonomic units） ,同时基于OTUs 信息计算Alpha 和Beta 群落丰富度和多样性指数,并采用RDP Classifier结合GreenGene数据库对代表性OTU 序列进行注释。在OTU聚类信息、群落多样性指数及组间差异性物种统计方面,分析了明显连续降雨后监测的细菌群落从农田到河流连续地变化规律。结果表明,森林景观带、稻田、桃园土壤细菌种群多样性明显比河流水体中丰富,说明陆源微生物在迁移过程中发生了适应特定生境的变化。Acidobacteria门在森林景观带、水稻田、桃园中表现出较高的丰度,Proteobacteria门在河流中展现出更大的种群优势。Nitrospirae门是一类具有硝化作用的细菌,在水稻田中显示较高的优势。Yersinia属、Flavobacterium属、Aeromonas属、Pseudomonas属、Acinetobacter属是具有传播水生动物、人畜流行疾病能力的种群,并且在河流中具有较高丰度,应当引起注意。Sphaerotilus属对污水中的有机物和有毒物质有很强的降解作用,在河流中的丰度高于土壤。Sphingomonas属、Arthrobacter属、Thiobacillus属能够降解除草剂、农药等有机污染物,在桃园和稻田中表现出较高丰度,具有环境修复价值。本文为系统掌握太湖流域果园和水稻田土壤细菌群落结构的差异特征,以及土壤微生物群落从农田系统到河流的变化规律提供了理论依据,提示该区域农业从事者应当从经济、生态和健康方面综合考虑土地利用方式。     

鸭大肠杆菌超广谱β-内酰胺酶检测(ESBLs)及药物敏感性测定

对国内7个省份临床分离的32株鸭大肠杆菌进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测及药物敏感性研究。结果表明,32株分离的鸭大肠杆菌中产ESBLs菌株7株,阳性检出率为21.87%;产ESBLs菌株对常用头孢三代及半合成青霉素类药物的敏感率低于42.9%,耐药率则高于28.6%,对阿莫西林、氨苄西林、头孢噻呋的耐药率高达100%。产酶菌株和非产酶菌株对新型头孢四代产品头孢吡肟及碳青霉烯类药物亚胺培南、美罗培南的敏感率高于96%。加酶抑制剂的β-内酰胺类抗生素如阿莫西林/棒酸、氨苄西林/舒巴坦、头孢哌酮/舒巴坦等对产酶菌株和非产酶菌株的敏感率全部高于未加酶抑制剂的单方药物。产ESBLs菌株存在多重耐药现象,酶抑制剂能够部分解决此类耐药性问题。     

茶多酚的抑菌作用研究

对茶多酚对常见致病菌的抑制作用进行了研究,测定了茶多酚对这些致病菌的最低抑制浓度,结果表明,茶多酚对金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、枯草杆菌的抑制作用特别强,其抑菌圈范围明显,抑制作用强;对变形杆菌和沙门氏菌的抑制作用次之,其抑菌圈较为模糊;对大肠杆菌的抑制作用则欠佳.探讨了茶多酚在鲜肉和鲜牛奶中的防腐效果.     

乌桕根皮醇提物萃取部位抗猪大肠杆菌活性分析

[目的]探讨乌桕根皮醇提物各部位对猪大肠杆菌4种血清型的抗菌活性。[方法]用95%乙醇80℃回流提取乌桕根皮,将醇提液浓缩后依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取,最后得到萃余的水相,测试各部位的抗菌活性。[结果]醇提物的石油醚部位、正丁醇部位和水部位没有抑制作用,乙酸乙酯部位对血清型K88F、41和987P具有抑制效果,而对血清型K99无效。因此,用中药材防治猪大肠杆菌疾病时,应该考虑到血清型差异。[结论]乌桕根皮提取物可以在一定程度上防治大肠杆菌引起的猪病。     

Antibiotic resistant Escherichia coli in southeastern Australian pig herds and implications for surveillance

To investigate public health implications of antibiotics to control post‐weaning scours, we surveyed 22 commercial pig herds in southeastern Australia. Fifty faecal samples per herd were collected from pre‐ and post‐weaned piglets. Presumptive Escherichia coli isolates were confirmed by MALDI‐TOF MS. Isolates (n = 325) were screened for susceptibility to 19 veterinary antibiotics using MIC broth microdilution. All 325 E. coli isolates underwent further testing against 27 antibiotics used in human medicine and were screened for ETEC adhesin and enterotoxin genes (F4 (K88), F5 (K99), F6 (987P), F18, F41, STa, STb, Stx2e and LT) by multiplex PCR. Isolates identified as phenotypically resistant to third‐generation cephalosporin (3GC) and aminoglycoside antibiotics were screened by multiplex PCR/reverse line blot to detect common β‐lactam and aminoglycosides resistance genes, confirmed by sequencing. Twenty (6.1%) of the E. coli isolates were resistant to 3GC antibiotics and 24 (7.4%) to the aminoglycoside antibiotic gentamicin. Genetic analysis revealed six different extended spectrum β‐lactamase (ESBL) genes (blaCTX‐M‐1, ‐14, ‐15, ‐27, blaSHV‐12 and blaCMY‐2‐like genes), four of which have not been previously reported in Australian pigs. Critically, the prevalence of 3GC resistance was higher in non‐pathogenic (non‐ETEC) isolates and those from clinically normal (non‐diarrhoeal) samples. This highlights the importance of non‐ETECE. coli as reservoirs of antimicrobial resistance genes in piglet pens. Antimicrobial resistance surveillance in pig production focused on diagnostic specimens from clinically‐affected animals might be potentially misleading. We recommend that surveillance for emerging antimicrobial resistance such as to 3GC antibiotics should include clinically healthy pigs.     

挥发性物质对植物致病菌的熏蒸作用研究进展

挥发性物质分子量小,化合物种类复杂,具有的熏蒸抑菌作用是其特殊的生物学功能之一,受到世界各国学者的关注。本文对挥发性物质的种类、抑菌活性及检测鉴定方法进行了概述,着重评述了植物（精油）和微生物产生的挥发性物质的抑菌作用及其研究进展,从挥发性物质中筛选出具有抑菌作用的单体化合物是新的研究方向。     

Prevalence of antimicrobial resistance in enteric Escherichia coli from domestic pets and assessment of associated risk markers using a generalized linear mixed model

Antimicrobial resistance (AMR) is a growing global public health problem, which is caused by the use of antimicrobials in both human and animal medical practice. The objectives of the present cross-sectional study were as follows: (1) to determine the prevalence of resistance in Escherichia coli isolated from the feces of pets from the Porto region of Portugal against 19 antimicrobial agents and (2) to assess the individual, clinical and environmental characteristics associated with each pet as risk markers for the AMR of the E. coli isolates.