液液萃取气相色谱法测定地表水中多氯联苯

指出了多氯联苯是一种持久性环境污染物,地表水中 PCBs液液萃取气相色谱法分析技术具有相当的代表性,以EPA的标准分析方法为基础,结合多年实验经验,对此方法内容进行了详细描述并对部分内容进行了优化,旨在为该方法的转化研究提供一些参考。     

一种适于PCR和LAMP检测的松木中松材线虫DNA快速提取方法

【目的】本研究旨在探索快速、简便地直接从病木中提取松材线虫 DNA 的方法。【方法】运用 Chelex-100结合异硫氰酸胍蛋白变性缓冲液建立新的高效快速提取微量木块中线虫 DNA 的方法,并通过普通 PCR 与环介导等温扩增( LAMP)对提取的 DNA进行检测验证。【结果】建立了提取线虫 DNA 的新方法 Chelex-100法,并对影响提取效率的Chelex-100浓度、冻融时间和煮沸时间进行了优化。Chelex-100法最适Chelex-100终浓度为1.5%( W/V),最适冻融时间为5 min,最适煮沸时间为8 min。与传统的 CTAB法和蛋白酶 K 法比较,Chelex-100法提取的 DNA得率高,相同条件下,该方法提取的 DNA浓度远远大于常规方法。3种方法的 OD260/280比值从大到小依次为CTAB法＞蛋白酶K法≥Chelex-100法,Chelex-100法的OD260/280值显著低于CTAB法,而略低于或等同于蛋白酶K法,但这并不影响对提取的 DNA 进行 PCR 扩增。采用 Chelex-100法提取松木中松材线虫的 DNA,结合常规的PCR和 LAMP检测,检测灵敏度高,特异性强,稳定性好;提取的松材线虫 DNA 的75倍稀释液再稀释32倍后进行PCR扩增,扩增产物电泳依然有清晰的条带。用新方法提取病木中线虫的 DNA 后进行检测,所有带病松木样品的检测结果均呈阳性,而健康黑松、马尾松、油松木屑及盘多毛孢样品的检测结果均呈阴性。此外,该提取方法简便快速,20 min内即可完成整个 DNA的提取;经济方便,试剂保藏无特殊要求,单个样品提取耗费低于3.5元。【结论】Chelex-100法是一种快速有效的提取松木中松材线虫DNA的方法,此方法结合PCR和LAMP检测技术将进一步提高松材线虫的检测效率、灵敏度和准确性,可为松材线虫的野外检测提供可靠的技术依据。     

液相色谱串级质谱同时测定木制品中3种有机磷酸酯阻燃剂

为建立有效的阻燃剂的使用规范和为监管制度提供理论依据,本文建立了微波辅助萃取,液相色谱串级质谱法同时测定木制品中3种有机磷阻燃剂分析方法,并考察了萃取溶剂、萃取条件、流动相对试验结果的影响。结果表明,以丙酮为萃取溶剂,70℃微波辅助萃取30 min,利用多反应检测MRM模式,TCEP、TDCP在线性范围0.02～1.0 mg/kg,TCPP在线性范围0.002～0.2 mg/kg内质量浓度与响应值呈现良好的线性关系,定量下限分别为27、50、8μg/kg,加标回收率82.7%～98.3%,相对标准偏差1.8%～10.8%。该方法操作简单,提取效果较好,能够有效的检测木制品中三种有机磷酸酯阻燃剂。     

响应面法优化山杏仁蛋白提取工艺研究

用单因素和响应面分析法确定山杏仁蛋白的提取工艺,首先通过单因素试验选取影响因素与水平,然后在单因素试验的基础上采用四因素三水平的响应面分析法,依据回归分析确定较优提取工艺条件。试验结果表明：山杏仁蛋白的等电点为4.1;其较优工艺条件为：pH 9.0,液料比为14 mL/g,提取温度37℃,提取时间60min。采用该工艺条件,山杏仁蛋白的提取率达到92.35%。     

Ase在水环境监测中的应用

在有机物污染物监测当中,快速溶剂萃取(Ase)属于一种样品前的处理技术,指出了由于快速溶剂萃取所具有的快捷、高效、半固体待测物等方面的特性。对有机物污染前的处理现状进行了分析,探讨了水环境监测下该技术的应用效能,对有机污染物监测技术在未来水环境当中的发展前景进行了详细阐述。     

不同提取缓冲液对三尖杉DNA 提取质量的影响

采用CTAB法研究不同提取缓冲液对三尖杉DNA 提取质量的影响。结果表明：提取三尖杉DNA的最佳缓冲液所含物质及浓度为100 mmol·L-1TrisHCl pH 8.0+0.14 mol·L-1NaCl+2%CTAB+20 mmol·L-1EDTA +2%β 巯基乙醇。采用改进的CTAB法提取了15个三尖杉优树样品的DNA,提取的DNA质量均较高,可以满足分子标记分析的要求。     

麻竹笋干提取L-酪氨酸实验

采用水解法提取麻竹笋干中的L-酪氨酸,研究料液比、pH值、脱色时间等因素对提取效果的影响。结果表明：麻竹笋干提取L-酪氨酸的最佳工艺参数为：料液比1：7,pH值为5．6,脱色时间60min。在此条件下,麻竹笋干提取L-酪氨酸的提取率为0．109％。     

山茱萸叶片DNA提取方法及ISSR反应体系构建

山茱萸成熟叶片中多糖及多酚类物质含量较高,传统CTAB法提取其叶片DNA效果较差,该研究在传统的CTAB提取法的基础上进行了改良,经DNA原液电泳检测及PCR产物的电泳检测表明,该法适用于提取硅胶快速干燥保存的山茱萸叶片的DNA。在此基础上,对山茱萸ISSR反应体系中的退火温度、引物浓度及模板用量进行了筛选,结果表明,在25μL的反应体系中,引物UBC847的最佳退火温度为55.2℃,引物最佳浓度为0.8μmol/L,模板最佳用量为70 ng,初步构建了山茱萸ISSR反应体系。     

微波法从虎杖中提取白藜芦醇工艺

研究了微波法提取虎杖中的白藜芦醇,通过正交实验初步确定微波功率、乙醇浓度、料液比、提取时间4个因素对提取效果的影响并确立最佳的提取工艺条件为：微波功率700W ,乙醇浓度70％,料液比1∶20,微波时间20min。     

降低浓缩果汁中不溶物含量的技术研究与产业应用

果汁加工过程中,为延长超滤有效运行时间,以富士苹果、秦冠苹果为材料,研究了酶解工序中使用复合纤维素酶对超滤通量和有效运行时间的影响,并进行了产业化应用。结果表明:添加复合纤维素酶,降低了酶解罐和超滤潴留罐中不溶物的含量,提高了超滤通量,延长了超滤运行时间,且对浓缩苹果汁的可溶性固形物含量、色值、浊度等品质指标没有影响;复合纤维素酶适宜的添加量为30~100mL/t;经过产业化应用发现,采用该技术,加工成熟度较大的苹果,超滤运行时间从13~16h延长到20~24h,超滤每周期有效运行时间提高45%以上,且平均通量比正常工艺提高10%以上。