莲瓣兰大雪素AP1MADS-box基因的克隆和系统发育分析

随着植物中越来越多的MADS-box基因被克隆出来,人们对经典的ABC模型进行了改进和完善,提出花发育的ABCDE模型,通过RT-PCR和RACE技术从莲瓣兰大雪素花器官中克隆得到AP1同源基因AP1a和AP1b的cDNA全长:AP1a基因全长为1 054 bp,其开放阅读框为744 bp;AP1b基因全长为944 bp,其开放阅读框为516 bp.从莲瓣兰大雪素中得到2个AP1同源基因,说明在大雪素中AP1出现基因松弛,所以出现多个拷贝.通过序列比对以及系统发育分析表明,莲瓣兰AP1a基因与春兰具有很高的相似度,达到99.1％,莲瓣兰AP1b基因与萼脊兰具有中等程度的相似度,达75.8％,但从大雪素花器官提取的同源基因AP1a和AP1b的相似度很低,仅为65.4％.这表明AP1基因在不同品种植物间具有保守性,而在同一个物种中又存在着功能的分化.     

Spatial demographic and genetic consequences of harvesting within populations of the terrestrial orchid Cymbidium goeringii

Populations of many orchids, especially terrestrial species, have been rapidly decreasing due to mass collection by plant sellers and enthusiasts. Given the presumably negative demographic and genetic consequences, such anthropogenic activity should be taken into consideration for predicting ecological and evolutionary dynamics and for planning conservation strategies. To determine how recent human disturbance alters spatial demographic and population genetic processes, populations of the terrestrial orchid Cymbidium goeringii located in South Korea were examined to quantify the spatial distributions of individuals and genotypes with respect to three levels of disturbance: “disturbed” (four populations), “putatively disturbed” (two), and “undisturbed” (two). Undisturbed and putatively disturbed populations were found to possess significantly positive spatial clustering of individuals over a range of spatial scales. In contrast, disturbed populations exhibited little or no spatial aggregation, consistent with the selective removal of plants by collectors from higher density areas within these populations. Although overall genetic differentiation among populations was moderate and significant (F_ST = 0.082), levels of genetic diversity within populations were similar despite the different disturbance histories (mean H_e = 0.257-0.324). Spatial genetic autocorrelation analyses revealed that the undisturbed populations exhibited significant declines in kinship (F_ij) with distance, that mean kinship at interplant distances of ?4-6 m was significantly greater than zero and between plants ?0.5 m apart was in the range expected for first cousins to half-sibs. In contrast, only one putatively disturbed and one disturbed population exhibited significant declines in kinship with distance. These differences between disturbed versus putatively disturbed and undisturbed populations in the spatial distribution of individuals and genetic variation likely reflect the consequences of mass collections. Since these differences (and reduced population density) have important implications for future ecological and evolutionary trajectories, conservation managers of endangered terrestrial orchids may want to analyze the spatial distribution of individuals and their genotypes to infer whether a population with few individuals represents a natural state or the likely outcome of mass collection.     

几种花叶线艺兰叶片色斑色素组成和叶绿体超微结构研究

以墨兰Cym bidium sinense3个花叶线艺兰品种金嘴、阳明锦和大石门为材料,分析了叶片色斑区叶绿素和类胡萝卜素的质量分数,对其解剖结构和叶绿体超微结构进行了观察,并同叶片正常绿色区进行了比较.结果表明:线艺兰叶斑的形成与叶绿素和类胡萝卜素的质量分数有直接的关系,叶片绿色区金嘴、阳明锦和大石门叶绿素质量分数分别为1.680、1.279和1.584 mg.g-1,类胡萝卜素质量分数分别为0.185、0.159和0.195 mg.g-1,绿色区金嘴、阳明锦和大石门类胡萝卜素与叶绿素质量分数的比值分别为0.110、0.124和0.123;而在叶片黄色区,金嘴、阳明锦和大石门叶绿素质量分数分别为0.693、0.465和0.540 mg.g-1,类胡萝卜素的质量分数分别为0.145、0.136和0.164 mg.g-1,类胡萝卜素与叶绿素质量分数的比值分别为0.209、0.292和0.304.即黄色区类胡萝卜素相对质量分数较高.绿色区和黄色区的叶绿素a与b比值变化不大,但在3个品种中都以绿色区稍高.在叶片绿色部分的细胞中,可以明显看到较多的叶绿体,叶绿体中基粒较发达,类囊体膜垛叠较紧密,有较多较大的淀粉粒;而在叶片黄斑部分的细胞中,基本上看不到完整叶绿体,淀粉粒逐渐消失,基质中存在很多嗜锇滴.     

基于ISSR标记的建兰种质资源遗传多样性分析

为揭示建兰种质间的亲缘关系,促进建兰种质资源的有效保护和利用。本研究利用ISSR标记分析了源于中国各地的39份建兰品种,并采用UPGMA方法进行了聚类分析。结果表明：6个ISSR引物对39份建兰品种的基因组DNA进行扩增,共扩増出64条清晰条带,其中57条为多态性条带。平均每条引物检测到的条带数为11条,多态性条带10条,多态性比率为89.88%。通过UPGMA法进行聚类分析表明供试材料的遗传相似系数在0.500~0.953之间,供试材料被分为6群集,说明ISSR标记在建兰的品种间具有丰富的多态性,能够很好地揭示建兰品种间的亲缘关系。本研究结果可为建兰种质资源品种鉴定及杂交育种等提供理论依据。     

大花蕙兰在天津地区的栽培技术

引进2个日本大花蕙兰品种，利用不同温室、不同基质和不同季节试管苗移栽对比实验，在天津地区建立一个大花蕙兰组培试管苗移栽、幼苗栽增、商品成花批量生产的可行方案。经过3a实验，得出试管苗在天津春天移栽成活率最高，达到97.9%。幼苗经3a种植，开花率达到89%。2个品种在种植管理中差别不明显。影响试管苗成活率和幼苗生长的主要因素是夏季高温和pH值偏高。天津秋季低温对大花蕙兰花芽分化有积极的影响。     

滇西特有的珍稀兰属资源——莲瓣兰*

 研究了滇西特有的珍稀兰属资源——莲瓣兰的生物学特性、分类地位、资源分布和利用价值等，为科学地保护和开发利用莲瓣兰资源做了基础工作。     

滇西特有的珍稀兰属资源—莲瓣兰

\t\t\t\t\t目的\t\t\t\t\t研究国家I级保护植物莲瓣兰的种子形态并测定其生活力,为莲瓣兰分类和保育生物学研究提供参考,并筛选出测定种子生活力的适宜方法。\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t方法\t\t\t\t\t以自然分布的莲瓣兰170 d蒴果为材料,用光学显微镜和扫描电镜观察种子形态,用NaClO药剂和TTC溶液对种子预处理和染色观察。\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t结果\t\t\t\t\t莲瓣兰蒴果卵圆形,长5.5~7.0 cm,宽1.5~2.0 cm,果皮脆壳质呈黄绿色,表面具有3条纵棱。种子小而多,乳白色,长(1.245±0.180) mm,宽(0.139±0.039) mm,呈狭长纺锤形,体积(0.007±0.003) mm³,千粒重0.4 mg;种皮厚(0.011±0.003) mm,表面为网状纹饰;种胚微型有胚柄,黄绿色,长(0.168±0.030) mm,宽(0.090±0.025) mm,体积0.001 mm³,占种子体积14.29%,种子气腔体积为85.71%。对生活力测定的影响因子从大到小依次为NaClO质量分数、TTC质量分数和预处理时间。用2.5%的NaClO溶液预处理20 min再用1%TTC溶液染色,染色率高达100%。\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t\t结论\t\t\t\t\t莲瓣兰种子气腔体积为85.71%,适于远距离传播。种子用NaClO预处理和TTC溶液染色,能有效测定种子生活力。\t\t\t\t     

LED不同光质对墨兰×大花蕙兰F_1代组培苗生长及生理指标的影响

以墨兰‘绿墨素’×大花蕙兰‘世界和平’F1代组培苗为试材,采用LED光源不同光质配比组合,以普通荧光光源为对照,研究LED光源对组培苗生长及生理指标的影响。结果表明:(1)单色红光(R)处理下株高、叶长、干重达到最高值,与对照组CK相比差异显著,红蓝复合光(2RB)有利于促进生根;(2)2RB处理下总叶绿素、叶绿素a、类胡萝卜素含量均最高,且与其他光源处理下差异显著,红蓝白复合光(RBW)照射下,叶绿素b的含量高于其他处理,单色蓝光(B)处理下,叶绿素a/b比值最高;(3)红蓝复合光(2RB)有利于组培苗可溶性糖合成;LED白光光源(W)处理下游离氨基酸含量最高,差异显著(p0.05)。说明LED不同光质对组培苗生长影响明显,综合比较各项指标,LED红蓝复合光(2RB)可作为墨兰‘绿墨素’×大花蕙兰‘世界和平’F1代组培苗生长的理想光源。     

LED不同光质对墨兰×大花蕙兰 F1代组培苗生长及生理指标的影响

以墨兰‘绿墨素’×大花蕙兰‘世界和平’F1代组培苗为试材,采用LED光源不同光质配比组合,以普通荧光光源为对照,研究LED光源对组培苗生长及生理指标的影响。结果表明：(1)单色红光(R)处理下株高、叶长、干重达到最高值,与对照组CK相比差异显著,红蓝复合光(2RB)有利于促进生根;(2)2RB处理下总叶绿素、叶绿素a、类胡萝卜素含量均最高,且与其他光源处理下差异显著,红蓝白复合光(RBW)照射下,叶绿素b的含量高于其他处理,单色蓝光(B)处理下,叶绿素a/b比值最高;(3)红蓝复合光(2RB)有利于组培苗可溶性糖合成;LED白光光源(W)处理下游离氨基酸含量最高,差异显著(p＜0.05)。说明LED不同光质对组培苗生长影响明显,综合比较各项指标,LED红蓝复合光(2RB)可作为墨兰‘绿墨素’×大花蕙兰‘世界和平’ F1代组培苗生长的理想光源。     

ISSR和SRAP标记技术在兰花植物种质资源研究中的应用

分子标记技术在兰花种质资源的亲缘关系鉴定与遗传多样性分析、分子遗传图谱的构建与目的性状基因的标记定位、基因库的构建和基因克隆、辅助育种选择及品种纯度鉴定等研究领域被广泛利用与推广.现从简单重复序列间扩增(Inter-simple sequence repeat,ISSR)和相关序列扩增多态性(SRAP)分子标记技术的基本原理、方法、特点以及在兰花植物种质资源的遗传育种中的应用现状和前景进行了综述与探讨.