病程相关蛋白-1a多克隆抗体的制备与应用

为获得效价高和选择性强的PR-1a抗体。根据NCBI GenBank中普通烟PR-1a一级结构信息,采用Blastn、Blastx和Expasy等软件进行序列同源性分析,获得1段序列特异性多肽,采用9-氟甲氧羰基固相合成法获得目的多肽,采用HPLC和LC-MS测定目的多肽的浓度和分子量。试验表明：目的多肽纯度达93.92%、分子量为2088.17;采用碳化二亚胺法制备获得Pep-KLH,并通过免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体,采用间接-ELISA和Western blot测定其抗体效价和特异性,结果表明：抗血清在1:32000条件下,抗血清的吸光值(OD)约为1.0;经Western blot试验表明：抗血清和多克隆抗体可特异性识别烟草叶片组织内的PR-1a;同时,试验采用系统性获得性的免疫激活剂-BTH作用普通烟K-326,对作用后的0、6、12、24、48、76、144、96 h的烟草叶片总蛋白进行间接-ELISA,发现：BTH作用普通烟K-326 144 h后,PR-1a蛋白表达呈上调趋势;同时采用半定量RT-PCR试验也同样证实了BTH可诱导PR-1a基因表达上调,其表达上调趋势与间接-ELISA的研究结果相似。表明采用该方法制备的PR-1a多肽抗体具有较高的特异性和灵敏度,可用于免疫诱导剂等方面的研究。     

尖孢镰孢菌致病机理及相关致病基因研究进展

尖孢镰孢菌是农作物和园艺作物上为害最严重的土传病原物之一,目前仍缺乏有效的防治措施,而明确其致病机理被认为是开发新的且有效的防治技术的重要基础。本文从尖孢镰孢菌产生毒素、尖孢镰孢菌细胞壁降解酶、尖孢镰孢菌对寄主的定植及对植物防卫物质的解毒等角度阐述了尖孢镰孢菌致病机理,总结了近几年克隆的15个尖孢镰孢菌致病相关基因、基因功能以及筛选致病基因的策略;概括了研究致病机理和致病基因的意义。     

胡椒炭疽菌的生物学特性研究

对从海南5个地区胡椒园中分离获得的10个炭疽菌分离系进行形态特征、温度、pH值及致病力等生物学特性测定。结果显示,炭疽菌菌丝生长28℃为适温,pH6～7为最佳条件;菌丝生长的最佳碳源是葡萄糖;自然光照最有利于菌丝生长;10个菌系菌落形态特征、菌丝生长速率和致病力有较大差异,其中以采自中坤农场的PC08和PC09菌株菌丝生长最快,采自澄迈大拉的PC04和PC05菌株菌丝生长最慢。研究结果为胡椒炭疽病的防治提供了理论依据。     

人畜共患病病原——猪螺杆菌及其研究进展

猪螺杆菌(Helicobacter suis, H. suis),革兰氏阴性菌,具有典型螺旋状外形,菌体末端因有平均4—10个鞭毛而具有高度的活动性。猪螺杆菌是一种重要人畜共患病病原,近些年才被比利时科学家分离并成功体外培养。猪螺杆菌不同于主要感染人的幽门螺旋杆菌,猪螺杆菌主要感染大部分的猪,处于屠宰年龄的猪的感染率约在60%—95%。猪螺杆菌感染主要导致猪发生胃炎,胃部不适和降低猪的体重增加率。更重要的是,猪螺杆菌也感染部分人,造成患者发生各种胃部不适、胃病甚至胃癌(如粘膜相关淋巴组织淋巴瘤)。猪螺杆菌感染后虽然引发了机体强烈的先天免疫和适应性免疫应答,但是该菌进化了数种毒力因子用来逃避免疫系统的监控,最终可以持续地定植在宿主胃内,破坏胃上皮细胞稳态,引发慢性炎症,甚至胃癌。目前科学家对于猪螺杆菌的传播途径还不是很清楚,猪肉和相关制品,唾液,粪便可能是造成细菌传播的途径。猪、小鼠和蒙古沙鼠是目前常用的研究猪螺杆菌致病机理的动物模型。虽然猪螺杆菌对猪的健康、生产性能和动物福利乃至人的健康有重要影响,但是由于猪螺杆菌分离培养比较困难,细菌体外培养需要微需氧环境(85%N2,10%CO2和...     

病程相关蛋白质在水稻与白叶枯病菌互作过程中的表达

【目的】了解病程相关(pathogenesis-related,PR)蛋白质在植物防卫体系中的表达模式进而探讨水稻抗病的分子机理。【方法】选取10个前期工作中鉴定的差异转录PR基因,利用免疫印迹(Western blotting,WB)技术检测它们在水稻正常生长和与白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae Xoo)互作过程中的表达丰度变化。【结果】发现随着水稻的生长,Os12g43380、Os12g36830、Os12g36860、Os12g36840、Os02g41670、Os05g35290和Os12g33610的表达逐步增加,一般在开花期达到最高,成熟期有所降低。在白叶枯病抗性基因Xa21介导的水稻-Xoo非亲和互作过程中,检测到Os01g51570、Os01g71680和Os12g36850的表达量上调,Os12g36830、Os12g36840、Os02g41670和Os05g35290的表达量下调,并且发现,在亲和互作和非亲和互作反应中PR蛋白质的变化模式相似。对PR基因上游启动子区进行分析,发现存在与抗病相关的顺式作用元件,其中,ARE、HSE、MBS、TC-rich repeats等元件在抗病相关的PR基因上游出现频率较高。【结论】鉴定了在水稻-Xoo互作过程中发生丰度变化的7个PR蛋白质。     

三角帆蚌十六种同工酶系统的表型及其在瘟病病蚌中的病理变化

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对我国三角帆蚌(Hyriopsis cumingii Lea)11种组织中16种同工酶系统的酶谱表型、组织分布、活性含量和迁移特征进行了分析,并就不同酶谱特征与基因表达状况作了讨论。证实酯酶和α-磷酸甘油脱氢酶的表型和活性含量在病蚌体内有明显的紊乱现象,表明三角帆蚌瘟病的病理机制与消化系统脂类代谢异常有密切关系。消化系统两种酶谱的特异性变化,可作为瘟病早期诊断的生化辅助指标。     

量子点在兽医领域应用研究进展

量子点具有独特的光学性质,近年已在材料科学、分析化学、生命科学、医学检验等学科领域得到广泛研究和应用.作为一种新型的荧光标记材料,量子点在兽医领域越来越受到重视.作者就量子点的特性、种类及其在兽医领域的研究做一综述,并提出了未来研究方向,为拓展量子点在动物疫病诊断、兽药研发、致病机制等方面的研究提供参考.     

Capsular polysaccharide of Streptococcus agalactiae is an essential virulence factor for infection in Nile tilapia (Oreochromis niloticus Linn.)

Streptococcus agalactiae (Group B Streptococcus, GBS) is associated with diverse diseases in aquatic animals. The capsule polysaccharide (CPS) encoded by the cps gene cluster is the major virulence factor of S. agalactiae; however, limited information is available regarding the pathogenic role of the CPS of serotype Ia piscine GBS strains in fish. Here, a non‐encapsulated mutant (Δcps) was constructed by insertional mutagenesis of the cps gene cluster. Mutant pathogenicity was evaluated in vitro based on the killing of whole blood from tilapia, in vivo infections, measuring mutant survival in tilapia spleen tissues and pathological analysis. Compared to wild‐type (WT) GBS strain, the Δcps mutant had lower resistance to fresh tilapia whole blood in vitro (p < 0.01), and more easily cleared in tilapia spleen tissue, and was highly attenuated in tilapia and zebrafish. Additionally, compared to the Δcps mutant, numerous GBS strains and severe tissue necrosis were observed in the tilapia spleen tissue infected with WT strains. These results indicated that the CPS is essential for GBS pathogenicity and may serve as a target for attenuation in vaccine development. Gaining a better understanding of the role, the GBS pathogenicity in fish will provide insight into related pathogenesis and host–pathogen interactions.     

A study of gross,histological and blood biochemical changes in rainbow trout,Oncorhynchus mykiss (Walbaum), with rainbow trout gastroenteritis (RTGE)

The mechanisms behind the pathogenesis of rainbow trout gastroenteritis (RTGE) are still unknown. This study examined the macroscopic and microscopic changes in trout with RTGE (RTGE+), as well as the blood chemistry. A total of 464 rainbow trout were sampled from 11 sites in the UK, comprising 152 RTGE+ fish and 330 random, apparently healthy fish. A case definition for RTGE was assessed by the analysis of its agreement with three laboratory tests: histopathology, packed cell volume and kidney bacteriology. Cluster analysis indicated the presence of three distinct presentations within the population of RTGE+ fish. Cluster A included gross signs associated with moribund RTGE+ fish, and clusters B and C identified gross signs consistent with concurrent diseases, notably furunculosis, enteric redmouth and proliferative kidney disease. The information gained was used to select RTGE+ fish without concurrent disease for the analysis of RTGE pathogenesis with blood biochemistry. This analysis revealed a severe osmotic imbalance and a reduced albumin/globulin ratio as indicatives of selective loss of albumin. These findings are compatible with a protein losing enteropathy.     

环核苷酸门控离子通道与疾病发生

细胞离子通道的结构和功能正常是维持生命过程的基础,其基因变异和功能障碍与许多疾病的发生和发展有关。文章综述了环核苷酸门控离子通道的类型、功能、研究方法及其与疾病的关系。