海洋贝类提取物对血管平滑肌细胞增殖的影响

采用20％胎牛血清（FBS），碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)所诱导的大鼠VSMCs增殖模型，观察了海洋贝类提取物（ESs)对血管平滑肌细胞（VSMCs)增殖的影响。将培养的5－8代细胞接种于96孔板，除正常组加入含0．4％FBS的M199培养液外，其他组均加入含20％FBS培养液（或含50ng/ml bFGF的0．4％FBS培养液），同时给药组分别加入含有25，50，100μl/ml浓度的ESs，孵育48h后，以细胞计数，结晶紫染色及MTT比色法VSMCc生长情况。结果表明，与模型组比较，ESs各剂量组VSMCs的增殖受到明显抑制（P＜0．05，P＜0．01）。ESs对20％FBS和bFGF所致的VSMCs增殖具有明显抑制作用，并存在剂量依赖关系。     

大头鲤、黑龙江鲤、德国镜鲤及其杂种F3肌肉品质的比较

对大头鲤、黑龙江鲤、德国镜鲤及杂种F3背部肌肉的肉色、嫩度、pH、失水率、系水力和肌纤维性状进行研究,评价杂种F3的肌肉品质.结果表明:(1)杂种F3肌肉的亮度为47.37,红度为1.85,黄度3.27,嫩度为1.65 kg·f,pH 6.62,失水率为22.54%,系水力为97.30%,肌纤维的横截面积为128.76 μm2,纤维的密度为每平方毫米183.38根,肌纤维面积的比例为55.55%.(2)杂种F3与亲本肌肉品质的比较,肉色亮度与黑龙江鲤相近,高于大头鲤和德国镜鲤;红度与大头鲤和黑龙江鲤相近,低于德国镜鲤;嫩度与大头鲤相近,小于黑龙江鲤和德国镜鲤;肌纤维的横截面积与大头鲤相近,小于黑龙江鲤和德国镜鲤;肌纤维密度与大头鲤相近,大于黑龙江鲤和德国镜鲤;pH、失水率、系水力、肉色的黄度和肌纤维面积的比例与3亲本差异不显著.研究表明杂种F3具有与大头鲤相似的肌肉品质,经进一步选育可以育成一个优质的鲤新品系.     

野生及养殖哈氏仿对虾肌肉营养成分的分析与比较

为了解哈氏仿对虾肌肉的营养特征,采用生化分析手段对野生及养殖哈氏仿对虾肌肉进行营养成分分析并对营养品质进行分析与比较.结果显示,野生群体肌肉中水分和粗蛋白含量(分别为79.42％和17.94％)与养殖群体(分别为79.28％和17.95％)没有显著差异;野生群体的粗脂肪含量(0.89％)显著低于养殖群体(1.12％),而粗灰分含量(1.44％)显著高于养殖群体(1.31％).在18种检测出的氨基酸中,有9种氨基酸的含量,野生群体比养殖群体显著低,另外9种在两群体间没有差异.野生群体的氨基酸总量(TAA)、必需氨基酸(EAA)、非必需氨基酸(NEAA)、鲜味氨基酸(DAA)、虾味氨基酸(SAA)含量(分别为83.42％、29.69％、43.59％、32.54％和21.11％)均比养殖群体(分别为88.08％、30.53％、47.39％、34.47％和21.72％)显著低;野生群体的必需氨基酸指数(EAAI)和支链氨基酸与芳香族氨基酸的比值(F值)(分别为66.41和2.07)也明显低于养殖群体(分别为69.10和2.12).野生群体的饱和脂肪酸(∑SFA)和多不饱和脂肪酸(∑PUFA)(分别为41.95％和39.51％)相对百分含量比养殖群体(分别为39.60％和36.64％)均明显高,而野生群体的单不饱和脂肪酸∑MUFA(18.54％)相对百分含量比养殖群体(23.76％)明显低;野生群体肌肉中油脂的EPA+DHA相对百分含量(28.23％)比养殖群体(25.66％)明显高,但在野生和养殖群体间肌肉中的EPA+ DHA绝对含量没有明显差异.研究表明,哈氏仿对虾肌肉营养价值较高、肉味鲜美,人工养殖没有造成其肌肉脂肪的大量富集和脂肪酸组成及含量的急剧变化,相反使该虾的蛋白质营养价值更高.     

饲料蛋白对翘嘴红鲌蛋白质周转代谢的影响

选择健康的翘嘴红(体重12.84±0.60g)为试验鱼,以红鱼粉为蛋白源,配制5个蛋白水平(31.04%、35.51%、40.89%4、6.62%、50.33%)的等能、等必需氨基酸(EAA)平衡关联度的半精制饲料;又以豆粕替代鱼粉,大豆蛋白分别替代0、13.5%、27%、40.5%、54%的鱼粉蛋白,配制5个EAA关联度的等蛋白(40%)、等能(20MJ.kg-1)的半精制饲料,探讨饲料蛋白水平和大豆蛋白对鱼粉蛋白的替代对翘嘴红肌肉和肝胰脏蛋白质周转代谢的影响。8周饲养结果表明,饲料蛋白水平对翘嘴红的特定增重率(SGR)具有显著性影响(P<0.05),40.89%饲料蛋白组的SGR显著高于31.04%、35.51%饲料蛋白组(P<0.05),但与46.62%和50.33%饲料蛋白组没有显著性差异(P>0.05);饲料蛋白水平对白肌、肝胰脏蛋白质生长率具有相似的影响,40.89%饲料蛋白组的白肌、肝胰脏蛋白质生长率分别达到2.13%.d-1,显著高于31.04%和35.51%两组(P<0.05),但与46.62%和50.33%饲料蛋白组无显著性差异(P>0.05)。饲料蛋白水平的增加促进了翘嘴红的生长和蛋白质的合成。肌肉蛋白质合成率(Ks)、蛋白质降解率(Kd)随饲料蛋白水平的增加而增加(P<0.05),肌肉蛋白质的增加归因于蛋白质合成的增加较降解的增加更占优势,蛋白质的沉积率在适宜蛋白水平时最高。当大豆蛋白分别替代13.5%2、7.0%4、0.5%的鱼粉蛋白时,翘嘴红的SGR与对照组差异不显著(P>0.05),而且都显著高于54.0%替代组(P<0.05)。白肌蛋白质生长率(Kg)也显著受到大豆蛋白替代的影响(P<0.01),当饲料中大豆蛋白对鱼粉蛋白替代量为40.5%时,与对照组相比,Kg极显著下降(P<0.01)。随着饲料中大豆蛋白对鱼粉蛋白替代量的增加,白肌Ks随之降低,当饲料中大豆蛋白对鱼粉蛋白替代量达54%时,与对照组相比,肌肉Ks显著下降(P<0.05)。白肌Kd与白肌Ks的变化趋势相似(P<0.1),而PDE没有受到饲料中大豆蛋白对鱼粉蛋白替代的影响(P>0.05)。可见随着大豆蛋白对鱼粉蛋白替代量的提高,氨基酸平衡关联度逐渐降低,蛋白质合成逐渐降低(P<0.05),生长下降,饲料必须氨基酸平衡程度的变化没有改变蛋白质的沉积效率。     

菊苣子叶离体培养与植株再生的研究

以菊苣无菌苗的子叶为外植体,研究其在附加不同浓度NAA和6-BA的培养基上的分化情况.结果表明:在不同培养基上,菊苣子叶均能诱导出淡黄色的愈伤组织和分化形成不定芽,但不同基因型菊苣的出愈率和不定芽诱导存在明显差别.诱导Rossa di Verona tardiva selez prelude和Rossa di treviso菊苣愈伤组织形成和芽分化的最佳培养基为MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 2 mg/L;而诱导In miscuglio菊苣愈伤组织和芽分化的最佳培养基为MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 3 mg/L.     

花椰菜雄性不育系组培快繁及无糖培养技术

以花椰菜雄性不育亲本的花球为外植体,进行组培快繁及无糖生产技术的研究。结果表明：在MS＋BA 1.0 mg/L＋NAA 0.3 mg/L的培养基上诱导,25 d时不定芽的分化率达到96%,继代增殖在MS＋BA 0.6 mg/L＋NAA 0.1 mg/L的培养基效果最好,增殖率可达4.25倍。无糖组织培养的培养基为MS无机成分＋NAA 0.1,光照4 000 lx,CO2浓度1 000 mL/L,11 d可大量生根。通过上述方法,1个花球,在4个月可生产上万株组培苗,是一种高效快速的方法。     

cDNA cloning and complete primary structures of myosin heavy chains from brushtooth lizardfish Saurida undosquamis and wanieso lizardfish S. wanieso fast skeletal muscles

ABSTRACT:   The complete cDNA sequences encoding predominant types of myosin heavy chain (MYH) in the fast skeletal muscle were determined for brushtooth lizardfish Saurida undosquamis and wanieso lizardfish S. wanieso , which are used as materials for preparing high-quality surimi-based products. The cDNA consisted of 5973 and 5987 bp, respectively, and both encompassed an open reading frame encoding a polypeptide of 1936 amino acid residues. Brushtooth and wanieso lizardfish MYH showed the amino acid sequence identity of 92–93% to white croaker MYH, which was higher than that of 90% to walleye pollack MYH. The putative binding sites for ATP, actin, and regulatory and essential light chains in the subfragment-1 region of brushtooth lizardfish MYH exhibited a high identity with white croaker counterparts as well as the sequences of subfragment-2 and light meromyosin. In contrast, phylogenetic tree, constructed by the neighbor-joining method based on mitochondrial 16S rRNA gene, revealed that the two lizardfish species formed a cluster with walleye pollack, which was paraphyletic with white croaker. Therefore, a good reputation for lizardfish and white croaker to have a high thermal-gel forming ability seemed to be reflected by MYH rather than biological similarity as revealed by the mitochondrial 16S rRNA gene.     

三角帆蚌细胞周期蛋白基因筛选及其表达分析

细胞周期蛋白(cyclin)对细胞生长繁殖起到关键的调节作用。该研究采用高通量测序技术,构建了三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)转录组文库,进行了cyclins基因筛选与生物信息分析,通过qRT-PCR技术,探讨其在不同组织(闭壳肌、内脏团、外套膜、斧足、心脏、血液、鳃、性腺)与性别中的表达特征。转录组测序共得到257 457条unigene(N50为1 796 bp),注释率为86.7%;通过分析,cyclin A、cyclin D2、cyclin E被筛选出,且cyclin A、cyclin D2与cyclin E蛋白的氨基酸序列均与美洲牡蛎(Crassostrea virginica)、太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)具有较高相似性。实时荧光定量分析结果表明,cyclin A、cyclin D2、cyclin E在三角帆蚌各组织中均有表达,且存在显著的组织差异:cyclin A、cyclin E基因在性腺中表达量显著高于其他组织(P<0.05),在斧足中表达量最低;cyclin D2基因在鳃中表达量最高(P<0.05),在血液中表达量最低。在同一组织的不同性别之间:cyclin A基因在性腺、闭壳肌、心脏、血液中表达存在显著性别差异(P<0.05);cyclin D2在外套膜、心脏、性腺中的表达具有显著(P<0.05)的性别差异;cyclin E在性腺、斧足、鳃、心脏中的表达具有显著(P<0.05)的性别差异;cyclin A、cyclin E基因在雌性心脏和性腺中表达量显著(P<0.05)高于雄性,而cyclin D2反之(P<0.05),cyclin D2基因在雌性外套膜表达量显著高于雄性(P<0.05),暗示cyclin A、cyclin E与性腺发育关系密切,cyclin D2可能与鳃损伤修复有关。本研究初步探究了三角帆蚌cyclin A、cyclin D2、cyclin E基因的功能,为建立三角帆蚌细胞系提供了分子基础。     

水稻雌雄不育突变体Osfma2的细胞学观察及基因图位克隆

【目的】通过构建分离群体定位并克隆水稻雌雄不育基因OsFMA2,并对其在水稻育性调控中的功能进行探究。【方法】通过EMS诱变水稻宁粳4号得到稳定的不育突变体,对突变体进行表型及细胞学观察,利用精细定位和Mut-map相结合的方法克隆了水稻雌雄不育基因OsFMA2,通过实时荧光定量PCR检测其在各组织表达水平差异,利用水稻原生质体表达系统进行OsFMA2蛋白的亚细胞定位。【结果】细胞学观察发现突变体为雌雄不育。利用极端个体将其精细定位于水稻第6染色体长臂448 kb的区间内。结合全基因组重测序结果,最终确定OsFMA2为目标基因。该基因编码一个复制蛋白,在单子叶植物中高度保守。OsFMA2具有组织特异性,在幼穗中高表达。亚细胞定位结果显示OsFMA2蛋白定位于细胞核中。【结论】OsFMA2在幼穗中高表达,可能参与了水稻雄配子第一次减数分裂前期同源重组过程,同时,OsFMA2的表达对雌配子发育也产生了不利影响。     

水稻粳粳交花药培养继代愈伤组织分化培养基的优化

以继代的粳粳交（空育131／稻花香2号）F。花药培养的愈伤组织为试验材料,研究培养基中的影响因素,对已有的培养基进行优化。共用20种培养基进行分化,涉及7种影响因素：谷氨酰胺,糖类,激素,山梨醇,铜、银离子组合,硅素和活性炭。结果表明：（1）长时间继代的愈伤组织仍具有分化能力。（2）可以显著提高绿苗分化率的因素为60mg／L硅素,0.25mg／LAgNOs和0.75mg／L CuSO4·5H2O。（3）加160目活性炭的培养基中愈伤生长状况得到很大改善。（4）最佳分化培养基为G1W3。