宰后肌肉中肌球蛋白磷酸化调控肌动球蛋白解离作用机制

【目的】研究宰后肌肉中肌球蛋白磷酸化与肌动球蛋白解离之间的关系,分析其磷酸化水平的变化对肌动球蛋白解离的影响,探究肌球蛋白磷酸化对宰后肌肉肌节长度与嫩度的作用。【方法】取宰后30 min内的羊背最长肌,在4℃条件下分别成熟6、24、48和72 h,通过SDS-PAGE电泳、Pro-Q染色和蛋白质免疫印迹测定肌球蛋白的磷酸化水平和肌动球蛋白解离程度随宰后时间的变化;测定肌动球蛋白ATP酶的活性,分析宰后不同时间点肌球蛋白与肌动蛋白结合作用力的强弱;采用透射电镜分析宰后肌节长度随时间的变化。【结果】研究发现宰后肌肉中肌球蛋白轻链2的磷酸化水平在0.5—48 h快速降低(P0.05),并在48 h达到最低点,在48—72 h有所升高(P0.05),但其最终磷酸化水平明显低于初始值。肌动球蛋白的解离程度在宰后初期(0.5—6 h)显著降低(P0.05),在6—48 h显著升高(P0.05),并于48—72 h维持稳定,其最终解离程度显著高于宰后0.5 h的初始值。肌动球蛋白ATPase活性在宰后初期(0.5—6 h)略有升高,6—24 h快速上升(P0.05),并在24 h达到最高点,24—72 h逐渐降低;而肌节长度的变化则与之相反,呈先下降后上升的趋势,并在24 h达到肌节最短点。【结论】羊宰后肌肉中的肌球蛋白轻链2磷酸化水平的变化对肌球蛋白与肌动蛋白的相互作用有较大的影响,且肌节收缩(肌球蛋白与肌动蛋白的相互作用力)与肌动球蛋白的解离(肌球蛋白与肌动蛋白的相互作用量)并不是一个同步的进程。肌球蛋白轻链2的磷酸化修饰负向调控肌动球蛋白解离和肌动球蛋白ATPase活性,导致肌节的收缩与舒张,进而调控肉品最终的嫩度。     

维生素E缺乏对鲤骨骼肌损伤的影响

本文旨在探讨VE缺乏对鲤骨骼肌损伤的形态学影响。在半纯合日粮中分别添加0、25、50和100 mg/kg的VE,投喂体重约60 g的鲤鱼20周。结果表明:鲤鱼摄入VE缺乏的饲料后,出现“瘦背症”、脊柱弯曲及以突眼、竖鳞和腹水为特征的渗出性素质样病变。病理剖解见体壁肌肉萎缩,特别是背部两侧肌肉萎缩变薄,其厚度仅为对照组的1/4~1/2,似刀刃状;体侧红肌纤维褪色变白,呈白肌肉外观。组织学变化主要表现为肌营养性不良,骨骼肌变性、坏死,淋巴细胞和单核细胞浸润,大量结缔组织增生,残存的肌纤维萎缩变细。超微结构上表现为骨骼肌细胞核膜间隙增宽,呈锯齿状,并发生局部或广泛性的断裂,核变形,电子密度降低;肌浆内糖原颗粒明显减少,线粒体肿胀,嵴断裂,甚至溶解呈空囊泡状,肌原纤维的横纹模糊不清或完全消失。结论:日粮中0、25和50 mg/kgVE水平会导致鲤出现VE缺乏症,其骨骼肌主要表现为变性、坏死、肌萎缩和炎症细胞浸润的肌营养性不良。     

MYLPF基因在肉牛肌肉生长过程中的功能研究

试验旨在探究快肌肌浆球蛋白可调节磷酸化轻链（myosin light chain,phosphorylatable,fast skeletal muscle,HUMMLC2B或MYLPF）基因在布莱凯特黑牛各组织中的表达情况,以及布莱凯特黑牛与鲁西黄牛背最长肌中MYLPF基因表达量的变化规律,为探讨其与肌肉生长发育关系奠定基础。以布莱凯特黑牛和鲁西黄牛为研究对象,利用实时荧光定量PCR检测其背最长肌、心脏、肺脏、肝脏、脾脏等10个组织中MYLPF基因的表达情况,并对布莱凯特黑牛和鲁西黄牛2、6、10和12月龄4个不同时期背最长肌中MYLPF基因的表达量变化进行研究。结果表明,MYLPF基因在背最长肌中高表达,在心脏中少量表达,在其他组织中几乎不表达。MYLPF基因在2、6、10和12月龄牛背最长肌中均高表达,但随着年龄的增加MYLPF基因的表达量逐渐降低,2月龄的表达量最高,极显著高于其他3个时期（P<0.01）,12月龄表达量最低。4个时期布莱凯特黑牛背最长肌中MYLPF基因的表达量均高于鲁西黄牛,其中10月龄差异极显著（P<0.01）,2和12月龄差异显著（P<0.05）,6月龄差异不显著（P>0.05）。综上结果表明,背最长肌中MYLPF基因可能对骨骼肌生长发育起调节作用,可为研究肉牛骨骼肌生长发育机理和阐明肌肉生长的分子机制提供参考。     

姜曲海猪瘦肉型品系(零世代)仔猪背最长肌肌内脂肪酸组成及含量的研究

选取姜曲海猪瘦肉型品系(零世代)仔猪24头,按初生及15、30、45、60、75日龄分成6个阶段,每日龄段4头,分别屠宰后取3～5 g背最长肌,经甲酯化后用气相色谱法测定各日龄段的肌内脂肪酸含量。结果表明:饱和脂肪酸含量随着日龄的增长(初生～60日龄)而逐渐减少,60～75日龄又有所升高。不饱和脂肪酸含量在断奶前较稳定(600 mg·g-1左右),断奶～60日龄降至505.1 mg·g-1,此后又升高至75日龄的620.0 mg·g-1;不饱和脂肪酸(主要为单不饱和脂肪酸)含量较高,这是该品系猪肉质优良的种质特性指标之一。     

草鱼加热过程中肌肉蛋白质的热变性

The variations of muscle tissus, peroxidase and Ca2^2 -ATPase activities and Vp (pasteurization value) were investigated with the fresh samples of grass carp ( Ctenopharyngodon idellus ) heated at different temperatures, thus revealing the mechanism of denaturation of muscle protein by heating. The experimental results showed the great difference in muscle tissue structure before and after the samples heated. In the initial stage of heating the water loss accounted for 50% of the total. When the samples were separately heated at 75, 85, and 95℃, fk values (dehydration curve slope) were 5, 4.1 and 1.7, respectively, while Vp reaching 40 minutes were 22, 8 and 5 min, respectively. As to the time for deactivation of peroxidase in the heated samples at the various temperatures, it varied from 38, 10 and to less than 6 min, respectively and the deactivation rates of Ca^2 -ATPase in 1 min were 50%, 88% and 100%, respectively. Consequently, the higher temperature the sample was heated, the faster rate of thermocon ductivity, the lower rate of water loss, and the faster rate of peroxidase deactivation it was. Also, the Vp for the least requirement of pasteurization ( Vp≥40min) was obtained.     

不同冻存法对肌肉冰冻切片后HE染色和肌球蛋白ATP酶染色效果的影响

使用分步法和一步法冻存巴马香猪背最长肌,冰冻切片后比较苏木精-伊红染色法(HE染色)和肌球蛋白三磷酸腺苷酶染色法(ATP酶染色)效果。结果表明:分步法冻存的肌肉样品冰晶少,细胞形态完整,HE染色效果好,核质明显;ATP酶染色效果好,可较好地区分Ⅰ型Ⅱ型肌纤维。一步法冻存的肌肉样品冰晶多,细胞形态不完整,HE染色效果差,核质模糊;ATP酶染色效果差,基本染不上色,无法对肌纤维类型进行区分。分步冻存法的建立为通量式制备猪肉的恒冻切片奠定了基础,也为进一步开展相关性状的生理学、遗传学及种猪选育提供了很好的表型测定方法。     

兰尼定受体基因(RYR1)在藏猪背最长肌组织中的差异表达

兰尼定受体(rynodine receptor 1,RYR1)基因又称氟烷基因,已证明为猪应激综合征发生的主效基因。该基因的表达常常和猪肉质性状劣变相关联,因而具有较重要的研究前景。为了研究该基因在个体不同发育时期表达的规律性变化,为进一步深入研究该基因和肉质性状间的关系,本研究采用实时荧光定量PCR方法检测了藏猪背最长肌组织中RYR1基因在2、4、6和8月龄间表达为mRNA的量的差异。结果表明:不同月龄藏猪背最长肌中RYR1基因mRNA的表达量波动起伏,2月龄时表达量最高,4月龄表达量较2月龄极显著下降(;P;<;0.01),6月龄又极显著上升(;P;<;0.01),至8月龄极显著降低到最低水平(;P;<;0.01)。本文初步揭示了藏猪RYR1基因表达在不同发育时期的变化,为进一步研究;RYR;1基因提供了基础数据。     

基于数学形态学的牛肉图像中背长肌分割和大理石纹提取技

牛肉图像中背长肌区域的分割和大理石纹提取是利用计算机视觉评定牛肉胴体等级的重要步骤.研究了利用数学形态学的方法来分割牛肉眼肌切面图像中背长肌区域并将大理石纹提取出来的技术.眼肌切面图像经过去除背景并进行肌肉和脂肪像素识别等预处理后,再用形态学腐蚀与膨胀相结合获得背长肌区域图像,通过图像逻辑运算提取大理石纹.结果表明,这种方法能有效地把背长肌区域与其周围肌肉组织分离开来并提取大理石纹.