猪瘟野毒感染抗体阻断ELISA检测方法的建立与初步评价

以猪瘟野毒E2蛋白为包被抗原、辣根过氧化物酶标记的猪瘟野毒单抗作为酶标抗体,建立检测猪瘟野毒抗体的阻断ELISA方法。猪瘟野毒E2最适包被浓度为0.03μg/mL,待检血清最适稀释度为1∶4,酶标猪瘟野毒单抗稀释度为1∶1 000。用建立的阻断ELISA方法检测369份临床阴性血清,计算阻断率,确定临界值,阻断率>40%为猪瘟野毒抗体阳性,阻断率≤40%为猪瘟野毒抗体阴性。用建立的ELISA方法检测84份血清,其中78份为免疫猪瘟疫苗的血清,6份为猪瘟病毒感染血清。结果显示,78份免疫血清均检测为猪瘟野毒抗体阴性,6份猪瘟感染血清均检测为猪瘟野毒抗体阳性。因此可初步判定该方法可用于鉴别诊断猪瘟病毒自然感染动物和C株疫苗免疫动物的血清抗体,并为临床检测猪瘟野毒抗体提供便捷、快速,精准的检测工具,对猪瘟的临床诊断、预防以及猪瘟净化工作具有非常重要的参考意义。     

Adjusted method of penis fixation during boar semi-automatic semen collection aiming to reduce bacterial contamination

Semen collection has an essential role in the initial bacterial load in boar ejaculates and extended semen. The study aimed to explore the efficacy of an adjusted penis fixation in a semi-automatic collection system on reducing bacterial contamination of ejaculates in two-boar studs with different scenarios. Historically, stud A had low levels of bacterial load in raw semen, while stud B had a high level of contamination. A total of 56 mature boars had their semen collected using two methods of penis fixation: (a) Traditional: The penis was fixed directly with the artificial cervix and transferred to the adjustable clamp; (b) Adjusted: The fixation was performed with one gloved-hand, and after exteriorization, the penis was gripped using the artificial cervix with the other gloved-hand and transferred to the adjustable clamp. The bacterial load (p = .0045) and the occurrence of ejaculates >231 CFU/ml (p = .0101) were reduced in the Adjusted compared to the Traditional method. Bacterial load was reduced when using the Adjusted method in stud B (p = .0011), which showed a greater occurrence of critical factors for bacterial contamination (p ≤ .0034). The Adjusted method reduced the occurrence of ejaculates >231 CFU/ml when the preputial ostium was dirty (p = .016) and the duration of semen collection was >7 min (p = .022) compared to the Traditional method. In conclusion, the Adjusted penis fixation was efficient in reducing bacterial load of ejaculates, mainly in boar stud B, which had high contamination challenges.     

猪戊型肝炎病毒ORF3蛋白影响HepG2细胞核黄素代谢的lncRNA-mRNA调控网络的鉴定

为初步鉴定并挖掘出猪戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)ORF3蛋白影响HepG2细胞核黄素代谢信号通路的lncRNA-mRNA调控网络,本试验通过构建腺病毒过表达载体,制备高滴度过表达腺病毒,介导猪 HEV-ORF3在HepG2细胞中实现过表达。Western blotting检测ORF3蛋白过表达成功后,运用lncRNA高通量组学测序,筛选出差异表达的lncRNA并进行靶向差异基因预测,对lncRNA靶向差异基因进行GO功能和KEGG通路富集分析,初步鉴定出与核黄素代谢信号通路相关的lncRNA-mRNA调控网络。Western blotting结果显示,在约为12 ku处出现目的条带,说明成功实现腺病毒介导猪HEV-ORF3在HepG2细胞中过表达。lncRNA高通量组学测序结果显示,共发现102个显著差异表达lncRNAs表达量上调,80个显著差异表达lncRNAs表达量下调。GO功能和KEGG通路富集分析显示,初步挖掘出lncRNA(MSTRG.13995.2)和lncRNA(MSTRG.1960.1)可能是与核黄素代谢信号通路相关的显著差异表达lncRNA,分别通过顺式调控其靶向基因APC-5和FLAD1来影响核黄素代谢信号通路。本试验初步鉴定出lncRNA(MSTRG.13995.2)-APC5和lncRNA(MSTRG.1960.1)-FLAD1可能是影响HepG2细胞核黄素代谢信号通路的lncRNA-mRNA调控网络。     

浅谈非洲猪瘟生物安全防控策略

非洲猪瘟是猪的一种急性、烈性传染病,一旦发病,致死率达100%,会给整个养猪业和社会经济造成巨大损失,目前尚没有效疫苗和特效治疗药物,因此非洲猪瘟的生物安全防控对于预防该病的发生具有重要意义。文章从非洲猪瘟的病原学特点流行现状、诊断方法、疫苗研制和生物安全防控要点等几方面进行叙述,旨在为该病的生物安全防控提供一定的理论参考价值。     

猪场生物安全体系中十个通道的设计应用

2018年8月开始,非洲猪瘟在我国快速多点发生,该病是高度接触性传染性疾病,目前无有效的疫苗和药物控制,各大公司和养殖户开始了猪场生物安全体系的升级改造。两年后我国大部分猪场的成功复产,全国生猪出栏量的大幅提升,证明了生物安全措施巨大效力;同时在严格的生物安全措施下创新了精准剔除、快速复产等操作,进一步证明了生物安全措施的有效作用。文章主要介绍猪场生物安全体系中入口(大门)和出口(后门)最为关键防线处的通道设计,方便所有的生物安全操作能够高效落实,切断病原轻易进出猪场的途径。     

家庭猪场防控非洲猪瘟的关键点分析

非洲猪瘟对家庭猪场的生产稳定性带来极大的挑战。文章分析了家庭猪场防控非洲猪瘟存在的问题及对关键点针对性的防控措施。     

切断传染源与传染途径对防治猪病重要性

近年,生猪养殖产业不断向着集约化规模化方向发展,养殖密度增加的同时,各种传染性疾病呈现高发趋势。猪传染性疾病发生后,会造成生长发育不良,行动迟缓,生理指标失衡,甚至引发死亡,带来的经济损失不可估量,某些人畜共患病还会威胁人类的身体健康。在疫病防控过程中,需要从传染源、传播途径和易感群体等角度出发,减少养殖环境病原数量,切断病原传播途径,保护易感群体,确保生猪健康生长。该文主要结合一个乡镇的疫病流行特点,分析切断传染源和传播途径对防治猪病发生流行的重要性。     

规模化猪场非洲猪瘟防控

非洲猪瘟疫情已经成为制约养猪业发展的头号杀手,生猪稳产保供任务引起高度重视,因此,防控非洲猪瘟疫情是各级政府和养猪企业的重点工作之一,该文主要论述规模化猪场非洲猪瘟防控措施。     

非洲猪瘟疫情防控难点与对策

目前肉制品的健康情况备受人们关注,而猪肉是人们餐桌上必不可少的肉制品之一,猪只的安全饲养对人类的生命健康有重要的影响。在饲养猪只中,可发生多种传染病,其中最主要的一种是非洲猪瘟,该传染病不仅具有高热性的特点,还具有高度接触性的特点,再加上目前对于该种疾病还没有特效的疫苗,以及有效的治疗措施,因此,做好该种疾病的预防工作至关重要。该文主要论述非洲猪瘟进行论述,并制定相应的防控措施。为减少猪只发病几率奠定良好的基础。