检测狂犬病病毒抗原的夹心间接Dot—ELISA的建立和应用研究

本研究建立了检测狂犬病病毒抗原的夹心间接斑点酶联免疫吸附试验(SI-Dot-ELISA).本法检出狂犬病病毒抗原的最低浓度为:0.01IU/mL的标准抗原,1:100000 (相当于20 LD_(50))的狂犬病病毒CVS株和鹿8202株的鼠脑悬液,1:400(相当于7906TCID_(50)/mL)的狂犬病病毒SAG株的细胞培养物.对多种健康动物的组织、健康细胞培养物以及犬瘟热病毒、犬腺病毒等检测均为阴性.用SI—Dot—ELISA、夹心间接ELISA(SI—ELISA)和小鼠脑内接种3种方法,检测了388份材料,检出的阳性份数分别为173、171和179,经统计学处理,3种方法在狂犬病病毒抗原的检测上,可以相互代替.甲醛灭活病毒不影响本方法的检测,而加入氢氧化铝胶后的病毒悬液则不能用本法检测.本法适用于狂犬病的诊断、流行病学调查、疫苗效价的测定和实验研究中病毒抗原的测定.     

河南大尾寒羊体重生长特性的研究

应用VonBertalanffy、Gompertz、logistic、幂函数非线性生长模型对河南大尾寒羊的生长进行了拟合,Gom-pertz和logistic方程能很好地反映河南大尾寒羊的生长特点。本品种具有较好的早熟性;粗放的饲养管理可导致羔羊断奶后体增重急剧减慢;利用回归方程计算的母羊适宜初配日龄为211￣240d。     

扁穗冰草不同地理种群cpDNAtrnT-trnL多态性分析

对91份不同产地扁穗冰草(Agropyron cristatum(L.)Gaertn)样品的遗传多样性和遗传结构进行研究。采用叶绿体cpDNAtrnT-trnL直接测序的方法和邻接法(NJ)对91份扁穗冰草样品进行遗传多样性和遗传结构分析。结果显示:物种水平上单倍型多样性(Hd)指数为0.608,核苷酸多样性(Pi)指数为0.00295;种群水平上Hd介于0~0.9722,Pi指数介于0~0.00749。分子方差分析表明,扁穗冰草大部分遗传变异(91.63%)发生在居群内,居群间的基因流(Nm=5.474)较高,群体内变异是扁穗冰草的主要变异来源;NJ树表明,受试的6个野生种群可分为4大类群。扁穗冰草的遗传多样性居群内遗传分化较大。     

营养限制对水貂补偿生长的影响

选取55只健康、体重相近的生长期水貂,随机分成5组,每组11只,进行了为期90d的试验。前50d饲喂基础日粮和基础日粮中的玉米粉分别用8．88％、17．77％、26．65％、35．53％的葡萄糖代替,同时添加适量的玉米蛋白粉制备成的5种等氮日粮。然后,各组均饲喂同样的鲜料。试验期间,每10d测1次体重,并记录,以研究营养限制对生长期水貂补偿生长的影响。试验结果表明：恢复常规饲喂后所有水貂体重都迅速增长,但是差异不显著（P〉0．05）。营养限制程度较重的第5组在补偿生长阶段体重增长较快,且超过限制程度较轻的组。在补偿生长后期,第Ⅳ、Ⅴ组的特定生长率较体重低的组显著下降（P〈0．05）。     

产前不同营养水平对围产期健康奶牛血清总胆红素、蛋白及转氨酶的影响

将健康的围产期奶牛30头随机分为三组，分别于产前28d开始饲喂NRC标准日粮（营养水平100％组，即Ⅰ组）、NRC标准增加20％日粮（营养水平120％组，即Ⅱ组）和NRC标准减少20％日粮（营养水平80％组，即Ⅲ组），产后各组奶牛均饲喂标准泌乳日粮，至产后56d结束，观察干奶期不同营养水平对围产期健康奶牛血清总胆红素、蛋白及转氨酶的影响。试验结果表明，围产期是机体生理状况处于剧烈变化的时期，奶牛产后的蛋白质代谢活动、转氨酶活性较产前明显增强；但健康奶牛均能通过调整糖代谢、脂代谢和蛋白质代谢，促进能量与营养物质间的相互转化，适应机体的各种生理变化。     

山羊成纤维生长因子受体（FGFR1）基因的多态性检测

选择与羊同源性较高的牛FGFR1基因组序列（NM_001110207）设计3对特异性引物,采用DNA池PCR直接测序法快速检测黔北麻羊FGFR1基因的多态性,并以内蒙古白绒山羊和关中奶山羊比较,结果表明：在引PCR产物中只有黔北麻羊检测到多态,分别处于外显子5和内含子5的T133C和C211T的碱基突变,而其他2个品种...     

几种草坪草对SO_2的净化效果研究

贵州省瓮福磷肥厂内因SO2污染,建植的草坪成坪后20~30 d开始出现SO2污染伤害症状,但伏生臂型草、假俭草、狗牙根、根丛型高羊茅和黔草1号高羊茅表现出一定的抗SO2污染和吸收净化能力。从含硫量的相对值分析,吸收和积累硫的能力依次为:狗牙根>黔草1号高羊茅>根茎型高羊茅>假俭草>伏生臂型草。结果表明草坪草对SO2的吸收和积累与距离污染源的远近有关,与草坪草在污染的空气条件下暴露时间的长短成正相关关系。     

表达猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-1a株核衣壳蛋白重组鸡痘病毒的构建

从含有猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）核衣壳蛋白（N）的质粒扩增出N基因，构建禽痘病毒转移载体。该载体含有禽痘病毒早晚期启动子LP2EP2控制之下的PRRSVN基因、P11启动下的报告基因lacZ以及用于同源重组的禽痘病毒基因组的片段。在转移载体转染亲本病毒S—FPV-017感染的鸡胚成纤维细胞（CEF）之后，采用蓝色表型筛选的方法，筛选到表达N基因的重组病毒，并对其进行了6轮蚀斑纯化。PCR方法鉴定证明重组病毒的基因组中含有完整PRRSVN基因，间接免疫荧光试验证明了PRRSVN蛋白在重组病毒感染的CEF细胞中获得表达，本研究为猪繁殖与呼吸综合征非复制型疫苗的研制打下了基础。     

传染性造血器官坏死病毒焦磷酸测序检测技术的建立

根据传染性造血器官坏死病毒(IHNV)基因序列,设计了IHNV最为保守的指纹序列,以及测序引物,建立了IHNV焦磷酸测序检测方法。对所构建的IHNV焦磷酸检测方法进行特异性试验和灵敏度检测。结果表明,所建立的方法特异性好,在8种鱼类病毒中能够特异性检测出目的病毒,检测方法灵敏度高,最低检出核酸量为10pg/μL。对建立的焦磷酸测序检测方法进行了实际应用研究,选取国内采集与进口的鱼类样本共计80批次进行IHNV检测。结果显示,焦磷酸测序检测方法可以有效的检出常规RTPCR不能检出的假阴性样本和弱阳性样本,该方法的灵敏度和特异性可以满足水生动物疫病检测的需要。     

黑龙江地区断奶仔猪腹泻大肠杆菌种系类群、血清型和毒力基因分析

揭示黑龙江地区集约化猪场仔猪断奶腹泻(PWD)直肠棉拭子分离到的123株大肠埃希菌所属种系分类群、O血清型及其与毒力基因的特征.采用常规凝集试验进行测定,种系分类群标记的ch uA、yjaA基因和TSPE4.C2DNA片段及肠毒素基因STa、STb、LT、SL T-2e采用PCR方法检测.在123株分离菌株中,除21株未定型、10株自凝外,测定出92株分离的血清型,覆盖18个血清型,其中以O8、O 9、O 149 3种血清型为主,共57株,占定型菌株的61.96％.环境共生的种系进化A群113株占91.87％,肠外强致病D种系进化群2株占1.63％.肠毒素检出菌株74,占分离株的60.16％,其中以STa、STb为主,共占肠毒素检出株的94.59％.结果显示黑龙江省PWD病原性大肠埃希菌优势血清型为O 8、O9、O149,大肠埃希菌肠毒素主要毒力因子为STa、STb,种系进化群为A.