CHO表达生长激素释放因子的生物活性测定

在对生长激素释放因子(GRF)基因改造和化学合成，并构建了其真核表达载体pCDNA3-GRF(1-32)的基础上．用Lipofectin将上述载体转染CHO细胞进行瞬时表达，采用体外单层垂体细胞培养的方法对表达的GRF(1-32)进行了体外生物活性测定，即先将垂体用酶进行消化，再将消化细胞培养，形成单层细胞，利用其能合成与释放生长激素的能力来检测GRF的活性。结果表明：表达产物可刺激生长激素释放，并且比对照组提高3．8倍，     

盐度对绿色杜氏藻生长速率、叶绿素含量及细胞周期的影响

在不同盐度梯度下,进行了盐度对绿色杜氏藻Dunaliellaviridis的生长、叶绿素含量和细胞周期影响的试验。结果表明:1)绿色杜氏藻在盐度为10时,生长速率和单位水体叶绿素含量最低,分别为0 121个/d和908 27μg/L;在盐度为60时,生长速率和单位水体叶绿素含量最高,分别为0 381个/d和1192 41μg/L。2)不同盐度下单位细胞叶绿素含量呈现高-低-高的变化趋势,盐度60时,单位细胞叶绿素含量最低,叶绿素a为2 32×10-6μg/个,叶绿素总量为3 31×10-6μg/个。3)盐度为60时,绿色杜氏藻的细胞周期S期最短,为36 9%,G2期为0 8%;盐度80时,绿色杜氏藻的G2期最短,为0 3%,S期为43 6%,即绿色杜氏藻在盐度为60～80时,S期、G2期最短,细胞进入分裂期所用时间最短。本试验结果表明,培养绿色杜氏藻以盐度60～80的水体最为适宜。     

由猪囊胚内细胞团分离胚胎干细胞的研究

以 PMEF为饲养层培养猪 7～ 9日龄囊胚分离 ES细胞 ,ICM初次传代时间为 4～ 7d,ES细胞传代时间为 4～ 5 d,ES细胞传至 1～ 5代的胚胎数分别为 1 2 (1 8.8% ) ,8(1 2 .5 % ) ,5 (7.8% ) ,3(4 .7% ) ,2 (3.1 % ) ,并进行体外分化和 AKP染色鉴定。对影响猪 ES细胞分离与克隆的因素进行比较 ,结果表明 :(1 ) 9和 1 4日龄小鼠胎儿 PMEF饲养层培养 9日龄猪囊胚 ,贴壁率 (83.3% ,88,9% ) ,ICM形成率 (75 .0 % ,77.8% )和 1代 ES细胞克隆率(2 5 .0 % ,2 2 .2 % )无显著性差异 (P>0 .0 5 )。 (2 ) 7,8和 9日龄胚胎随胚龄增加 ,胚胎贴壁率 (5 .9% ,5 7.1 % ,87,9% )和 ICM形成率 (0 .0 % ,2 8.6 % ,81 .8% )升高 ,差异显著 (P<0 .0 1 )。(3) 9日龄囊胚直径 0 .8～ 1 .2 m m培养36～ 4 8h贴壁 ,贴壁率 1 0 0 % ,ICM形成率 1 0 0 % ;直径 >1 .2 mm囊胚贴壁时间为 4 8～ 72 h,贴壁率 5 7.1 % ,ICM形成率 5 7.1 % ,差异显著 (P<0 .0 5 )。去除直径 >1 .2 m m囊胚部分滋养层细胞培养 36～ 4 8h,贴壁率 91 .7% ,ICM形成率 83.3% ;(4 )添加外源 L IF没有提高贴壁率 (86 .4 % ,90 .9% ;P>0 .0 5 )和 ICM形成率 (81 .8% ,81 .8% ;P>0 .0 5 )     

全磷和缺磷条件下甘蔗叶悬浮细胞主要生长指标的比较

研究了以甘蔗基因型US66-56-9的心叶为材料，对甘蔗愈伤组织进行诱导和建立甘蔗叶片悬浮细胞系，并对悬浮细胞进行全磷和缺磷处理，然后对二者的生长曲线，细胞含水率及培养基pH等变化进行了比较，结果表明；与全磷条件相比，缺磷胁迫抑制细胞的生长，导致细胞含水率较高，使培养基的pH值在生长过程中基本保持酸性状态。     

外源性卵黄蛋白对鳗鲡GTH细胞和卵母细胞超微结构的影响

外源性卵黄蛋白与鲤鱼垂体（CPG）加绒毛膜促性腺激素（HCG）混合注射（试验组）对鳗鲡具有明显的催热作用，卵巢成热系数平均为56．17±11．74％，是对照组（CPG加HCG组）的2．87倍。试验组脑垂体促性腺激素细胞（GTH细胞）中除含有数量较多的小分泌颗粒外，球状分泌颗粒增加，内质网池扩大；卵母细胞直径为450．0微米，双层滤泡膜和放射带充分发育。对照组GTH细胞的球状分泌颗粒直径和内质网扩大均小于试验组；卵母细胞直径为270．0微米。而饲养在海水中75天，未经注射催情药物的雌鳗，脑垂体GTH细胞仅有小分泌颗粒，未见球状分泌颗粒，卵母细胞的放射带正在形成，胞内开始出现脂肪油球。试验结果表明，外源性卵黄蛋白与CPG加HCG混合注射有明显协同作用，对卵母细胞成热有显著促进作用。     

植物细胞生长周期中内外源细胞激动素的变化

应用细胞同步培养技术、高压液相色谱分析（ＨＰＬＣ）和酶偶联免疫法（ＥＬＩＳＡ）分析了胡萝卜细胞在悬浮培养时生长分裂周期的变化并对内源激动素类物质（玉米素Ｚ－Ｚｅａｔｉｎ、核糖基玉米素ＺＲ－ｚｅａｔｉｎｒｉｂｏｓｉｄｅ、二氢玉米素ＤＨＺ－ｄｉｈｙｄｒｏｚｅａｔｉｎ、核糖二氢玉米素ＤＨＺＲ－ｄｉｈｙｄｒｏｚｅａｔｉｎｒｉｂｏｓｉｄｅ、异戊烯基核糖基腺嘌呤ＩＰ－ｉｓｏｐｅｎｔｅｎｙｌａｄｅｎｉｎｅ和核糖基异戊烯基腺苷ＩＰＲ－ｉｓｏｐｅｎｔｅｎｙｌａｄｅｎｉｎｅｒｉｂｏｓｉｄｅ）含量进行定量分析．从用荧光显微技术分析ＤＮＡ含量变化结果看出，附加有激动素０．１×１０－６·Ｌ－１的悬浮液中，胡萝卜细胞的分裂周期为８．５ｈ，比不加外源激素的处理短１ｈ．在无外源激素存在的情况下，细胞分裂期中内源细胞分裂素类物质除ＺＲ之外，其余的Ｚ、ＤＨＺ、ＤＨＺＲ、ＩＰ和ＩＰＲ的含量在分裂的第６．５ｈ均有一个峰值出现，ＺＲ在第４．５和８．５ｈ有峰值出现．外加细胞分裂素的处理中．Ｚ、ｉＰ和ｉＰＲ整个周期无明显含量变化，ＤＨＺ和ＤＨＺＲ在第６．５ｈ出现峰值．ＺＲ在第８．５ｈ时也出现峰值．说明附加细胞激动素可协调Ｚ．ｉＰ和ｉＰＲ的积累，加速利用?     

应用赤霉菌粗毒素测定小麦品种的抗赤霉病性

小麦赤霉菌 Gibberella zeae(Schw.)Petch 在麦粒培养基上进行固体产毒培养,从中提取粗毒素。用粗毒素溶液处理小麦抗感赤霉病不同品种萌动—致的种子以及—叶期幼根和叶鞘。用 DDS-11A 型电导仪测定细胞渗透性变化。结果表明,在粗毒素作用下,小麦根、芽生长受抑制。但抗病品种受抑轻,感病品种受抑重。抗感品种幼根和叶鞘细胞渗透性的变化差异明显。用赤霉菌粗毒素测定细胞渗透性的变化,有可能作为鉴定小麦品种抗赤霉病的一个生理指标。     

中草药对建鲤非特异性免疫功能的影响

用添加中草药的鲤配合饲料饲喂建鲤(Cyprinnus var．Jian)后,测定了建鲤非特异性免疫指标。饲喂药饵Ⅰ 10、15、30 d后,氯化硝基四氮唑兰(NBT)阳性细胞数分别为 27±3．45、39±6．04和 38±4．81,溶菌酶活力分别为 0．013±0．0017、0．018±0．0053和 0．021±0．0037;饲喂药饵 Ⅱ 10、15、30 d后,NBT阳性细胞数分别为 30±2．23、87±8．57和82±7．42,溶菌酶活力分别为0．015±0．0020、0．044±0．0017和0．033±0．0011;而对照组NBT阳性细胞数分别为28±2．18、27±4．05和29±3．56,溶菌酶活力分别为0．013±0．0010、0．012±0．0031和0．015±0．0046。结果表明,饲喂药饵Ⅱ 15、30d后的NBT阳性细胞数和溶菌酶活力均显著高于对照组(P＜0．05)。因而,本配方的中草药按质量分数为1．0%的量加入到饲料中,既能明显提高建鲤的吞噬细胞、中性粒细胞和巨噬细胞的数量,又能提高其溶菌酶的活力,从而明显提高建鲤的非特异性免疫能力。     

水稻花培获得大群体健壮绿苗的研究

通过使用混合激素诱发籼稻871015、871109花粉愈伤形成胚性细胞;对籼稻花粉胚性细胞团和粳稻绿芽丛进行分割培养,快速繁育大群体绿苗获得成功。籼稻两个组合的8块胚性细胞团,在两个月内经3—5次切割培养获得绿苗12690株;粳稻花培绿芽丛仅经一次分割培养后的净增绿苗率127.2%,大幅度地提高了水稻花药培养再生绿苗率。分割培养的再生苗,健壮的形成特征:苗粗、浓绿、根多、洁白。良好的生理素质:发根力强,平均每棵试管苗多增根1.8条,根长度增长168.4%;平均每棵再生苗鲜重和干重分别增加0.29克和0.175毫克。     

流式细胞术检测TcR Vα24/Vβ11双阳性NKT细胞及其在HCV感染者中的应用

目的研究丙肝病毒感染者外周血NKT细胞含量与HCV感染状态之间的相关性.方法应用流式细胞术检测TcR Vα24/Vβ11双阳性NKT细胞.结果抗-HCV阳性且HCVRNA也阳性的病例NKT细胞数量明显低于抗-HCV阳性而HCV RNA阴性的病例（P〈0.01）,明显低于正常对照组（P〈0.05）.结论由于NKT细胞数量减少或活化受阻,造成HCV的持续感染,不利于病毒的清除;另一方面,由于肝内有HCV的存在,NKT细胞大量向肝内趋化,导致外周血的数量相对减少.