霍乱弧菌封闭带毒素功能片段△G的原核表达及其免疫增强活性

用PCR扩增了MBP—ZOT质粒上的ZOT基因，该基因编码264～399位氨基酸残基C末端的15ku △G片段，并与经改造后的质粒P^BCX、连接。将重组后的质粒PMLAG在大肠杆菌BL21中表达，将表达的目的蛋白纯化，再将p^BCX-△G片段与传染性腔上囊炎病毒VP2包涵体蛋白通过滴鼻免疫途径对14日龄SPF鸡进行联合免疫试验，分别于免疫后第10、20d采集血清样品，进行ELISA试验，检测免疫后IBD抗体效价。动物免疫试验发现：融合蛋白P^BCX △G起到了明显免疫增强效果，与VP2重组蛋白联合免疫2次后，血清IBD的VP2 IgG抗体效价是单独用VP2免疫组的3倍，明显高于空白免疫组。     

蛋鸡首免乙型脑炎病毒后卵黄抗体变化规律的研究

本试验旨在研究疫苗、免疫剂量和注射方式对卵黄抗体效价规律的影响,探讨制备抗猪乙型脑炎病毒卵黄抗体蛋鸡的最佳免疫程序。选用无免疫褐羽蛋鸡180只,随机分成18组,每组10只。1、2组均为对照组,注射无菌生理盐水;3~10组采用皮下和肌肉两种注射方式,并依次注射灭活苗0.2、0.5、1.0和1.5 mL;11~18组同样采取两种注射方式,依次免疫相同剂量弱毒苗。各试验组分别于免疫前1 d、免疫后第3、7、10、14、18、21和28天采集当日鸡蛋6枚,提取卵黄抗体,测定效价。试验结果显示,1~6、11、12组卵黄抗体效价均为0,未产生明显免疫应答;7~10组注射灭活苗后7 d,平均卵黄抗体效价达到峰值,抗体持续时间为14 d;13~18组注射弱毒苗后14 d达到最高值,抗体持续时间为21 d;注射剂量相同但注射方式不同的两组之间比较,卵黄抗体效价差异不显著（P>0.05）;相同注射方式,相同疫苗的各试验组间,随着免疫剂量的增加卵黄抗体效价逐渐加强,且差异显著（P<0.05）。以上结果表明,肌肉或皮下两种注射方式,蛋鸡产生明显免疫应答至少需要免疫灭活苗1.0 mL或弱毒苗0.5 mL。比较弱毒苗与灭活苗,灭活苗刺激机体产生的抗体速度较快,但维持时间较短;较少剂量弱毒苗就可刺激机体产生抗体,但速度慢、维持时间长。     

产肠毒素大肠杆菌K88黏附素蛋白亚基Fae G在L.lactis中的表达及其抗原性

在构建L.lactis表达载体pNZ8148-fae G的基础上,将该载体转化到L.lactis NZ9000中,重组菌经5 μg/Lnisin诱导3 h,SDS-PAGE结果显示,FaeG在L.lactis中表达的目的蛋白相对分子质量大小约为27 000,表达产物的量达菌体可溶性总蛋白的10.89%.Western blot分析结果表明,该目的蛋白具有良好反应原性.将重组L.lactis口服免疫BALB/c小鼠,小鼠产生特异性IgG及黏膜slgA.本试验为进一步研究仔猪口服重组L.lactis疫苗,诱导其产生抗ETEC K88黏膜免疫的同时,发挥L.lactis的益生功能,预防仔猪腹泻奠定了基础.     

滴鼻免疫疫苗对SPF鸡气管功能影响的研究

为研究疫苗滴鼻免疫对鸡气管功能的影响,本研究对SPF鸡滴鼻免疫新城疫疫苗后气管纤毛摆动速率、气管形态结构和黏液分泌进行了研究。80只7日龄SPF鸡随机分为对照组和试验组,每组40只,试验组SPF鸡滴鼻免疫新城疫弱毒疫苗,对照组滴鼻生理盐水;于免疫后的第0、2、4和6天,每组每次随机剖杀10只鸡,应用红细胞示踪法测定气管纤毛摆动速率,采集气管制备石蜡组织切片进行HE和奥新蓝pH 2.5和pH 1.0染色。结果发现,疫苗免疫后的第0和2天试验组SPF鸡纤毛摆动速率较对照组升高,但差异不显著（P>0.05）;滴鼻免疫后SPF鸡气管结构完整,无明显损伤;滴鼻免疫后试验组SPF鸡气管酸性黏液分布容积在免疫后的第0和2天显著高于对照组（P<0.05）,而后明显降低,于免疫后的第6天又有所升高,但差异不显著（P>0.05）;硫酸化黏液分布容积在免疫后的第0和2天显著升高（P<0.05）,而后降低并与对照组相一致。结果表明,新城疫疫苗滴鼻免疫后前两天SPF鸡气管黏液分泌增多,而后恢复到正常水平,疫苗的免疫对气管形态结构和纤毛的摆动速率无明显影响。     

Study on the Change Rule of Egg Yolk Antibody in Laying Hens after First Immunization by Japanese Encephalitis Virus

The purpose of this experiment was to study the immunization rule of the egg yolk antibody affected by different vaccines,immunization dose and injection ways and further to discuss the optimal immunization procedures of the laying hens for the preparation of egg yolk antibody against swine Japanese encephalitis virus.180 brown laying hens without any vaccines were selected and divided into 18 groups randomly,each group of 10 hens.Groups 1,2 were the control groups,injected with the sterile saline;Groups 3 to 10 were injected with subcutaneous or intramuscular injection,and the vaccine was injected with 0.2,0.5,1.0 and 1.5 mL successively.Groups 11 to 18 were also adopted two kinds of injection,followed by the same dose of vaccine immunization.Six eggs of each experimental group were gathered before immune day and after 3,7,10,14,18,21 and 28 days,the egg yolk antibody was extracted and the titer was determined.As a result,the egg yolk antibody titers of groups 1 to 6,11 and 12 were all 0,and no significant immune response produced;The hens from 7 to 10 groups were injected with the inactivated vaccine.After 7 days,the average antibody titer reached the peak,and the duration of the antibody was 14 days.The hens from 13 to 18 groups were injected with the attenuated virus vaccine.After 14 days,the average antibody titer reached the highest value,and the duration of the antibody was 21 days.The egg yolk antibody titers were not significantly different in the two compared experiment groups with the same injection dose but with different injection ways (P>0.05).With the same injection way of each experiment group,and the difference was significant (P>0.05).Compared with some groups with the same injection and vaccine,the titer of yolk antibody was gradually increased with the increase of the immune dose,and the difference was significant (P<0.05).The results showed that,no matter intramuscular or subcutaneous injection,in order to produce a significant immune response to hens,the immune antigen dose was 1.0 mL inactivated vaccine or 0.5 mL attenuated vaccine at least.Compared with the attenuated and inactivated vaccine,inactivated vaccine stimulated the body to produce the antibody faster,but the maintenance time was shorter;The lower dose of attenuated vaccine could stimulate the body to produce antibodies,but the speed was slower,the maintenance time was longer.     

长沙市某县退出小反刍兽疫强制免疫暴发的定性风险评估

小反刍兽疫(PPR)是一种由小反刍兽疫病毒引起的疾病,主要感染山羊和绵羊。2021年为加快推进小反刍兽疫无疫区建设,实现小反刍兽疫非免疫无疫区建设标准,长沙市某县拟在本地开展小反刍兽疫退出强制免疫风险评估。通过对小反刍兽疫监测流调、危害识别、风险路径的确定和风险因素层级评估等方法进行的定性风险评估初步显示,在该地取消小反刍兽疫强制免疫后可能会发生小反刍兽疫的风险等级为中。在风险管理措施上,提出该地退出强制免疫应推迟一年,重点完善政策支持、加强监测排查、加强检疫监管、强化培训宣传等建议。     

不同剂量伊曲康唑制剂对犬血常规及肝肾功能的影响

旨在评价不同剂量伊曲康唑-环糊精制剂通过皮下注射途径对健康比格犬肝肾功能及血常规的影响.选用体重±10 kg的健康纯种比格犬32只,按试验要求随机分为4组,每组8只,建立稳定的生活制度.分别按照0.25 mg/kg、0.75 mg/kg和1.25 mg/kg剂量,皮下注射伊曲康唑制剂,3日1次,连续7次,对照组注射生理...     

临界温度下循环喷油量对柴油机冷起动和排放特性的影响

为探明循环喷油量对小型农用柴油机冷起动特性和排放性能的影响规律,同时寻求其临界温度下的最佳循环喷油量,该研究以一款直列双缸高压共轨柴油发动机为研究对象,利用环境模拟舱整机试验平台,通过多次预试验测得海拔2000 m下,该机不开启预热装置能够成功起动的临界温度为-5 ℃。在此工况下,采用3次喷射方式,通过改变主喷油量研究循环喷油量对该机冷起动特性和排放性能的影响。结果表明：较大或较小的循环喷油量均会导致柴油机冷起动时间增加,甚至起动失败;随着循环喷油量增大,冷起动时间先减小后增加,循环喷油量为20 mg时冷起动时间最短,且HC、CO排放峰值均最低,分别为12984和3008 mg/L;增大或减少循环喷油量均会导致HC和CO排放峰值增加。循环喷油量较大时,CO排放峰值显著增加,并且峰值出现时刻提前。改变循环喷油量对NOx排放峰值有较大影响,循环喷油量为30 mg时NOx排放峰值最小,为368 mg/L。综合考虑,海拔高度2 000 m,环境温度-5 ℃工况下该柴油机起动的最佳循环喷油量为20 mg。研究结果可为柴油机冷起动特性和排放优化提供支撑。     

H-Y抗血清的制备及检测研究

选用８ ～１２ 周龄纯系的 Ｂ Ａ Ｌ Ｂ／ Ｃ 母鼠, 用同日龄的 Ｂ Ａ Ｌ Ｂ／ Ｃ 公鼠采取皮肤移植和脾细胞注射２ 种方式免疫, 制备 Ｈ Ｙ 抗血清, 经精子微量细胞毒性试验, 筛选抗血清。皮肤移植５ 只小鼠中只有１ 只产生较好的抗血清, 脾细胞注射的４ 只小鼠都能产生较好的抗血清, 产生抗血清的小鼠占５５ ％ 。抗血清与昆明鼠正常８ｃｅｌｌ 早期桑椹胚培养５ ～６ 、１８ 和２４ ｈ 后, 退化率达４３３ ％ , 经 Ｘ２ 检验差异不显著（ Ｐ ＞ ００５） , 符合自然性比例。     

Ⅱ型犬腺病毒自然弱毒YCA18株的实验免疫研究

应用YCA18株第8代细胞培养物（YCA18－8）经口鼻和静脉接种犬腺(CAV)SN本＜1：2的易感犬作安全试验，结果未见任何CAV临床症状与病理解剖学改变；用不同剂量的YCA18－8分组免疫CAV易感犬，经SN抗体测定与用CAV强毒攻击试验，结果SN抗体达1：16以上的犬95％以上可获得免疫保护，最低免疫量为10^4TCID50；应用YCA18－8分别免疫母源抗体达1：4和1：8的两组试验犬，第一次免疫14d后SN抗体均未有升高，追加2－3次免疫后SN抗体才逐渐上升至1：16以上的免疫保护水平；用CAV易感犬和MDCK分别将YCA18连续传8代和20代，结果对犬仍然安全，对犬的免疫原性未见下降，最低免疫量仍为10^4TCID50；与CDV和CPV弱毒作免疫互扰试验，结果与各弱毒的单独免疫结果未见差异；将YCA18－8冰冻保存于一30℃，6个月内TCID50仍不低于10^-4/0.1ml，经加明胶－蔗糖低温真空冻干后，4℃和－30℃保存1年，TCID50均仍维持在10^-4/0.1ml以上，经YCA18－20 3次免疫的试验犬，1年后SN抗体仍在最低抗体保护值1：16以上。