一种猪圆环病毒Ⅱ型ELISA检测试剂盒的临床应用

本研究通过采用猪圆环病毒2-dCap-ELISA抗体检测试剂盒,对河北、山西两地共441份猪血清样品进行检测发现：河北保定地区349份血清样品中阳性样品为306份,感染率为87.68%;山西地区92份血清样品中阳性样品为77份,感染率为83.7%。与标准的间接免疫荧光检测法进行比较,发现相对于标准IFA,该ELISA检测试剂盒的诊断敏感性为95.48%(383/398),诊断特异性为93.02%(40/43),总符合率为95.24%。由此表明该试剂盒是一种简便、快速、灵敏、适于大规模临床应用的猪圆环病毒2型抗体检测试剂盒。     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体间接ELISA检测方法的建立

为建立一种准确检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的方法,通过对PRRSV基因连续缺失片段dNsp2(87)进行诱导表达,重组pUC57-dNsp2蛋白,经镍柱纯化后,作为抗原包被微量反应板,建立了检测PRRSV抗体的间接ELISA方法。经反应条件优化,确定抗原的最适包被浓度为40μg/mL,最适封闭液为5%脱脂奶粉,检测血清稀释度为1:40,酶标二抗的最适工作浓度为1:5 000,最佳显色时间为1 h,确定阴阳性临界值为0.35(OD450)。该方法均不与猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪圆环病毒(PCV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪伪狂犬病毒(PRV)阳性血清发生交叉反应,具有良好的特异性。与IDEXX PRRSV Kit进行重复性、敏感性、符合性试验,证明该方法具有较好的重复性、敏感性、符合性。结果表明,该方法可用于临床PRRSV抗体的检测。     

不同种类氮肥对紫色土表面电化学性质的影响

以紫色土为研究对象,采用土柱淋溶方法,研究了不同种类氮肥对紫色土表面电化学性质的影响。结果表明:氮肥处理的紫色土表面电荷量较原土大,增加量在0.05～0.7 cmol kg-1;在低氮水平(100、200 mg kg-1)下,紫色土表面电荷量为尿素硫铵硝铵;而在高氮水平(300、400 mg kg-1)下,表面电荷量为硫铵尿素硝铵。与原土相比,施肥处理的紫色土比表面积有所增加,其中施用100 mg kg-1尿素的增加量最大,较原土增加了78.04%,且尿素处理对土壤比表面积的影响显著高于其余两种氮肥处理;而400 mg kg-1硫铵处理的增加量最少,只增加了0.06%。在同一个施氮水平下,硫铵处理的土壤表面电荷密度和电场强度最大,而尿素处理的最小;低氮施肥处理对电荷密度和电场强度的影响明显高于高氮施肥处理。可见,不同氮肥种类和施氮水平由于电解质体系类型和浓度的差异,引起土壤pH变化,最终对土壤电化学性质产生影响,从而改变土壤养分的保蓄性和有效性。在本试验条件下,非电解质体系在低浓度下能显著影响紫色土表面电化学性质,而强电解质在高浓度下影响效果较为明显。     

牛传染性鼻气管炎病毒截短gB基因原核表达与间接ELISA诊断方法建立

用DNAstar-Protean分析牛传染性鼻气管炎病毒gB蛋白的亲水性、抗原性和表面展示概率,据IBRVgB全基因序列设计引物,PCR扩增编码385-550位氨基酸的基因序列。将目的片段克隆,酶切鉴定并测序鉴定后,定向连接到pET-28b载体上,转化表达菌DE3并诱导表达。经SDS-PAGE分析,获得大小约为21.4 ku的目的蛋白,与预测值相符。纯化后的蛋白浓度约为2.0 mg/mL,纯度为95.27%。间接ELISA及Western blotting证明,表达的目的蛋白具有抗原性。以该蛋白作为诊断抗原建立的间接ELISA诊断方法,确定的抗原包被量为50μg/mL,血清的最佳稀释倍数为50。与进口IBRV全毒ELISA抗体诊断试剂盒比较,特异性为92.3%、敏感性为93.8%、符合率为93.3%;试验结果表明该诊断方法具有良好的特异性和敏感性。     

不同猪瘟疫苗类型及剂量的抗体反应特性研究

随机选择3个猪场, 从9头母猪生下的仔猪中挑选81头仔猪。随机分成9组,每组又分为3个小组,每小组3头,分别免疫猪瘟组织苗(A)、猪瘟细胞苗(B)和猪瘟脾淋苗(C),各疫苗分别采用1头份、2头份和3头份3个剂量。于25日龄首免疫前后不同时间点采血,分离血清。应用ELISA和IHA两种方法分别对采集的540份血清检测猪瘟抗体。不同类型的猪瘟疫苗免疫试验结果表明：猪瘟脾淋苗免疫效果较好,但不同疫苗之间的抗体水平差异不显著。不同免疫剂量的试验结果显示：3种疫苗以3头份的剂量免疫后抗体反应略高于1头份和2头份,二免后都能获得较高的抗体水平。     

绵羊肺腺瘤病毒衣壳蛋白杂交瘤细胞系的建立

为了制备特异性的抗绵羊肺腺瘤病毒(jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV) 内蒙株衣壳蛋白(CA)的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞系,以原核表达CA蛋白为抗原,免疫BALB/c小鼠,经4次免疫后,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞经杂交瘤技术进行融合,同时以表达蛋白作为包被抗原进行特异性ELISA检测,共筛选到6株阳性杂交瘤细胞株。经过3次亚克隆后,最终得到了5株能稳定分泌抗体的单细胞克隆株;再利用CA真核表达蛋白以间接免疫荧光法,对此5株杂交瘤细胞进行进一步的特异性鉴定。结果显示,有3株具有特异性强荧光反应,也能检测到目的基因的表达产物。本试验获得了3株稳定分泌抗JSRV-NM株CA蛋白McAb的杂交瘤细胞系,为建立检测病原的特异性诊断方法、分析JSRV-NM株CA蛋白的功能及鉴定B细胞抗原表位等奠定基础。     

关系复杂性对关系类别间接性学习分类的影响

以252名大学生为被试,使用3种复杂性不同的关系类别,创设个人关系类别的间接性学习条件和参照性交流关系类别的间接性学习条件,通过限定分类和自由分类2种任务,探查关系复杂性对关系类别间接性学习分类的影响特点.结果发现:关系复杂性对关系类别间接性学习分类中学习条件具有显著影响作用,随着关系复杂性的增高参照条件的分类成绩逐渐降低,个人条件的分类成绩逐渐增高;关系复杂性对关系类别间接性学习中分类方式具有显著影响作用,关系复杂性较低时分类方式间无显著差异,关系复杂性较高和高时限定分类显著高于自由分类.     

森林消防车驾驶员视野在四维结构下的衰减研究

从森林消防车的四维动态视野研究入手,建立森林消防车虚拟视野测试系统。通过驾驶员操作视野设备时的直觉判断,找到森林消防车驾驶员视野在四维动态结构下的衰减数值。结果表明:视野衰减会随着动态的结构而发生衰减;衰减的原因是三维静态测试下没有考虑到时间和环境等因素的影响;现有的森林消防车视野设备在设计和制造上存在问题和缺陷;四维动态结构下的衰减理论研究有助于森林消防车视野设备的设计突破。      

零盐分效应点: 与巴西São Paulo州典型土壤的粘土矿物结构之间的关系

The point of zero salt effect （PZSE） is the soil pH value at which the magnitude of the variable surface charges is not changed due to variations in the ionic concentration of the soil solution. This property influences not only electrochemical phenomena occurring at the solid-solution interface but also the flocculation degree of the soil particles. In this study we investigated the relationships between the clay mineralogy and the PZSE values of representative soils of the Sāo Paulo State, Brazil. The results confirmed the usefulness of the difference between the soil pH values measured in 1 mol L^-1 KCl （pHKCl） and in water （pHH2O） （2 pHKCl-pHH2O） for estimating the PZSE of tropical soils, except for the ones rich in exchangeable Al; furthermore, the ApH index （pHKC1 - pHH2O） was highly correlated with the difference between the PZSE and pHH2O values, reiterating the △pH utility for estimating both the signal and the magnitude of the net surface charge of tropical soils. Finally, correlation and multiple regression analyses showed that the PZSE value of weathered non-allophanic tropical soils tends to increase and to equal the soil pH due to the weathering-induced kaolinite destabilization and concomitant Fe- and Al-oxide accumulation.