Phenotypic and histological expression of different genetic backgrounds in interactions between lettuce, wild Lactuca spp., L. sativa × L. serriola hybrids and Bremia lactucae

Phenotypic and histological responses of cultivated lettuce (Lactuca sativa) and wild relatives L. saligna, L.␣virosa as well as interspecific crosses derived from L. sativa × L. serriola to two races of Bremia lactucae (CS2, CS9) were investigated. With the exception of L. sativa genotypes, all accessions and hybrids expressed incomplete or complete resistance to both pathogen races, with slight differences at seedling and adult plant stages, respectively. Histological features of the interactions (development of pathogen infection structures and host hypersensitive response to attempted infection) were studied on leaf discs 48 h after inoculation. Interactions with similar phenotypic expression of resistance were characterized by significant variation in rate of development of pathogen infection structures and hypersensitive reactions. Differences found within eight Lactuca spp. accessions and hybrids challenged by two distinct pathogen races are interpreted and discussed.     

小鼠4、8-细胞胚胎单卵裂球体外培养体系的研究

以CZB为基础培养液,培养小鼠4、8-细胞胚胎单卵裂球,研究葡萄糖、牛磺酸和猪输卵管上皮细胞共培养在其体外发育中的作用。结果表明:牛磺酸添加与否对4、8-细胞胚胎单卵裂球的囊胚发育率分别为29%、30%和14%、14%,无显著性差异(P>0.05)。添加葡萄糖后,4、8-细胞胚胎单卵裂球的囊胚发育率分别为36%和19%,有显著提高(P<0.05)。含有葡萄糖而牛磺酸的添加与否对4、8-细胞胚胎单卵裂球的囊胚发育率分别为36%、38%和19%、20%,无显著性差异(P>0.05)。各组内4、8-细胞胚胎单卵裂球形成的囊胚细胞数分别为(10.44±1.24～(12.43±1.18)和(7.57±0.97)～(8.48±1.16),均无显著性差异(P>0.05)。4、8-细胞胚胎单卵裂球与猪输卵管上皮细胞共培养,其囊胚发育率分别为47%和26%,囊胚细胞数分别为(17.57±1.13)和(11.43±0.92),均高于单一培养(P<0.05)。     

黄芩抗鸡大肠杆菌作用的研究

通过体外试验和体内试验两种方法研究了黄芩抗鸡大肠杆菌的作用。结果表明，黄芩水煎液对鸡大肠杆菌的最小体外抑菌浓度为2．5g／mL；当药物浓度为5g／mL时可使7日龄雏鸡获得90％以上的攻毒保护；药物浓度为10g／mL时可使100％雏鸡获得攻毒保护，说明黄芩可以对抗鸡大肠杆菌，用于防治鸡的大肠杆菌病。     

鸡胚胎原始生殖细胞的体外培养

旨在对影响鸡胚胎原始生殖细胞（PGCs）体外培养、传代过程的各种影响因素进行探讨。将分离到的19期鸡胚胎生殖腺的PGCs在以鸡胚成纤维细胞（CEF）为饲养层，添加细胞因子的培养体系中进行培养、传代。经冷冻保存的PGCs在添加细胞因子的培养体系中能增殖，并具有分化能力。从细胞形态、集落形态、增殖生长能力、核型检测、碱性磷酸酶测定等方面对培养过程中的鸡胚胎PGCs进行检测。结果表明，采用传至3代的CEF为饲养层，多次离散法进行传代所获得的5代鸡胚胎PGCs不但能有效维持PGCs的未分化状态和正常二倍体核型，也具有其作为多能性胚胎干细胞的一系列特征。     

杨盘二孢激发子的分离及稳定性研究

 从杨盘二孢的培养滤液和菌丝中获得2种激发子粗提物,分别测定其糖和蛋白质的含量,发现滤液激发子粗提物(CFE)糖和蛋白质的含量分别为41.07和40mg/mL,菌丝激发子粗提物(CME)糖和蛋白质含量分别为48.07和55mg/mL。滤液激发子粗提物对温度不敏感而对碱性条件敏感;菌丝激发子粗提物对酸碱不敏感而对温度敏感。用Sephadex G-100柱层析的方法初步纯化2种激发子,并且菌丝激发子粗提物过柱后得到2个活性组分J14和J25;滤液激发子粗提物过柱后获得2个活性组分L9和L16。将4个组分进行烟草叶片过敏反应和I-895杨酶活性的诱导,结果表明,菌丝激发子强活性物质集中在J14组分;而滤液激发子强活性物质集中在L9组分。     

美国白蛾生物学上的几个重要特性

本文对青岛市美国白蛾Hyphandria cunez种群的几个重要生物学特性进行了调查，获得了如下有意义的结果。（1）在生态光周期范围内，该虫显示了一个典型的长日照型昆虫，临界日长为14h 30min。然而在全光条件下，有41.2％的个体滞育；在全暗条件下则有83．7％的个体发育。（2）第1代蛹在自然条件下羽化的结果表明，部分个体的蛹期显著延长，呈现了夏季滞育。（3）滞育蛹置于25℃，LD16：8下滞育能够解除，但死亡率极高。（4）雄虫前翅黑斑的出现是由光周期控制的，只有在短日照下诱导的滞育蛹，滞育解除后羽化出来的雄虫才会出现黑斑。     

梨组织中苹果褪绿叶斑病毒的原位RT-PCR检测

 为了建立梨树苹果褪绿叶斑病毒原位RT-PCR检测技术, 用已知带有苹果褪绿叶斑病毒的库尔勒香梨和无病毒实生苗叶片为材料, 利用D IG标记, 研究了香梨病毒的叶片石蜡切片IS-RT-PCR检测技术。包括AMV逆转录酶、dNTPs、RNasin及互补引物浓度对cDNA合成的影响, 退火温度、Taq DNA聚合酶、Mg²⁺ 、引物浓度及循环次数对原位PCR效果的影响。结果表明: RNasin的用量大于0.2 U·μL^-1时,信号强度随着RNasin量的加大而增强; 只有当dNTPs浓度达1.0 mmol·L^-1时才能生成一定量的cDNA;AMV浓度在0.3～0.5 U·μL^-1均可进行正常的逆转录, 而且在该范围内产物的量随AMV浓度提高而增多; 引物浓度达到0.9μmol·L^-1以上时才能进行有效的逆转录, 并且生成的cDNA的量随引物浓度增大而增加。原位扩增ACLSV的cDNA适合退火温度为56℃。循环20～30次可出现较强的蓝色信号, 引物浓度在0.8～1.2μmol·L^-1时显色较好; Taq酶浓度为20 U·mL^-1以上, 均显示较深的蓝色; Mg^{2 +}浓度为1.5mmol·L^-1就可满足原位PCR所需。获得了苹果褪绿叶斑病毒的原位PCR优化检测体系, 利用建立的优化程序对香梨样品进行了检测验证, 取得了很好效果。     

不同培养方法对昆虫病原线虫质量影响及其评价

采用传统的White trap法、Lowtek培养法、液体和固体培养4种方法繁殖异小杆线虫[Heterorhabditis bac-teriophora(Hb-1)]和斯氏线虫[Steinernemacarpocapsae(Sc-2)],测定和计算了线虫的产量、质量和成本。试验结果显示,4种方法培养对线虫侵染力和存活率有一定影响,但差异不显著(p<0.05),2种线虫从高到低的顺序为:White trap法>Lowtek法>固体培养>液体培养;产量最高的是固体培养法,其次是液体培养法,Lowtek法最低;繁殖成本从低到高的顺序为:Lowtek法<固体培养     

猪苓菌丝体多糖对小鼠免疫水平的影响

通过人工液体浅层培养方式培养猪苓菌丝体，用热水浸提法提取猪苓菌丝体多糖（PPS1），经纯化测定其糖含量，用红外光谱分析鉴定多糖，纯化鉴定的PPS1，通过小鼠进行腹腔单核巨噬细胞功能测定试验、E玫瑰花环试验、足跖肿胀厚度试验、淋巴细胞转化试验、EAC花环试验等5项免疫学试验初步探讨其免疫药理学作用，同时与猪苓菌核多糖（PPS2）进行比较。试验数据经统计学分析显示，E玫瑰花环试验中PPS1与空白对照组相比差异显著（P〈0．05）；腹腔单核巨噬细胞功能测定试验、足跖肿胀厚度试验、淋巴细胞转化试验覆EAC花环试验PPS1与空白对照组相比差异极显著（P〈0.01）；5项免疫学试验PPS1与PPS2相比差异均不显著。结果表明，PPS1能明显提高小鼠的免疫功能。     

牛卵泡卵母细胞的体外成熟和冷冻保存

在简化牛卵母细胞体外成熟的基础上,观察了保护剂、平衡温度、预平衡方法、解冻方法以及冷冻方法对牛卵泡卵母细胞冷冻的影响。结果表明:在体外成熟培养液中添加26.2 mmol/L的NaHCO3和对屠宰场卵巢进行选择更能促进牛卵母细胞的体外成熟;无论是程序冷冻还是玻璃化冷冻,乙二醇(EG)与甘油(GLY)相比更能促进牛卵泡卵母细胞的冷冻效果;在程序冷冻中,冷冻液中添加0.1 mol/L蔗糖比添加0.3mol/L的蔗糖更能促进牛卵泡卵母细胞的冷冻;在玻璃化冷冻中,37℃和25℃的平衡温度比4℃更适合牛卵泡卵母细胞的冷冻;在10%、5%、1%的预平衡浓度之间,5%的预平衡浓度即可达到预平衡的效果;在解冻时,多步脱除保护剂更能保护冷冻的卵母细胞;比较了几种最小样本量(minimum size sample,MSS)玻璃化冷冻方法,解冻成熟培养后的成熟率,拉细毛细玻璃管冷冻法为(41.67±3.19)%,极显著高于未拉细毛细玻璃管冷冻法(glassmicropipette,GMP)的(30.19±1.93)%和固体表面冷冻法(solid surface vitrification,SSV)的(28.33±2.89)%(P<0.01)。