白藜芦醇和褪黑素对绵羊胎儿成纤维细胞转染及卵母细胞体外成熟的影响

试验旨在利用白藜芦醇(Re)和褪黑素(MT)提高绵羊胎儿成纤维细胞电穿孔转染(电转)效率、优化卵母细胞体外成熟体系,以提高转基因动物生产效率。将绵羊胎儿成纤维细胞分为6组:对照组、添加白藜芦醇高、中、低(R^-5、R^-6、R^-7)3种浓度组及白藜芦醇和褪黑素联合添加组(R^-5M^-5、R^-6M^-7),通过电转效率和细胞凋亡情况确定电转体系优化方案;通过对细胞周期、线粒体膜电位及活性氧(ROS)的检测研究其作用机制。将绵羊卵母细胞分为对照组及白藜芦醇和褪黑素(R^-5M^-5、R^-6M^-7)联合添加组,通过绵羊卵母细胞体外成熟后卵丘细胞扩展、第一极体排出及体外受精胚胎的卵裂率检测其对卵母细胞体外成熟的作用。研究结果显示,分离的绵羊胎儿成纤维细胞P3代增殖旺盛,细胞生长曲线呈典型的S型;与对照组相比,所有试验组胎儿成纤维细胞的电转效率均显著提高(P<0.05),R^-5M^-5组电转效率最高;R^-6M^-7组显著降低细胞凋亡率(P<0.05),R^-5、R^-6、R^-5M^-5和R^-6M^-7组均显著促进细胞增殖(P<0.05);R^-6、R^-7、R^-5M^-5和R^-6M^-7组G1期细胞增加,S期细胞相对减少,但差异均不显著(P>0.05);R^-6、R^-7、R^-5M^-5和R^-6M^-7组成纤维细胞内ROS水平均显著降低(P<0.05),R^-6、R^-5M^-5和R^-6M^-7组线粒体膜电位均显著增加(P<0.05);R^-6M^-7组显著促进绵羊卵丘细胞扩展、提高卵母细胞第一极体排出率和体外受精胚胎发育能力(P<0.05)。综上,白藜芦醇和褪黑素可以优化绵羊胎儿成纤维细胞电转体系,提高卵母细胞体外成熟效率,为白藜芦醇和褪黑素在转基因动物生产中的应用提供参考依据。     

FGF4在肺癌细胞体内和体外中表达差异的研究

FGF4已经被证明是癌基因,它涉及肿瘤的生长和转移,为了解FGF4的表达与肿瘤微环境的关系。我们利用FGF4抗体通过免疫组化对一名肺癌患者癌旁,癌组织,癌组织小鼠移植瘤,二次移植瘤以及原代培养的细胞爬片进行FGF4检测,探究其表达差异。通过对比癌组织与对照组（癌旁组织）,FGF4在癌巢中高表达;同样,移植瘤与二次移植瘤的癌巢中与癌旁组织比较,FGF4表达相对较高;但是将癌组织进行原代培养后,免疫组化检测细胞爬片FGF4,发现仅有5%±0.21%的肿瘤细胞表达FGF4,对照蛋白Cytokine作为肿瘤标记物,则在100%的肿瘤细胞中表达。研究提示免疫组化检测到FGF4在体内和体外表达不同,提示肿瘤细胞FGF4的表达与肿瘤微环境调控密切相关,肿瘤微环境对肿瘤细胞的FGF4的调控有着重要作用。     

激素对奶牛乳腺上皮细胞乳脂肪合成的调控作用

乳脂肪是高质量的天然脂肪，其可为人类提供营养和能量，在各种膳食脂肪和油类中，是最容易被消化吸收的。乳脂肪是在乳腺中由从头合成或外源摄取的脂肪酸与甘油酯化形成的一种脂类物质，其含量的高低关系着牛奶品质的优劣和乳制品的加工特性。在奶牛的泌乳周期中，乳腺泌乳功能受多种因素影响，其中内分泌腺分泌的多种激素对奶牛乳腺上皮细胞（BMECs）乳脂的合成具有积极的调控作用。综上所述，作者介绍了氢化可的松、催乳素、胰岛素和生长激素4种泌乳相关激素对BMECs乳脂肪合成的调控机理，即从乳脂合成适宜的激素添加量、激素对乳脂球形态的影响方面初步阐释其调控作用，并从乳脂合成的关键酶及转录因子、激素对乳脂合成相关基因表达量方面深入阐释其作用机理，旨在为研究泌乳相关激素对奶牛乳腺内乳脂肪合成的调控机理提供参考。     

类器官的研究进展及应用前景

类器官（organoids）来源于自组织和自我更新的干细胞，是利用干细胞的自组织特性进行体外3D培养后形成的细胞团，与来源器官密切相关，再现了来源器官的三维细胞结构，并为探索来源器官的发病机制提供了新的模型。类器官系统是由自分泌、旁分泌或邻分泌信号调节下的细胞，或者外源性添加的细胞外基质（extracellular matrix，ECM）底物、小分子和生长因子等衍生而来，这些因素的相互作用创造了一个动态的环境，指导干细胞的自我更新和分化，以及细胞在类器官中的自我组装。诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cells，iPSC）重编程方法结合3D类器官工具，使患者来源的类器官作为动物模型和人类临床试验之间的桥梁，是对细胞研究和在体试验的补充。在研究来源器官发育、生物学和病理生理学方面，类器官不仅是一种比传统细胞培养更具生理相关性的体外模型，而且还是再生医学和个性化医学领域中的新模型，有望成为研究营养素、药物、毒物及毒素等的作用机制及药物的筛选、再生医学等领域的重要模型。总之，类器官技术的发展增强了人们对器官和组织生理生化功能的认知。作者对肠、脑、肺脏、肝脏、子宫、卵巢等类器官培养和应用的研究进展进行综述，以期为类器官相关科研及应用提供参考。     

Effects of intrauterine growth restriction during late pregnancy on the ovine fetal renal function and antioxidant capacity

This study investigated the effects of intrauterine growth restriction during late pregnancy on the ovine fetal renal function and renal antioxidant capacity. Eighteen ewes pregnant were randomly divided into control group (CG, ad libitum, 0.67 MJ ME·BW^−0.75·day⁻¹, n = 6), restricted group 1 (RG1, 0.18 MJ ME·BW^−0.75·day⁻¹, n = 6), and restricted group 2 (RG2, 0.33 MJ ME·BW^−0.75·day⁻¹, n = 6). At 140 days, the fetal blood, allantoic fluid and kidney tissue were collected to determinate fetal renal function and renal antioxidant capacity. The results showed that the fetal weight, kidney weight, superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GSH-Px), aquaporin-2 (AQP-2) and aquaporin-3 (AQP-3), and total antioxidant capacity (T-AOC) in RG1 group were decreased compared with the CG (P < 0.05), but the contents of β2-Microglobulin (β 2-MG), cystatin C (Cys-C), filtered sodium excretion fraction (FENa), malondialdehyde (MDA), and hydroxyl radical (OH) in RG1 group were increased (P < 0.05). The impaired ovine fetal renal growth, antioxidant imbalance and dysfunction of glomerulus ultrafiltration, and the renal tubules reabsorption were induced by maternal malnutrition during late pregnancy.     

Transplantation of human amnion epithelial cells improves learning and memory function in Alzheimer's disease-like pathology rat model

AIM: To observe the treatment effect and its immune regulation of human amnion epithelial cells (hAECs) on Alzheimer's disease (AD)-like pathology rat model. METHODS: The hAECs were isolated from amnion with trypsin digestion, and the phenotype of hAECs was analyzed by flow cytometry. SD rats (n=48) were randomly divided into sham control group, model group, medium group and hAECs group. AD-like pathology rat model was induced by bilateral intraventricular injection of lipopolysaccharide (LPS). hAECs (5×10⁵) were injected into the hippocampus of the AD-like pathology rats. At 2 weeks after transplantation, the animals were tested by Morris water maze to observe the function of learning and memory. The pathological change of the brain was observed by HE staining. The expression of amyloid β-protein 42(Aβ42) and Tau protein and the level of acetylcholine (ACh) in the injury brain were determined by immunohistochemistry. The survival and differentiation of hAECs in the hippocampus were measured by immunofluorescent technique. The percentages of lymphocyte subsets in the peripheral blood mononuclear cells were analyzed by flow cytometry. The contents of serum cytokines were detected by cytometric bead array. RESULTS: Compared with model group and medium group, hAECs group showed shortened escape latency (P<0.01), increased frequency of going through the platform (P<0.05), reduced loss of hippocampal neurons, decreased expression of Tau protein and Aβ42 in the hippocampus (P<0.05), increased ACh level in the hippocampus (P<0.05), decreased percentages of Th1 and Th17 subsets, increased percentages of Th2 and Treg cells (P<0.05), decreased concentrations of IFN-γ and IL-2 in the serum, and increased concentration of IL-4(P<0.05). CONCLUSION: hAECs improve the cognitive learning and memory function and alleviate pathologic damage of hippocampus through immune regulation in AD-like pathology rats.     

铅和（或）镉对体外培养肾细胞的毒性损伤

在培养液中加入不同浓度的Cd（10、20、40μmol／L）、Pb（10、20、40μmol／L）和Pb-Cd联合（分别为5、10、20μmol／L），来探讨铅镉对肾细胞的作用及可能机制。在显微镜下观察细胞形态、测定细胞凋亡率和细胞周期及上清液脂质过氧化指标。结果表明：20μmol／L以上染毒组细胞皱缩、体积变小，表面有细胞碎片，甚至呈泡沫状或树枝状；铅、镉单独和联合染毒组GSH—Px、SOD活性随染毒剂量的增加，呈逐渐下降趋势（P〈0．05）．而MDA含量和凋亡率则呈升高趋势（P〈0．05），并存在剂量和时间效应。镉和铅也能使细胞周期停滞。Pb、Cd联合可加剧细胞损伤。     

蜂王浆对尾静脉注射4T1细胞小鼠抗氧化能力的影响

探讨蜂王浆对尾静脉注射4T1细胞小鼠的抗氧化和免疫力的影响.将4T1细胞或其与蜂王浆的混合物通过尾静脉注射入小鼠体内,ELISA法检测蜂王浆对小鼠血清、肝脏和肾脏中与抗氧化能力相关的指标及血清中和免疫力相关细胞因子水平的影响.结果表明,和模型对照组相比,蜂王浆(50、100 mg·mL~(-1))可以显著提高小鼠血清内T-AOC、IFN-α(P0.05)水平,降低IL-4的水平(P0.05);蜂王浆剂量为50 mg·m L~(-1)时,IFN-γ的含量显著增加(P0.05).蜂王浆(100 mg·mL~(-1))显著提高肾脏中T-AOC的水平(P0.05).可见,蜂王浆可以改善尾静脉注射4T1细胞小鼠的抗氧化能力和免疫力.     

NaCl胁迫对白蜡种子生理特性的影响

为了给盐碱地造林树种选择提供依据,以采自秦皇岛和保定的白蜡种子为试材,采用不同浓度的NaCl胁迫处理,研究了其萌发过程中发芽率、细胞膜透性、保护酶活性、丙二醛MDA的变化,结果表明:(1)随着NaCl胁迫浓度的增加,两地白蜡种子发芽率均呈现逐渐降低的变化趋势,秦皇岛各处理的白蜡种子发芽率分别比对照降低了8.9%、52.6%、56.3%、61.6%、87.9%、91.1%,而保定的白蜡种子分别比对照降低20.2%、56.2%、68.7%、86.5%、89.9%、100.0%;(2)随着浓度的升高,种子的相对电导值、K+、Na+渗透率升高,种子的SOD酶活性降低,MDA含量增加,NaCl胁迫浓度越高,种子所受到的伤害越深;(3)0.20%浓度的NaCl胁迫对白蜡种子萌发影响不大。对于不同种源的白蜡种子,秦皇岛的白蜡种子抗盐性要优于保定的白蜡种子。     

遮穗和去颖下燕麦穗部特征变化和穗部光合贡献率估算

随着探索提高植物整体光合能力相关研究的不断开展，麦类作物穗部器官等植物非叶绿色器官光合潜力挖掘逐渐得到关注。本研究在成都平原秋播美达、贝勒、莫尼卡、摄政王、泰克和甜燕60等6个品种燕麦，设置遮穗、去颖2个试验处理，比较分析了各品种间穗部特征、穗部光合贡献率、颖片光合贡献率和茎光合物质转移率等差异。结果表明，燕麦穗部器官光合贡献率为28.56%～49.05%，其中甜燕60最高；6个品种燕麦的颖片光合贡献率为11.03%～36.88%，茎光合物质转移率为6.65%～35.81%。燕麦穗部器官对籽实增重表现了较高的光合贡献，当燕麦穗部器官光合受到限制时，燕麦单粒种子重和单穗种子数显著降低，尤其是影响双粒小穗数。