氯化钙添加量对地衣芽孢杆菌凝乳酶凝乳性能的影响

凝乳酶是生产干酪中极为关键的酶制剂。在凝乳酶作用过程中,添加适量的氯化钙可缩短凝乳时间,增加凝块硬度,减少生产成本,对干酪品质的影响至关重要。本研究利用从甘肃省天祝藏族自治县牦牛牧区土壤中筛选得到的一株高效产凝乳酶的地衣芽孢杆菌菌株D3.11,优化培养后得到凝乳酶,通过分析凝乳过程中相关指标的变化规律、观察比较凝块的微观结构,研究氯化钙添加量对该酶凝乳性能的影响。结果表明,当氯化钙添加量为0.014%~0.022%时,地衣芽孢杆菌D3.11凝乳酶体系的黏度值随凝乳时间的延长先增大后保持稳定;地衣芽孢杆菌D3.11凝乳酶体系和商品酶体系的浊度值均随Ca²⁺浓度的增大而显著增大(P<0.05);地衣芽孢杆菌D3.11凝乳酶体系的粒径主峰分布在136.9~246.7 μm范围内,且粒径值在氯化钙添加量为0.020%时最大;流变学特性分析结果表明,地衣芽孢杆菌D3.11凝乳酶体系达到储能模量G'峰值的时间随氯化钙添加量的增加而缩短;两种酶体系的持水力在氯化钙添加量为0.014%~0.022%范围内显著增大(P<0.05),乳清OD值在氯化钙添加量为0.016%~0.022%范围内变化均不显著(P>0.05);通过激光扫描共聚焦显微镜观察凝块微观结构发现,随着氯化钙添加量的增加,两种酶体系中蛋白微粒均凝结得更紧密。本研究结果为细菌凝乳酶在干酪生产中的应用提供了理论依据。     

The influence of demeanor on scores from two validated feline pain assessment scales during the perioperative period

ObjectiveTo evaluate the effects of demeanor on validated pain assessment scales.Study designProspective, blind, clinical trial.Animal populationThirty three adult domestic cats scheduled for orchiectomy.MethodsCats were assessed for pain pre (baseline) and 1, 2, 4 hours postoperatively using two validated pain scales [Composite Measures Pain Scale-Feline (rCMPS-F) and UNESP-Botucatu multidimensional composite pain scale (psychomotor and pain expression subscales; U-B MCPS-psych and -painex)], and a demeanor scale. Return of sternal recumbency and postoperative feeding were recorded. Anesthesia consisted of a single intramuscular injection of dexmedetomidine-ketamine-hydromorphone with intratesticular lidocaine and atipamezole and meloxicam postoperatively. Following data collection, cats were assigned to two groups based on baseline demeanor scores (LO ≤ 5/21, 18 cats; HI ≥ 6/21, 15 cats) and data from each group compared.ResultsBaseline demeanor predicted pain scores with the U-B MCPS-psych scale: baseline [LO 0 (0–0), HI 2 (0–6), p = 0.0005], 1 hour [LO 1 (0–5), HI 3 (1–5), p = 0.02], and 4 hours [LO 0 (0–2), HI 1 (0–6), p = 0.01]. A similar pattern was observed with the rCMPS-F. This resulted in more crossings of the analgesic intervention threshold in the HI group: U-B UNESP-psych (9 versus 1, p = 0.005) and rCMPS-F (23 versus 3, p < 0.0001). In contrast, U-B MCPS-painex scores did not differ between LO/HI groups: baseline (p > 0.99), 1 hour (p = 0.34), 2 hours (p > 0.99) and 4 hours (p = 0.31). LO cats ate sooner (61% versus 33% by 1 hour, p < 0.0001) despite similar times to sternal recumbency (p = 0.48).Conclusions and clinical relevanceDemeanor affected pain assessment with U-B UNESP-psych and rCMPS-F scales, but not U-B UNESP-painex scale. Demeanor had a significant effect on postoperative feeding. These data highlight the potential for demeanor to confound pain assessment.     

集约化猪场废水强化生化处理工艺试验研究

该文采用新型厌氧反应器技术和强化生物脱氮及硝化技术处理猪场废水。试验结果表明：新型厌氧反应器容积COD_Cr负荷可达8 kg/(m³·d)以上,稳定运行COD_Cr平均去除率为75％;生物脱氮及硝化采用一体式A/O反应器,缺氧段水力停留时间为1 h,好氧段水力停留时间为3 d,氨氮浓度可控制在10 mg/L以下。总出水COD_Cr平均550 mg/L,BOD₅平均53.0 mg/L,NH₃-N平均8.8 mg/L,总COD_Cr去除率87%,总BOD₅去除率96%,NH₃-N总去除率在98％以上;采用原水碳源优化分配强化生物脱氮,TN去除率为77.11%左右。总出水BOD₅/COD_Cr约0.10,出水COD_Cr中难生物降解成分占绝大多数,需经过后续物化处理才能达到广东省水污染物控制标准(DB44/26-2001)。     

碱性蛋白酶Alcalase凝固大豆分离蛋白的分子间作用力

为了进一步揭示蛋白酶凝固豆乳的机理,该文通过添加不同化学试剂研究碱性蛋白酶Alcalase凝固大豆分离蛋白(SPI)过程中的分子间作用力。结果发现凝固过程中的分子间作用力主要是氢键和疏水作用,而离子键和二硫键对凝固过程影响不大。大豆蛋白质分子间的交联主要由次级键起作用,同时需要克服由负电荷引起的静电斥力,这就解释了为什么与无机盐和酸相比,Alcalase得到的SPI凝固物强度低。根据以上结论,该文还对豆乳凝固酶当前的筛选策略进行了评价。     

嘧啶肟草醚5%乳油在水稻环境中残留行为研究

嘧啶肟草醚在水稻环境中残留行为研究已在河南郑州和云南昆明田间小区内进行。样品采用丙酮振荡提取,凝结净化和高效液相色谱检测。结果表明,本方法的添加回收率范围为85.5%～101.4%;相对标准偏差(RSD)为1%～19%。其灵敏度、准确度和精密度均符合农药残留试验准则要求。两年两地的检测结果显示,无论是在南方云南或是中原河南,低剂量30g,a.i·hm-2或是高剂量60g,a.i·hm-2,采收间隔期83d或118d,其糙米中的最终残留均低于最低检测浓度(0.01mg·kg-1)。因此建议在水稻生长期,按推荐药剂量(30～60g,a.i·hm-2)施药一次,安全间隔期83d,收获的水稻食用是安全的。嘧啶肟草醚在糙米中的最大允许残留量限(MRL值)暂定为1mg·kg-1。     

工艺因素对鲜胶乳快速生物凝固速度的影响

研究了凝固工艺对鲜胶乳快速生物凝固速度的影响。结果表明利用自选菌种和自制的微生物培养剂A制备的生物凝固液凝固鲜胶乳的效果最理想,其用量少于1%时,胶乳凝固不完全;用量超过3%时,增加用量并不能加快生物凝固鲜胶乳的速度。增加凝固辅助剂用量可以加快鲜胶乳生物凝固的速率。胶乳的浓度由34%稀释到26%时,对胶乳生物凝固速度的影响不大,胶乳的浓度稀释到22%以下时,凝块较软而对胶乳生物凝固的速度稍有影响。生物凝固液的培养时间对胶乳生物凝固速度的影响非常明显,这种影响1～2d时最显著。同时凝固液中培养剂的浓度为5%时达到较好的凝固效果。     

一株表达EGFP基因的重组伪狂犬病毒的构建及其复制稳定性分析

为探寻伪狂犬病毒（Pseudorabies virus，PRV）基因缺失株rPRV-bc-8基因组UL4-UL3基因间区域是否可作为外源基因的插入位点，在实验室已构建的含有增强型绿色荧光蛋白（Enhance Green fluorescent protein，EGFP）基因的转移质粒pMD-US6+7-EGFP-US2的基础上，通过DNA体外分子克隆技术将UL4序列替换左同源臂US6+7序列，UL3序列替换右同源臂US2序列，并将PolyA引入转移质粒，得到转移质粒pMD-UL4-EGFP-UL3。利用脂质体转染法将转移质粒pMD-UL4-EGFP-UL3与亲本毒rPRV-bc-8共转染PK-15细胞，经蚀斑纯化成功得到一株能够稳定表达EGFP基因的重组伪狂犬病毒rPRV-UL4-EGFP-UL3。通过倒置荧光显微镜观察以及PCR鉴定确定EGFP基因已成功插入到伪狂犬基因组的UL4-UL3之间，并通过细胞传代试验分析得到重组毒的遗传稳定性良好。通过体外增殖试验分析得到重组病毒rPRV-UL4-EGFP-UL3在细胞内的增殖速度较快，接种后12 h内滴度始终高于亲本毒rPRV-bc-8，接种后40 h达到最高滴度10^8.3 TCID₅₀/mL，与亲本毒的最高滴度接近，但是最高滴度的出现时间晚于亲本毒，并且在达到平台期后病毒滴度下降的比亲本毒快。通过对病毒培养液中荧光蛋白浓度进行测定，结果显示在接种后56 h时荧光蛋白浓度达到最高值4793.9 ng/mL，之后进入平台期。综上结果表明构建的重组病毒具有良好的遗传稳定性及体外复制能力，并且外源基因EGFP在此位点具有良好的表达效果，为进一步相关重组病毒的构建奠定了基础。