Mouse melanoma cell exosomes promote expression of Rac1 protein in fibroblasts

AIM To investigate the effect of exosomes secreted by mouse melanoma cells on the expression of Ras-related C3 botulinum toxin substrate 1 (Rac1) protein in fibroblasts. METHODS Ultracentrifugation was adopted to separete exosomes secreted by mouse melanoma B16-F10 cells. The morphological structure of exosomes was observed by negative-staining electron microscopy. The size distribution of exosomes was determined by nanoparticle tracking analysis (NTA). The exosomal markers, tumor susceptibility gene 101 (Tsg101) and tyrosinase-related protein 2 (Tyrp2), were identified by Western blot. Laser confocal microscopy was used to observe the process that mouse embryonic fibroblasts (MEF) took in exosomes during co-culture. Immunocytochemical staining and Western blot were used to detect the expression of Rac1 protein in MEF. RESULTS B16-F10 cell exosomes showed a typical tea tray-like structure, with a size range of 141~255 nm, and expressed protein markers Tsg101 and Tyrp2. The results of laser confocal microscopy showed that compared with co-culture at 0 h, a small number of exosomes appeared in the MEF at 12 h, and a large number of exosomes accumulated in the MEF after co-cultured for 24 and 36 h. Western blot analysis showed that compared with co-culture at 0 h, the expression of Rac1 protein in the MEF was significantly increased at 24 h and 36 h of co-culture (P<0.01). The results of immunocytochemical staining showed that compared with co-culture at 0 h, the positive expression level of Rac1 in the MEF cells was significantly increased at 12 h, 24 h and 36 h of co-culture (P<0.05 or P<0.01). CONCLUSION Intake of exosomes secreted by mouse melanoma cells promotes the expression of Rac1 protein in fibroblasts.     

5种杀虫剂对青菜黄曲条跳甲的毒力测定及田间药效

为了筛选有效防治青菜黄曲条跳甲的药剂,在室内测定了5种杀虫剂对黄曲条跳甲成虫的毒力,并开展了这5种药剂对黄曲条跳甲的田间药效试验。毒力测定结果表明,10%啶虫脒WP对黄曲条跳甲的毒力最高,28%杀虫·啶虫脒WP毒力最低,LC50分别为7.20 mg/L和18.63 mg/L,5种药剂的毒力大小依次为:10%啶虫脒WP>42%啶虫·哒螨灵WP>5%鱼藤酮SL>15%哒螨灵EC>28%杀虫·啶虫脒WP。田间药效试验结果表明,42%啶虫·哒螨灵WP和15%哒螨灵EC的防效最优,10%啶虫脒WP、28%杀虫·啶虫脒WP和5%鱼藤酮SL 3种药剂总体防效相当,但低于42%啶虫·哒螨灵WP和15%哒螨灵EC。综合来看,建议使用42%啶虫·哒螨灵WP 126~189 g/hm2、15%哒螨灵EC 90~135 g/hm2、28%杀虫·啶虫脒WP 294~420 g/hm2、10%啶虫脒WP 60~90 g/hm2、5%鱼藤酮SL 150~225 g/hm2对青菜黄曲条跳甲进行防治。     

防治红火蚁触杀型药剂的筛选

测定了9种杀虫剂的触杀活性和其中8种药剂对红火蚁工蚁的致死中浓度,触杀活性测试表明,48%毒死蜱对工蚁的击倒速度和致死率均高,药后0.5 h工蚁死亡率达100%;氨基甲酸酯类药剂药后8 h工蚁的被击倒率达100%;5%氟虫腈10 000倍和10%溴虫腈10 000倍药液处理后工蚁的被击倒速度低,但药后24 h工蚁死亡率达100%;高效氯氰菊酯和杀虫双对工蚁的毒性是可恢复的。毒力测试表明,98%杀螟丹对红火蚁毒力最强,其次是10%溴虫腈和48%毒死蜱,而有机磷类的敌敌畏和氨基甲酸酯类的丁硫克百威毒力表现较差,拟除虫菊酯类的高效氯氰菊酯表现一般。试验结果表明,氟虫腈、溴虫腈、毒死蜱、杀螟丹等药剂可被推荐用于野外红火蚁的灌巢防治。     

四环素对人肝细胞L02的损伤作用

采用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法和Hoechst 33258染色法研究了四环素(1、10、100、1 000、10 000和100 000 μg/L)对人肝细胞L-02的毒性作用,并通过测定细胞培养上清液中和细胞内生化指标,明确了四环素诱导L-02损伤的作用机制。结果表明,四环素对L-02细胞有毒性作用,且随着四环素浓度的增加,其存活率下降。同时,细胞培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性均显著增加,并随着四环素处理剂量的增加而逐渐升高;而细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性均降低,丙二醛(MDA)含量显著升高。上述研究结果表明,四环素对人体外肝细胞L-02具有毒害作用,四环素诱导L-02细胞的损伤机制与破坏肝细胞膜的完整性、影响肝功能和诱导氧化应激效应有关。     

砷对水稻生长发育的影响及其原因

低浓度的砷对水稻生长发育有刺激作用,砷浓度较高时则会对水稻产生严重的毒害作用。砷的毒害作用不仅有十分明显的外观症状,而且还会使水稻的生长发育推迟。刺激作用的机理可能与砷合理地抑制植物呼吸、减少光合产物的无益消耗有关。砷的毒害作用所造成的水稻籽粒减产,是由于穗粒数、结实率、有效穗、千粒重四个产量构成因素受砷的毒害作用共同影响的结果。刚进入土壤系统时,As（Ⅲ）的毒性比As（Ⅴ）大;但随着时间的推移,它们在对土壤和植物系统的影响方面的差异会不断缩小。     

硫酸铜对金鱼急性毒性及肝细胞超微结构的影响

采用静水法生物测试,探讨硫酸铜对金鱼的急性毒性作用。结果表明:当水温为(12±2)℃、pH为6.7～7.2时,CuSO4对金鱼(墨龙睛)24、48、72和96h的LC50分别为21.88、15.85、12.59和9.12mg·L-1,SC为0.912mg·L-1。应用透射电镜技术,观察了对照组和高毒浓度试验组金鱼肝细胞的超微结构。结果表明:高毒浓度试验组金鱼肝细胞超微病理变化明显,主要表现为染色质聚缩于核中央,线粒体空泡化、嵴乱而减少,粗面内质网断裂、脱粒、解聚。     

2种碘制剂对异育银鲫鱼苗的急性毒性试验

采用常温静水实验法,分别探讨了聚维酮碘、碘三氧对异育银鲫(Carassius aurutus gibelio)鱼苗(体长1.0～1.5 cm)的急性毒性效应.结果表明,聚维酮碘对异育银鲫鱼苗24 h、48 h、96 h的半致死浓度分别为43.45 mg/L、24.21 mg/L、21.38 mg/L,安全浓度为2.14 mg/L;碘三氧对异育银鲫鱼苗24 h、48 h、96 h的半致死浓度分别为52.36 mg/L、 33.11 mg/L、26.73 mg/L,安全浓度为2.67 mg/L.     

汉江中游银鮈的胚胎发育

于2004年5~8月对在汉江鱼类资源调查中采集的银鮈Squalidus argentatus卵的胚胎发育过程进行了观察。结果表明,受精卵吸水膨胀后具双层卵膜,内、外膜均吸水膨胀呈半透明状,外膜具微粘性。卵外膜直径为(3.60±0.42)mm,内膜直径为(1.88±0.12)mm;胚胎发育分为4个阶段、50个发育期。汉江中游银鮈与四大家鱼的胚胎发育趋势相似,但胚胎大小仅相当于家鱼的1/2~2/3,原肠期胚层下包较少,尾泡在听囊之前出现,尾鳍出现后至孵出前,胚体受内膜影响尾部向头部弯曲,胸鳍原基期在孵出前出现,胚前发育时间在相同温度条件下比家鱼少3~5 h;口裂在鳃弧出现后出现,没有明显的眼黄色素期,肠管形成后出现鳔的雏形,稚鱼阶段肌节有37对。     

山羊胚胎原始生殖细胞的分离与培养

选择受精后30～50d的关中奶山羊胎儿为材料,参照小鼠原始生殖细胞(PGCs)分离得到了山羊的PGCs,将其分别培养在STO饲养层上,或与同源山羊成纤维细胞(GEF)及山羊睾丸支持细胞(GSCs)共培养。结果表明,3种方法均能获得类EG细胞。分离得到的类EG细胞在STO饲养层上仅传4代;培养在GEF上的效果最差,传至第3代时丢失;而在GSCs上培养的效果最好,可传6代。     

高海拔孵化鸡胚死亡曲线分析

利用2阶段增长曲线模型拟合藏鸡和2种低地鸡及其杂交种蛋在2900m（西藏林芝）和3650m（西藏拉萨）海拔的孵化胚胎死亡曲线，分析海拔高度对不同鸡种胚胎死亡的影响。结果表明该模型适宜拟合鸡蛋高海拔孵化时的胚胎死亡规律，拟合度高。藏鸡是高原适应品种，在2个海拔环境中胚胎死亡率均较低。在2900m海拔孵化时，各品种胚胎第l死亡高峰出现在第2．30～4．05d，第2高峰期出现在第17．20～17．68d．品种间相差不大：但藏鸡的第1高峰期持续时间相时较长，为4．04～9．92d；低地鸡和杂种鸡为2．59～3．93d。海拔从2900m升高到3650m，胚胎死亡率增加33．48％～54．12％；同时藏鸡第2高峰期死亡比例增加7．70％～15．65％；低地鸡第2高峰持续期延长13．7l～15．44d；杂交鸡第1高峰期死亡比例增加了5．55％～7．34％，持续期延长0．15～0．66d。