动物源性食品中糖皮质激素残留检测方法的研究进展

糖皮质激素常用于治疗家畜的炎症反应、免疫性疾病、牛的酮病等,并且能提高饲料的转化率,促进畜禽的生长,因而广泛用于畜牧业中。然而,动物生长过程中过量使用糖皮质激素会导致其在动物源性食品中残留,给人体健康带来极大的危害。世界各国对动物源性食品中糖皮质激素残留实施愈来愈严格的监控,对各种检测方法也提出了越来越高的要求。本文介绍了糖皮质激素在畜牧业中的应用、糖皮质激素残留的危害,并对其残留检测方法进行综述。     

应用PCR技术检测空肠弯曲菌及结肠弯曲菌的研究

本研究根据空肠弯曲菌及结肠弯曲菌的16s rRNA基因相同保守序列来设计引物,建立了一种PCR检测方法,该方法具有较强的特异性及灵敏性,其对空肠弯曲菌及结肠弯曲菌的最低检测限度为5 CFU/mL,它无需增菌培养过程可以直接对样品进行检验,在对鸡肉样品空肠弯曲菌及结肠弯曲菌的检测中取得了较好的效果.     

BA-ELISA快速检测鱼源沙门氏菌的研究

本研究建立了快速检测鱼源沙门氏菌的BA-ELISA工作程序。该程序灵敏度为105个/mL,可经受108个/mL杂菌的干扰,对含有10个以上沙门氏菌的接种标本经21～23h两步增菌后即可检出,可在25～27h内报告结果,比常规分离培养方法缩短3～5d。从6个品种的498尾淡水鱼和7个品种的160尾海水鱼,共采集标本778份,以常规分离培养法检出29份阳性标本,分离率为3.7%。对包括该29份分离阳性标本在内的184份鱼源标本实施BA-ELISA的结果表明,两法的符合率为96.73%,BA-ELISA法的敏感性为100%(29/29),特异性为96.1%(149/155)。独立性检验表明,两法检测结果间有极显著意义的一致性(P<0.01)。血清学分型表明,分离的菌株全部为鼠伤寒沙门氏菌(1,4,5,12:i:1,2)。     

裂谷热诊断技术研究进展

裂谷热(RVF)是由蚊传播的急性、以高热为特征的病毒性传染病,主要感染牛、羊等哺乳动物,也可感染人,被OIE列为A类疫病.虽然我国目前尚未发生RVF的报道,但近年来该病的分布范围有不断扩大的趋势.随着经济全球化的发展,RVF对我国的畜牧业以及人类的健康构成威胁.在国内没有报告RVF病例的情况下,国内对RVF的认识普遍不足,因此需要国境口岸加强对裂谷热进行检测和监测,防止RVF传入是必需的,为加强对裂谷热检测技术的认识,现对裂谷热诊断技术的研究进展进行综述.     

猪萎缩性鼻炎凝集反应抗原的制备及应用

为快速地诊断猪萎缩性鼻炎及监测其免疫状况,本试验在对支气管败血波氏杆菌保存菌种进行复苏和全面鉴定的基础上,制备了猪萎缩性鼻炎凝集反应抗原,经凝集反应试验表明,该抗原在PBS中不发生自凝,与猪传染性胸膜肺炎、猪喘气病和猪瘟的阳性血清均无凝集反应,而对猪萎缩性鼻炎标准阳性血清的凝集效价高达1∶10 240以上,具有较高的特异性和敏感性;对20份免疫母猪所产仔猪血清样本进行检测,检出率为95%.     

广东地区蓝舌病流行病学初步研究

为探明广东省牛羊蓝舌病(BT)的流行情况,本研究于2013年与2014年的4月~7月在广东省13个市的不同牛场和羊场随机采集716份血清样品。采用竞争性ELISA检测方法,对这些血清样品进行BT病毒(BTV)抗体检测,结果显示BTV抗体的阳性率为56.70%(406/716)。其中牛和羊BTV抗体平均阳性率分别为69.62%(362/520)和22.45%(44/196),表明广东省牛羊普遍存在BTV感染,而且牛的感染率比羊高。通过对新生犊牛的BTV抗体跟踪,分析其母源抗体的存在以及其维持时间,结果显示新生犊牛能够获得7周以上的被动免疫保护力。     

用四重PCR检测方法检测产单核细胞李斯特菌

为了同时快速准确的检测产单核细胞李斯特菌以及是否为有毒力的产单核细胞李斯特菌,根据相关文献报道的四重PCR方法,针对该菌的种特异性基因inl A基因进行引物设计,扩增片段大小为800bp,结果应用该PCR法可特异性的扩增出目的基因片段,与GenBank上发表的序列同源性为97.3%。同时通过对毒力基因inlB,inlC和inlJ的检测用来判断菌株的相关毒力。而同一属的其他菌种无害李斯特菌(L.innocua),韦氏李斯特菌(L.welshimeri)均无特异条带,嗜水气单胞菌(J-1),产气荚膜梭菌(C57-13),大肠埃希菌(ATCC 25922),鼠伤寒沙门菌(C79-32),金黄色葡萄球菌(ATCC 25923)结果均为阴性。对临床上送检的23份样品进行四重PCR方法检测并同时与国家标准GB/T22429-2008食品中单核细胞增生李斯特氏菌的快速筛选检验中使用的检测方法进行比对,两种检测方法的结果完全符合,均检测出7份阳性样品。并且四重PCR法表明这7份阳性样品中的产单核细胞李斯特菌均携带有3种毒力因子(inlB,inlC和inlJ),因此该四重PCR法可用于快速鉴定是否是有毒力的产单核细胞李斯特菌,为有效预防控制产单核细胞李斯特菌污染提供技术支撑。     

2011年-2013年滨州及其周边地区4种猪病毒性疾病的流行情况分析

通过对滨州及其周边地区2011年-2013年316个场次采集病料进行猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒与猪圆环病毒2型的检测,并对检测结果进行了统计分析,了解滨州及其周边地区上述4种疫病的流行状况。     

布鲁氏菌鉴定和检测方法研究进展

布鲁氏菌是重要的人畜共患病病原菌，其鉴定和检测方法受到国内外的普遍重视。本文对近年来布鲁菌DNA同源性及其内切酶图谱分析、血清学检测、PCR扩增、核酸探针杂交等鉴定、检测方法进行了综述，并展望了分子生物学技术在布鲁氏菌快速、准确鉴定、检测中的良好前景。     

Development of an Indirect ELISA for the Detection of Antibodies against Peste-des-petits-ruminants Virus in Small Ruminants

Peste des petits ruminants (PPR) is an acute, febrile, highly contagious and economically important viral disease of small ruminants. A polyclonal antibody based indirect ELISA was developed for detection of antibodies to PPR virus in the serum samples of goats and sheep using purified PPR viral antigen propogated in Vero cell culture. A threshold (cut-off) value was set as twice the mean of the negative population based on the distribution of known negative serum samples in respect of PPR virus antibodies in the test. A total of 1544 serum samples from goats and sheep were screened by indirect ELISA and competitive ELISA. The indirect ELISA compared very well with competitive ELISA, with a high degree of specificity (95.09%) and sensitivity (90.81%). When compared with virus neutralization test, the present assay had 100% specificity and 80% sensitivity. With serum samples, the assay could clearly differentiate animals from the infected population from uninfected ones. These results suggest that the indirect ELISA may be a good alternative tool to competitive ELISA for seroepidemiological surveys.