乳清培养保加利亚乳杆菌的研究

试验以乳清粉作为培养保加利亚乳杆菌的基质成分,在恒定pH 6.9、恒定温度42℃下进行发酵试验。通过正交试验确定了增殖因子的添加量,即0.10%MgSO4,0.10%Tween-80,0.15%CaCO3,0.50%NaAC。经培养活菌数最大值达到0.46×109 cfu.mL-1,接近相同条件下以脱脂乳为培养基的活菌数。     

患真菌性皮肤病奶牛血液中白细胞分类计数及酯酶染色阳性T淋巴细胞的检测与分析

为探讨T淋巴细胞在皮肤真菌病奶牛中的作用,对患皮肤真菌病的奶牛和健康对照牛静脉血中的T淋巴细胞数量进行了检测。采用酯酶染色法观察并记录静脉血中酯酶染色T淋巴细胞的数量,并用瑞氏染色对白细胞进行分类计数。结果表明,患病奶牛的T淋巴细胞在淋巴细胞中的百分比明显高于健康对照奶牛,说明T淋巴细胞在抗皮肤真菌病免疫中发挥了重要的作用。     

大豆凝集素对小肠上皮细胞和红细胞凝集能力的研究

本文旨在测定纯化的大豆凝集素对兔和鸡小肠上皮细胞和红细胞的凝集活性。测定大豆凝集素对红细胞的凝集能力时,采用2%兔红细胞悬液,测定了使兔红细胞50%凝集的蛋白质浓度。测定对兔小肠上皮细胞的凝集能力时,采用荧光标记SBA与新鲜小肠上皮细胞结合后,观察荧光显微镜下荧光结合细胞比例的方法定量。经血凝试验结果表明,使兔红细胞50%凝集的SBA蛋白质浓度为2.50~3.69μg/mL,而SBA对鸡的红细胞没有凝集作用。SBA对兔小肠上皮细胞有结合能力,结合率为30%左右。试验结果说明大豆凝集素的血凝活性具种属特异性,用SBA与小肠上皮细胞的结合率作为评价其抗营养活性的指标具一定可行性。     

南方鲇源豚鼠气单胞菌胞外产物活性与致病性研究

采用琼脂扩散法测定了南方鲇源豚鼠气单胞菌胞外产物酶活性和溶血活性,同时对胞外产物的细胞毒性和其致病性进行了研究。结果显示:南方鲇源豚鼠气单胞菌胞外产物具有蛋白酶、脂酶、明胶酶和脲酶活性,但不具有淀粉酶和卵磷脂酶活性,具有很强的溶血活性和细胞毒性。肌肉注射感染发现,其对南方鲇有强致病性,其LD50为每千克鱼体重0.802 mg;注射后的南方鲇肌肉、心、肝、肾、脾、肠和胃等组织发生了严重组织病理变化,骨骼肌和心肌坏死断裂,炎症细胞浸润;肝脏严重空泡变性;肾小管上皮细胞变性、坏死、间质内大量炎症细胞浸润;脾充血、出血,淋巴细胞减少,胃肠黏膜上皮细胞变性、坏死、脱落。     

狂犬病病毒糖蛋白基因的克隆及其二级结构和B细胞抗原表位预测

对狂犬病病毒CVS株糖蛋白基因进行克隆与测序,推导出相应的氨基酸序列。然后采用Gam-ier-Robson法和Chou-Fasman法预测糖蛋白的二级结构,用Kyte-Doolittle法、Emini法和Jameson-Wolf法分别预测蛋白质的疏水性、表面可能性和抗原指数,并综合分析预测糖蛋白的B细胞抗原表位。结果表明,该蛋白结构中含有少量的α螺旋、较多的β折叠以及较为丰富的转角区域,在序列的121~126、133~137、161~165、191~193、201~204、214~216、221~225、264~267区域或其附近最有可能是B细胞抗原表位的优势区域。     

Mixotrophy in a Local Strain of Nannochloropsis granulata for Renewable High-Value Biomass Production on the West Coast of Sweden

A local strain of Nannochloropsis granulata (Ng) has been reported as the most productive microalgal strain in terms of both biomass yield and lipid content when cultivated in photobioreactors that simulate the light and temperature conditions during the summer on the west coast of Sweden. To further increase the biomass and the biotechnological potential of this strain in these conditions, mixotrophic growth (i.e., the simultaneous use of photosynthesis and respiration) with glycerol as an external carbon source was investigated in this study and compared with phototrophic growth that made use of air enriched with 1–2% CO₂. The addition of either glycerol or CO₂-enriched air stimulated the growth of Ng and theproduction of high-value long-chain polyunsaturated fatty acids (EPA) as well as the carotenoid canthaxanthin. Bioassays in human prostate cell lines indicated the highest antitumoral activity for Ng extracts and fractions from mixotrophic conditions. Metabolomics detected betaine lipids specifically in the bioactive fractions, suggesting their involvement in the observed antitumoral effect. Genes related to autophagy were found to be upregulated by the most bioactive fraction, suggesting a possible therapeutic target against prostate cancer progression. Taken together, our results suggest that the local Ng strain can be cultivated mixotrophically in summer conditions on the west coast of Sweden for the production of high-value biomass containing antiproliferative compounds, carotenoids, and EPA.     

A型肉毒毒素单克隆抗体的制备及初步鉴定

制备了A型肉毒毒素(BoNT/A)单克隆抗体(mAb),并对其免疫学特性进行了初步鉴定.用BoNT/A重组抗原(BoNT/A Hc)免疫Balb/c小鼠后,取脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系Sp2/0融合,经3次亚克隆建立了3个稳定分泌抗BoNT/A抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2A8、4F7和2F2,3株抗体均属IgG1亚型,效价为10-4～10-5,3株单抗抗相同抗原表位,交叉反应结果表明,3株单抗与BoNT/A的类似物均无交叉反应,具有较高的特异性.     

黄颡鱼鳍组织培养及染色体制备条件的研究

以黄颡鱼Pelteobagrus fulvidraco幼鱼鱼鳍为组织来源,采用组织块培养法,对其短期培养及染色体制片所需的消毒方法、培养基、培养温度、秋水仙素浓度和低渗处理时间等条件进行了探索,初步建立了以鳍组织培养法提供材料制作黄颡鱼染色体标本的方法。     

雌激素和雄激素对鸡成骨细胞增殖、凋亡、细胞周期及其受体mRNA转录的影响

为探讨雌激素和雄激素对鸡胚额骨成骨细胞(OB)增殖、凋亡、细胞周期及其受体mRNA转录的影响,用雌激素(17β雌二醇)和雄激素(十一酸睾酮)单独以及联合处理鸡胚额骨成骨细胞,MTT法测定细胞增殖率,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期的变化,荧光定量PCR检测成骨细胞中雌激素受体(ER)及雄激素受体(AR)mRNA的转录。结果显示:一定浓度的雌激素或雄激素在24h内均能促进成骨细胞的增殖,促进成骨细胞的细胞周期进程,但对细胞凋亡无明显作用。雌激素单独或联合雄激素作用能上调ERmRNA的转录,对ARmRNA的转录无明显作用。     

甘蔗胚性细胞团诱导影响因子研究

以不同基因型甘蔗品种新台糖22号、新台糖16号、桂糖21号及拔地拉为供试材料,以近生长点0～3 cm的嫩叶鞘组织为外植体、MS固体培养基为基本培养基,研究诱导初期不同分化刺激培养时间和不同激素组合（2,4-D 1.0～7.0 mg/L、ABA 0～2.0 mg/L）对愈伤组织胚性细胞团诱导或分化的影响。结果表明,在MS＋6-BA 1.5 mg/L＋NAA 0.5mg/L培养基中对嫩叶鞘愈伤组织进行分化刺激培养24～72 h,可显著提高胚性细胞团的诱导率,以培养48 h的诱导率最高,平均诱导率为44.4%,比对照增加15.7个百分点;在不同激素组合培养基中,以在培养基MS＋2,4-D 3.0 mg/L＋ABA0.5 mg/L中培养的不同甘蔗品种胚性细胞团诱导率较高、生长较好,其次是MS＋2,4-D 3.0 mg/L;在分化培养基MS＋6-BA 1.5 mg/L＋NAA 0.1 mg/L中对来自不同诱导培养基的胚性细胞团进行分化培养,结果发现在MS＋2,4-D 3.0 mg/L＋ABA 0.5 mg/L和MS＋2,4-D 3.0 mg/L中诱导的胚性细胞团的绿苗分化率较高,不同甘蔗品种平均绿苗分化率分别为65.0%、64.9%,但绿苗生根率较低。