饲料原料基质中不同营养成分对黄曲霉毒素B1合成关键基因表达影响的研究

通过研究饲料基质中不同营养成分对黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)合成关键基因的影响,探讨营养元素影响AFB1合成的作用机制,为饲料生产中AFB1污染的防治提供一定的科学依据。在课题组前期研究的不同饲料原料营养成分组成的差异以及不同营养成分对黄曲霉生长和产毒作用的基础上,进一步研究营养成分对AFB1合成中关键基因(aflR、aflS、aflD、aflM和aflP)表达量的影响。结果显示:(1)相比于1.0%的蔗糖、葡萄糖、麦芽糖和水苏糖,3.0%的可溶性糖均能明显促进aflS、aflD、aflM和aflP基因表达,且葡萄糖(P<0.01)和水苏糖(P<0.001)也能促进了aflR基因的表达。(2)天冬氨酸、谷氨酸和精氨酸都可以不同程度地促进关键基因aflR、aflS、aflD、aflM和aflP的表达。(3)当培养3 d时,锌能够显著地促进基因aflR、aflS、aflD、aflM和aflP的表达(P<0.001);培养5 d时,铜明显抑制了这5个关键基因的表达。综上所述,可溶性糖、氨基酸和微量元素均可通过对黄曲霉毒素(aflatoxin,AF)合...     

狍鹿ANXA-2基因编码序列的克隆及序列分析

首次从狍鹿鹿茸组织中成功克隆出包含膜联蛋白A2(ANXA-2)基因全部编码区的c DNA序列。通过生物信息学软件分析表明,该基因的开放阅读框共包含1 020个碱基,编码339个氨基酸,编码蛋白质的相对分子质量为38 612.09,理论等电点为7.224。蛋白保守区预测表明,该基因的蛋白保守区共有4个Annexin结构域。同源比对表明:ANXA-2基因与梅花鹿、马鹿、牛的CDS区的同源性分别为98%、98%和96%。用Mega5.0软件进行物种间遗传距离计算,结果表明该基因与蟾、原鸡的遗传距离最远,与梅花鹿、牛、羊的遗传距离最近。     

基因编辑,生命科学领域的一场新革命

本文介绍了基因编辑技术的定义、发展和优势,简介了其在疾病治疗、生物制药、器官移植、品种改良等方面的应用。     

miR-709靶向调控IGF1基因的表达

在动物生长调控过程中,IGF1是发挥关键作用的垂体-IGF1-靶器官生长轴上最重要的因子之一。IGF1的表达与动物出生前后的生长均密切相关。miRNAs是1类非编码单链RNA,通过碱基互补配对的方式与靶基因的3′UTR区部分或完全互补,降解靶基因的转录产物或者抑制转录产物的翻译,从而起到转录后调控靶基因表达的作用。本研究以在大鼠垂体中高表达的miR-709为研究对象,通过生物信息学分析、双荧光素酶报告系统鉴定确定IGF1为其直接靶基因,然后进一步采用qRT-PCR及Western blot技术检测miR-709对IGF1表达量的影响。结果显示,miR-709显著抑制IGF1在RNA及蛋白质水平的表达量,表明miR-709可通过直接靶向IGF1基因抑制其表达。本研究将为miR-709调控动物生长研究领域提供数据。     

牛乳头瘤病毒基因1型新疆南疆SY-12株全基因序列分析

为了掌握牛乳头瘤病毒基因1型(BPV-1)全长基因序列特征,提取已鉴定为牛乳头状瘤病毒基因1型病料的病毒基因组DNA,参照GenBank中参考序列设计扩增引物、测序引物,扩增各片段,纯化回收后送样测序,对得到序列进行全长序列分析。结果显示,新疆南疆SY-12株为BPV-1基因型,其全基因组长度为7 946 bp,具有BPV-1基因型的结构特征,与GenBank中的BPV-1基因型参考株核苷酸同源性高达99.4%。与BPV-2、BPV-13基因型参考株的进化关系最近,同为Delta属。表明新疆南疆BPV-1基因型SY-12株为Delta属牛乳头瘤病毒。     

山黧豆CASase基因的克隆及RNAi载体的构建

β-腈基丙氨酸合成酶（CASase）是调控山黧豆（Lathyrus sativus）内源毒素β-ODAP合成的关键酶。本研究以山黧豆幼根RNA为模板,利用RT-PCR扩增了505 bp的山黧豆CASase基因序列;通过Gateway BP反应将扩增片段连接到入门载体构建pENTR-CASase。经测序验证后,将目的片段插入到植物表达载体构建pSGRNAi-CASase,并将其转化到农杆菌GV3101中;为进一步的遗传转化奠定了基础。     

小檗碱对脂多糖诱导的小鼠小肠炎症的保护作用

为探究小檗碱对脂多糖诱导小鼠肠道损伤模型的影响,试验将小鼠随机分为5组,小檗碱组灌胃不同浓度小檗碱,观察小鼠行为变化,12小时后处死,制作小肠病理切片,ELISA法检测十二指肠中IL-1β、IL-6水平,免疫印迹法检测十二指肠中MD-2、TLR4、NF-κB的表达水平.结果显示,与阴性对照组相比,LPS组小鼠精神沉郁,...     

家蚕追寄蝇孵化酶的基因克隆与特性分析

家蚕追寄蝇寄生于家蚕幼虫引起的蝇蛆病危害蚕业生产。为从分子水平研究家蚕追寄蝇的孵化机制,以发育1.5 d的蝇卵为材料,结合RACE技术获得家蚕追寄蝇孵化酶基因的全长cDNA,命名为EsHE(GenBank登录号：ON042475)。EsHE基因cDNA全长1 507 bp,包含159 bp 5′UTR、412 bp 3′UTR和936 bp的完整ORF,编码311个氨基酸;EsHE蛋白序列含有孵化酶特征序列HELMHVLGFMHE(锌结合基序)和YDYGSVMHY(Met-转角基序);系统进化树分析显示,家蚕追寄蝇与丝光绿蝇的孵化酶亲缘关系最近。qRT-PCR检测EsHE基因在家蚕追寄蝇卵期的表达模式,发现在卵产后36 h EsHE表达量开始大幅上升,至孵化前的48 h达到最高水平;且在3龄幼虫中肠组织高水平表达。这些结果暗示EsHE与家蚕追寄蝇的胚胎发育和孵化密切相关,还可能参与幼虫期的食物消化、蛋白质代谢等生物学过程。通过以家蚕追寄蝇基因组DNA为模板扩增发现,EsHE基因含有1个内含子(2 638 bp)和2个外显子(第1外显子1 005 bp,第2外显子502 bp),基因结构...     

家畜基因转移技术的研究现状与展望（下）

4 转移基因技术现存问题 虽然猪、牛、绵羊、兔等多种家畜的基因转移近年来相继完成,但这一技术尚存在一系列问题,使之在近期还难以成为家畜育种的有效手段。4.1 成本高,效率低 基因转移不仅要配置基因工程所必需的实验装置,以进行体外目的基因的分割、培养、重组。为了获取大量受精卵,还要有大批供体动物以资利用。另外,还要有较大数量的受体家畜。这在一般研